Функциональная активность гранулоцитов бронхов в формировании цитокинового профиля у больных бронхиальной астмой при реакции дыхательных путей на холодовой стимул

Резюме

Введение. Показателями функциональной активности гранулоцитов бронхов у больных бронхиальной астмой (БА) служат экспрессия генов цитокинов Th2- и Th1-типов и эпителиальная дисфункция, связанные с продукцией гранулоцитами информационных молекул воспаления и оксидативного стресса.

Цель исследования - изучение активности гранулоцитов в формировании цитокинового профиля и структурных признаков эпителиальной дисфункции у больных БА с холодовой гиперреактивностью дыхательных путей.

Материал и методы. Обследованы 22 больных персистирующей БА с холодовой гиперреактивностью дыхательных путей (1-я группа) и 20 больных БА с отсутствием реакции на холодный воздух (2-я группа). Регистрировали показатели функции внешнего дыхания методом спирометрии, выполняли пробу 3-минутной изокапнической гипервентиляции холодным (-20°С) воздухом (ИГХВ). В мокроте, собранной до и после ИГХВ, анализировали цитоз, состав, степень деструкции и интенсивности цитолиза клеточных элементов, содержание цитокинов (ИЛ-1β, ИЛ-8, ФНОα, ИЛ-18, ИЛ-5, ИЛ-10, ИЛ-13).

Результаты. В мокроте больных 1-й группы в ответ на пробу ИГХВ наблюдалось увеличение цитоза и уменьшение количества клеток бронхиального эпителия вследствие деструкции и цитолиза эпителиоцитов. После пробы ИГХВ в 1-й группе по отношению ко 2-й группе регистрировалось повышение концентраций ИЛ-1β, ИЛ-8 и ФНОα. Найдена тесная связь между концентрацией ИЛ-1β и ИЛ-8 в мокроте после пробы и высоким уровнем цитоза, а также между содержанием ИЛ-18 до и после пробы ИГХВ и уровнем цитоза.

Заключение. В формировании холодовой гиперреактивности дыхательных путей важное место занимают процессы деструкции и цитолиза нейтрофилов, сопровождающиеся повышением продукции провоспалительных цитокинов, а также структурными признаками эпителиальной дисфункции при реакции бронхов больных БА на холодовой стимул.

Ключевые слова:бронхиальная астма; холодовая гиперреактивность дыхательных путей; гранулоциты бронхов; активность нейтрофилов; деструкция и цитолиз эпителия бронхов; провоспалительные цитокины

Для цитирования: Пирогов А.Б., Приходько А.Г, Наумов Д.Е., Перельман Ю.М. Функциональная активность гранулоцитов бронхов в формировании цитокинового профиля у больных бронхиальной астмой при реакции дыхательных путей на холодовой стимул. Иммунология. 2020; 41 (5): 432-440. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2020-41-5-432-440

Финансирование. Исследование не имело спонсорской поддержки.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Введение

При заболеваниях легких популяция гранулоцитов участвует в клеточных взаимодействиях, регулирующих экспрессию каскада цитокинов, является генератором активных форм кислорода (АФК) и других сигнальных молекул воспаления. Бронхоспастический ответ больных бронхиальной астмой (БА) на холодовой триггер ассоциирован с активацией термочувствительных катионных каналов с транзиторным рецепторным потенциалом (TRPM8), экспрессированных на эпителии дыхательных путей [1], связан с полиморфизмом экспрессии генов цитокинов и характеризуется увеличением концентрации интерлейкина(ИЛ)-10, ИЛ-5 и ИЛ-1β в индуцированной мокроте [2]. Таким образом, реализуется концепция антагонистических и синергических взаимоотношений цитокинов Th2- и Th1-типов в патогенезе БА с учетом влияния на Тh2-ответ специфичного для астмы транскрипционного фактора GATA3, обусловливающего гиперреактивность и ремоделирование бронхов, индукцию экспрессии Тh2-цитокинов, дифференцировку CD4-T-клеток в клетки Th2-rarn, ингибирование Тh1-специфичных факторов [3-5]. Причастность к аллергическому воспалению провоспалительного фактора транскрипции NF-кВ-зависимых Th1-цитокинов подтверждается фактом резкого увеличения связывающей активности NF-кВ у больных тяжелой БА [5]. Не исключено, что холодовая гиперреактивность дыхательных путей (ХГДП) может быть сопряжена со снижением противовирусного иммунитета за счет подавления антивирусной и иммуномодуляторной активности интерферонов (ИФН) респираторного тракта [6], провоцирующим на фоне активации NF-кВ и экспрессии генов провоспалительных цитокинов персистенцию инфекции дыхательных путей - одного из потенциальных независимых механизмов неконтролируемого течения астмы [5].

Представление о таких ключевых характеристиках БА, как воспаление, гиперреактивность, ремоделирование бронхов и эпителиальная дисфункция в качестве ведущего стимулятора ремоделирования, а также положение о связи эпителиальной дисфункции с низким уровнем экспрессии факторов антиоксидантной защиты, в частности супероксиддисмутазы, способствующим увеличению восприимчивости эпителиальных клеток к агрессивному действию оксидантов [7], побуждают к поиску зависимости эпителиальной дисфункции от функциональной активности гранулоцитов-индукторов оксидантов и воспаления. Эпителиальная дисфункция, базирующаяся на явлениях альтерации, деструкции, регенераторной пролиферации, апоптозе, фиброплазии и метаплазии бронхиального эпителия [7], находит отражение в росте воспалительной активности эпителиоцитов и способности клеток в условиях аллергического воспаления к усиленной экспрессии NF-kB [8]. Индукция NF-kB эпителием ассоциируется с провоспалительным цитокиновым фоном, активирующим функции нейтрофилов, которые, в свою очередь, самостоятельно синтезируют и продуцируют цитокины -нейтрофилокины (ГМ-КСФ, ФНОα, ИЛ-1, ИЛ-6, ИЛ-8), действующие аутокринно на нейтрофилы [9], что стимулирует нейтрофильное и лимфоцитарное воспаление бронхов, вызывает развитие гиперреактивности дыхательных путей [8].

Цель исследования - изучение функциональной активности гранулоцитов бронхов в аспекте развития деструктивно-цитолитических проявлений бронхоэпителиальной дисфункции и изменений профиля цитокинов у больных БА с холодовой гиперреактивностью дыхательных путей.

Материал и методы

В сравнительном исследовании приняли участие 42 больных обоего пола в возрасте 41 (28; 46) года с пер-систирующей БА. В 1-ю группу включены 22 больных с холодовой гиперреактивностью дыхательных путей, во 2-ю группу - 20 больных с отсутствием реакции на холодный воздух на момент сбора данных.

Клиническое исследование выполнено в соответствии с Хельсинкской декларацией Всемирной медицинской ассоциации "Этические принципы проведения научных медицинских исследований с участием человека" с поправками 2000 г., WMA Declaration of Helsinki - Ethical Principles for Medical Research Involving Human Subjects (2013), "Правилами клинической практики в Российской Федерации", утвержденными Приказом Минздрава России от 19.06.2003 № 266. Все пациенты подписывали информированное согласие на участие в исследовании в соответствии с протоколом, одобренным локальным Комитетом по биомедицинской этике Дальневосточного научного центра физиологии и патологии дыхания (протокол № 121 от 25.10.17).

Критерии включения больных в исследование: наличие установленного диагноза БА длительностью более 2 лет; объем форсированного выдоха за 1-ю секунду (ОФВ1) более 75 % от должной величины; терапия комбинацией ингаляционного глюкокортикосте-роида/длительно действующего β2-адреномиметика (по бекламетазону в дозе менее 1000 мкг/сут) не менее 4 нед до включения в исследование; письменное информированное согласие на участие в исследовании.

Дизайн исследования предусматривал физикальное обследование больных с оценкой клинического течения астмы; анкетный опрос по Asthma Control Test (АСТ, Quality Metric Inc., 2002); регистрацию функции внешнего дыхания (ОФВ1, %) методом спирометрии (Easy on PC, ndd Medizintechnik AG, Швейцария) с последующим сбором индуцированной мокроты; проведение пробы 3-минутной изокапнической гипервентиляции холодным (-20 °С) воздухом (ИГХВ) с определением степени падения ОФВ1 в процентах от исходной величины (ΔОФВ1, %) [10]; сбор спонтанно продуцируемой мокроты после проведения теста.

В образцах мокроты определяли клеточный состав и содержание ИЛ. Цитоз исследовали путем подсчета количества клеток в 1 мкл мокроты. С целью определения клеточного состава мазки препаратов мокроты выдерживали 10 мин в парах 40 % раствора формалина, окрашивали 4-5 % водным красителем Романовского-Гимза (рН 6,8), затем анализировали, используя светооптический иммерсионный микроскоп. Подсчитывали не менее 400 клеток в 100 полях зрения в центральных и периферических частях препарата. Число искомых клеток представляли в процентах от общего числа обнаруженных. Дополнительно при изучении препаратов мокроты, полученной после пробы ИГХВ, оценивали степень деструкции и интенсивности цитолиза гранулоцитов и бронхиального эпителия [11] с выделением 5 классов деструкции клеток в зависимости от изменений структурной целостности клеточных элементов: 0 - нормальная структура; I - частичное (не более 72) деструктивное повреждение цитоплазмы, нормальная структура ядра; II - значительная (более 72), но неполная деструкция цитоплазмы, частичное повреждение ядра; III - полная деструкция цитоплазмы, значительная деструкция ядра; IV - полная деструкция с распадом цитоплазмы и ядра. Вычисляли суммарный индекс деструкции клеток (ИДК, в усл. ед.) и индекс интенсивности цитолиза клеток как отношение наиболее разрушенных клеток к содержанию остальных поврежденных клеток (ИЦК, в усл. ед.):

где 0, 1, 2, 3, 4 - номера классов деструкции; n0, n1, n2, n3, n4 - количество клеток соответствующего класса.

Содержание ИЛ-5, ИЛ-13, ИЛ-1β, ФНОα, ИЛ-8, ИЛ-10 и ИЛ-18 в мокроте определяли на проточном цитометре "BD FACSCanto II" (BD, США) с использованием набора для мультиплексного анализа "LEGENDPlex" (BioLegend, США).

Статистический анализ полученного материала проводили с использованием программы "Автоматизированная система диспансеризации" [12] на основе стандартных методов вариационной статистики. При нормальном типе распределения использовали непарный и парный критерий t (Стьюдента). При распределении данных, отличных от нормального, применяли критерии Колмогорова-Смирнова и Манна-Уитни, при парном сравнении - критерий Уилкоксона. Описательная статистика количественных признаков представлена с помощью среднего арифметического, стандартной ошибки (M±m), а также медианы и квартилей - Me (Q1; Q3). С целью определения степени связи между 2 случайными величинами проводили корреляционный анализ по Спирмену либо Кенделу. Для всех величин принимали во внимание уровни значимости < 0,05).

Результаты

Больные 1-й и 2-й групп не отличались по уровню контроля - 21 (14; 23,5) и 21 (19; 24) баллов АСТ соответственно; р > 0,05) и функции дыхания (ОФВ1 101,2 ± 3,9 % и 94,1 ± 3,1 % соответственно; р > 0,05).

При анализе цитограмм мокроты у больных 1-й группы в ответ на пробу ИГХВ отмечено увеличение цитоза с 2,7 ± 0,5 клеток/мкл до 3,3 ± 0,5 клеток/мкл < 0,05) относительно 2-й группы (2,2 ± 0,3 клеток/мкл и 2,2 ± 0,3 клеток/мкл; р > 0,05). Популяция грануло-цитов в обеих группах была довольно многочисленной; содержание нейтрофилов и эозинофилов после пробы ИГХВ оставалось достаточно высоким. Обращает на себя внимание, что количество клеток бронхиального эпителия под воздействием холодового стимула значимо уменьшалось в обеих группах (см. рисунок), что являлось следствием зарегистрированных в мокроте после пробы ИГХВ явлений деструкции и цитолиза эпителиоцитов (табл. 1). Если показатели ИДК эпителия в 1-й и 2-й группах были близки по значению, то показатель ИЦК в 1-й группе был несколько выше, чем во 2-й группе. У больных 1-й группы отмечались более высокие по отношению к аналогичным показателям 2-й группы показатели количества тотально разрушенных клеток (IV класс деструкции) и клеток со значительным повреждением ядра и полным распадом цитоплазмы (III класс деструкции). Количество эпителиоцитов, относящихся к 0 и II классам деструкции, в 1-й и 2-й группах было практически равнозначным. Большее количество клеток, сохранивших неповрежденную структуру ядра и частичное (не более 1/2) деструктивное повреждение цитоплазмы (I класс деструкции), насчитывалось во 2-й группе (см. табл. 1).

Изменение в клеточном составе мокроты у больных бронхиальной астмой после пробы изокапнической гипервентиляции холодным воздухом

По оси абсцисс: содержание клеток (в процентах от общего числа); по оси ординат: Н - нейтрофилы, М - макрофаги, Э - эозинофилы, БЭ - бронхиальный эпителий; р - значимость различий показателей до и после пробы изокапнической гипервентиляции холодным воздухом.

Таблица 1. Характеристика деструктивно-цитолитических процессов после пробы изокапнической гипервентиляции холодным воздухом у больных бронхиальной астмой

Примечание. р - значимость различий показателя между группами. ИДК - индекс деструкции клеток; ИЦК - индекс интенсивности цитолиза клеток.

Таблица 2. Уровень содержания цитокинов в мокроте больных бронхиальной астмой до и после пробы изокапнической гипервентиляции холодным воздухом

Признаки более выраженной активности гранулоцитов после пробы ИГХВ прослеживались в 1-й группе. Стимуляция секреции гранулоцитов, проявляемая при деструкции и цитолизе в ответ на холодовой стимул, отражалась на параметрах деструкции и интенсивности цитолиза пулов нейтрофилов и эозинофилов. Так, показатели ИДК и ИЦК гранулоцитов у больных 1-й группы после пробы превышали аналогичные показатели 2-й группы (см. табл. 1).

В профиле цитокинов после пробы ИГХВ в 1-й группе по отношению ко 2-й группе регистрировалось повышение концентраций ИЛ-1β, ИЛ-8 и ФНОα (табл. 2, 3). Отмечена тенденция к холод-индуцирован-ному повышению концентрации ИЛ-18 после пробы в обеих группах больных (см. табл. 2, 3). При этом значения концентраций ТЬ2-цитокинов (ИЛ-5, ИЛ-10, ИЛ-13) в мокроте больных после острого холодового воздействия практически не отличались от исходных (см. табл. 2).

Таблица 3. Характер изменений концентрации цитокинов после пробы изокапнической гипервентиляции холодным воздухом

Обращает на себя внимание установленная связь между концентрацией ИЛ-1β и ИЛ-8 у больных 1-й группы после пробы и высоким уровнем цитоза мокроты (R = 0,59; р < 0,05 и R = 0,56; р < 0,05 соответственно). Кроме того, содержание ИЛ-18 до и после пробы ИГХВ также зависело от степени цитоза мокроты больных (R = 0,57; р < 0,05 и R = 0,55; р < 0,05 соответственно).

Обсуждение

Как следует из выполненных нами ранее работ, экзоцитоз или секреция гранулоцитами, главным образом нейтрофилами, лизосомальных ферментов осуществляется не только при физиологической дегрануляции, но и в результате деструкции и цитолиза клеток в условиях респираторного взрыва. Дифференциальным признаком деструкции является вакуолизация и фрагментация цитоплазмы гранулоцитов [13].

Среди ферментов, секретируемых лизосомами нейтрофилов, приоритетная для оксидативного стресса роль принадлежит миелопероксидазе (МПО) из класса оксидоредуктаз, катализирующей синтез высокореакционных галоген-содержащих соединений. Динамика уровня МПО, определяемой в мазках ИМ по реакции фермента с бензидином в присутствии перекиси водорода [8], связана со многими факторами: скоростью синтеза МПО в лизосомах, интенсивностью респираторного взрыва, потребностью в ферменте для реализации эффектов оксидативного и галогенирующего стресса вне клеток, аккумуляцией фермента в цитоплазматических гранулах, интенсивностью дегрануляции, деструкции и цитолиза клеток. В отличие от дегрануляции, при которой в экстрацеллюлярное пространство секретируются преимущественно сохранившие структуру гранулы с депонированными в них ферментами, при деструкции гранулоцитов происходит лабилизация лизосомальных мембран и во внешнюю среду проникает матрикс лизосом. В этом случае при выявлении пероксидазо-позитивных гранул в клетках на фоне вакуолизированной просветленной цитоплазмы отмечаются маркированные бензидином разреженные или единичные неярко окрашенные мелкие гранулы, размер которых не превышает 0,2-0,3 мкм [13]. Низкие концентрации МПО в гранулоцитах бронхов возникают в результате усиленного выброса фермента из клеток при интенсификации деструкции и цитолиза, вызывающего гиперпродукцию галоидных кислот и оксидантов, что способствует персистенции воспаления и поддержанию холодовой гиперреактивности дыхательных путей, снижению функции внешнего дыхания, усугублению клинических проявлений и трудностям достижения контроля болезни у пациентов с БА [13, 14].

Обусловленная экспортируемыми гранулоцитами и окислительными ферментами генерация активных форм кислорода и галогенов может стать причиной свободно-радикального повреждения крист митохондрий и разрушения эндоплазматического ретикулума бронхиального эпителия с последующей гибелью клеток [15]. Выдвинуто предположение, что в этом случае сигналы апоптоза передаются в эпителий не по прямому пути - от лигирования рецептора смерти до активации каспазного каскада и гибели клеток, а по пути, опосредованному деэнергизацией эпителиоцитов [15].

Развитие под влиянием деструкции эпителия бронхоспастической реакции связывают со стимуляцией при дезинтеграции эпителиального пласта суб- и интраэпителиально расположенных нервных окончаний -С-волокон, связанных с неадренэргическими/нехолин-эргическими ганглиями "третьей" сигнальной нервной системы (NANC), играющей особую роль при БА [7]. Проведение нервного импульса по С-волокнам приводит к высвобождению субстанции Р и нейрокининов А и В - нейротрансмиттеров с выраженными бронхокон-стрикторным и вазодилататорным эффектами, активирующих тучные клетки, макрофаги, Т- и В-лимфоциты, усиливающих сосудистую адгезию и являющихся хемоаттрактантами для эозинофилов и нейтрофилов. Воспалительное повреждение эпителия приводит к ингибированию вазоактивного интестинального пептида (VIP), нарушению выработки ПГЕ2, экспрессии провоспалительных цитокинов, хемоаттрактантов, ГМ-КСФ [7].

Гиперпродукцию ИЛ-1β, сопряженную с увеличением содержания воспалительного белка MIP-3α/ CCL20 и ухудшением легочных функций, связывают с нейтрофилией бронхиального воспаления при астме [16], которая преобладает в бронхиальном секрете больных при смешанном фенотипе с числом эозинофилов более 2 % и нейтрофилов более 40 %. В нашем исследовании доля нейтрофилов в клеточном бронхиальном инфильтрате превышала 40 %, с этим согласовывалось обнаруженное у больных 1-й группы существенное увеличение в ответ на пробу ИГХВ концентраций ИЛ-1β и ИЛ-8, указывающих на причастность пула нейтрофилов к манифестации ХГДП.

Известно, что с помощью ИЛ-8, ассоциирующегося с сочетанием у больных БА нейтрофильного бронхиального и системного воспаления [17, 18], осуществляется праймирование респираторного взрыва нейтрофилов [19]. В качестве хемокина ИЛ-8 играет ключевую роль в хемоаттракции нейтрофилов. Он стимулирует миграцию нейтрофилов из кровеносного русла в очаг воспаления, повышает в них концентрацию внутриклеточного Са2+, что обеспечивает движение лейкоцитов и активирует пентозофосфатный шунт в этих клетках, вызывая продукцию свободных радикалов, дегрануляцию и экзоцитоз нейтрофильных ферментов [20]. Интеграция ИЛ-8 с ИЛ-1, ГМ-КСФ, ФНОα и другими провоспалительными медиаторами, находящимися под регулирующим влиянием NF-kB, активирующего многочисленные гены, задействованные в иммунном, острофазовом и воспалительном ответах, потенцирует функции нейтрофилов [19, 20].

Экспрессии и активации NF-kB способствует ФНОα -провоспалительный цитокин, концентрация которого в 1-й группе в ответ на пробу ИГХВ была выше, чем у больных 2-й группы. Роль молекулы-маркера иммунопатологических процессов, характерных для БА, отводится бифункциональному ферменту CD38, сочетающему в себе активность рибозилциклазы аденозиндифосфата (АДФ) и гидролазы циклической АДФ-рибозы (цАДФР). CD38 экспрессируется клетками иммунной системы, а также лейомиоцитами сосудов и бронхов и регулируется многочисленными воспалительными медиаторами, включая ФНОα [21]. Вызванная ФНОα экспрессия CD38 приводит к активации NF-kB, потенцируя экспрессию множества провоспалительных генов с увеличением сократимости гладких мышц и бронхиального сопротивления [21, 22].

Плейотропным провоспалительным цитокином, стимулирующим продукцию ИФН-γ, ГМ-КСФ, ФНОα, ИЛ-1, ИЛ-2, молекул адгезии и факторов апоптоза, увеличивающим пролиферативную активность Т-лимфоцитов, повышающим литическую активность НК-клеток, участвующим в формировании клеточного и гуморального иммунитета, Th1- и Тh2-иммунном ответа, считается ИЛ-18 [23]. Мы наблюдали тенденцию к холод-индуцированному повышению его концентрации после пробы у больных обеих групп. Синхронность в увеличении продукции ИЛ-18, вероятнее всего, обусловлена широким спектром биологических эффектов этого цитокина, его универсальным участием в патогенезе воспалительных заболеваний и атопических реакций, к числу которых принадлежит и атопическая БА [23, 24].

Следует отметить, что концентрации Тh2-цитокинов (ИЛ-5, ИЛ-10, ИЛ-13) в мокроте больных после острого холодового воздействия практически не отличались от исходных. Известно, что ИЛ-13 является цитокином, регулирующим экспрессию CD38 на лейомиоцитах и способствующим, как и ФНОα, реализации гиперергического ответа этих клеток на бронхоконстрикторы [21, 22, 25], а ИЛ-5 рассматривается как основной маркер эозинофильного воспаления - медиатор дифференцировки эозинофилов из костномозговых клеток-предшественников, активации эозинофильной дегрануляции и секреции, ингибирования апоптоза [26]. Отсутствие динамики ИЛ-13, скорее всего, было связано с тем, что содержание лимфоцитов в бронхиальном секрете после пробы ИГХВ не отличалось от базовых значений. Стабильность концентрации ИЛ-5 ассоциирована с низкой модуляцией функциональной активности эозинофильного сегмента воспаления дыхательных путей при холодовом стрессе. В поиске возможной причины инертности изменений уровня ИЛ-10, также участвующего в аллергическом воспалении и Тh2-индуцированной гиперреактивности дыхательных путей [27], можно сослаться на ранее установленную в эксперименте зависимость между концентрацией ИЛ-10 и активацией экспрессии NF-kB в эпителии бронхов [8].

Значимость ИЛ-5, ИЛ-10, ИЛ-13 для реализации реакции дыхательных путей больных БА на холодовой стимул оказалась меньше, чем значимость ИЛ-1β, ИЛ-8, ФНОα, ИЛ-18, активирующих функцию нейтрофилов. Пул нейтрофилов можно рассматривать как основной регулятор смены фаз воспалительного ответа бронхов на холодовой стимул. Бронхоконстрикторная миссия пула нейтрофилов заключается не только в достаточно высоком содержании клеток в воспалительном паттерне бронхов, но и в том, что праймированные цитокинами, хемокинами, ростовыми факторами и другими медиаторами воспаления нейтрофилы выступают доминирующими продуцентами окислителей и свободных радикалов [19]. Высокая окислительная активность гранулоцитов определяет формирование профиля цитокинов при ХГДП, приобретая фатальное значение для повреждения и провоспалительной активности эпителиальной паренхимы десмо-эпителиального барьера в бронхах.

Параллельно с повышением в ответ на воздействие холодового стимула ИДК и ИЦК нейтрофилов в бронхах больных БА с ХГДП было зарегистрировано повышение ИДК и ИЦК эозинофилов, свидетельствующее об активации лизосом, мобилизации ферментативной, а также цитокиновой активности как нейтрофильного, так и эозинофильного сегментов гранулоцитов, непосредственно связанной с холод-индуцированной деструкцией эпителиальных клеток.

Полученные данные позволяют предположить, что деструкция бронхиального эпителия, стимулированная выраженной реакцией гранулоцитов на холодовой триггер, служит в условиях бронхоспазма одним из факторов формирования продукции провоспалительных цитокинов, синтезируемых гранулоцитами и эпителием бронхов.

Заключение

В формировании холодовой гиперреактивности дыхательных путей важное место занимают процессы деструкции и цитолиза нейтрофилов, сопровождающиеся повышением продукции провоспалительных цитокинов, а также структурными признаками эпителиальной дисфункции при реакции бронхов больных БА на холодовой стимул.

Вклад авторов

Концепция и дизайн исследования - Пирогов А.Б., Перельман Ю.М.; сбор и обработка материала - Приходько А.Г., Наумов Д.Е.; статистическая обработка - Приходько А.Г.; написание текста - Пирогов А.Б., Приходько А.Г.; редактирование - Перельман Ю.М.

Благодарность

Авторы выражают благодарность кандидату медицинских наук Пироговой Наталье Алексеевне за сотрудничество и консультации по цитологическим исследованиям.

Литература

1. Naumov D.E., Perelman J.M., Kolosov V.P., Potapova T.A., Maksimov V.N., Zhou X. Transient receptor potential melastatin 8 gene polymorphism is associated with cold-induced airway hyperresponsiveness in bronchial asthma. Respirology. 2015; 20 (8): 1192-97. DOI: https://doi.org/10.1111/resp.12605

2. Наумов Д.Е., Гассан Д.А., Афанасьева Е.Ю., Котова О.О., Шелудько Е.Г., Ушакова Е.В. Особенности цитокинового профиля индуцированной мокроты у больных бронхиальной астмой при холодовом воздействии. Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2019; 72: 8-15. DOI: https://doi.org/10.12737/article_5d09d1aff1f5f6.43795360

3. Kiwamoto T., Ishii Y., Morishima Y., Yoh K., Maeda A., Ishi-zaki K. et al. Transcription factors T-bet and GATA-3 regulate development of airway remodeling. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2006; 174 (2): 142-51. DOI: https://doi.org/10.1164/rccm.200601-079oc

4. Zhu J., Yamane H., Cote-Sierra J., Guo L., Paul W.E. GATA-3 promotes Th2 responses through three different mechanisms: induction of Th2 cytokine production, selective growth of Th2 cells and inhibition of Th1 cell-specific factors. Cell Res. 2006; 16 (1): 3-10. DOI: https://doi.org/10.1038/sj.cr.7310002

5. Куликов Е.С., Огородова Л.М., Фрейдин М.Б., Деев И.А., Селиванова П.А., Федосенко С.В. и др. Молекулярные механизмы тяжелой бронхиальной астмы. Молекулярная медицина. 2013; 2: 24-32.

6. Wei L., Sandbulte M.R.,Thomas P.G.,Webby R.J., Homayouni R., Pfeffer L.M. NFkappa В negatively regulates interferon-induced gene expression and anti-influenza activity. J. Biol. Chem. 2006; 281 (17): 11 678-84. DOI: https://doi.org/10.1074/jbc.m513286200

7. Конищева А.Ю., Гервазиева В.Б., Лаврентьева Е.Е. Особенности структуры и функции респираторного эпителия при бронхиальной астме. Пульмонология. 2012; 22 (5): 85-91. DOI: https://doi.org/10.18093/0869-0189-2012-0-5-85-91

8. Sheller J. R., Polosukhin V.V., Mitchell D., Cheng D-S., Stokes Peebles R., Blackwell T.S. NF-kB Induction in Airway epithelium increases lung inflammation in allergen challenged mice. Exp. Lung Res. 2009; 35 (10): 883-95. DOI: https://doi.org/10.3109/01902140903019710

9. Васильева Г.И., Иванова И.А., Тюкавкина С.Ю. Кооперативное взаимодействие моно- и полинуклеарных фагоцитов, опосредованное моно- и нейтрофилокинами. Иммунология. 2000; 5: 11-7.

10. Перельман Ю.М., Приходько А.Г. Методика комбинированной диагностики нарушений кондиционирующей функции и холодовой гиперреактивности дыхательных путей. Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2002; 12: 22-8.

11. Матвеева Л.А. Местная защита респираторного тракта у детей. Томск : Изд-во Томского ун-та, 1993. 276 с.

12. Ульянычев Н.В. Системность научных исследований в медицине. Saarbrucken : LAP LAMBERT, 2014. 140 с.

13. Пирогов А.Б., Зиновьев С.В., Перельман Ю.М., Семи-реч Ю.О., Семенова Г.В., Колосов А.В. Активность миелопероксидазы нейтрофильных и эозинофильных лейкоцитов индуцированной мокроты у больных бронхиальной астмой с холодовой бронхиальной гиперреактивностью. Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2014; 53: 50-6.

14. Пирогов А.Б., Приходько А.Г., Перельман Ю.М., Зиновьев С.В. Динамика воспалительно-клеточного профиля бронхов и нейтрофильного компонента воспаления у больных бронхиальной астмой с холодовой гиперреактивностью дыхательных путей при применении базисной противовоспалительной терапии. Бюллетень физиологии и патологии дыхания. 2016; 60: 16-22. DOI: https://doi.org/10.12737/19935

15. Kuwano K. Epithelial cell apoptosis and lung remodeling. Cell. Mol. Immunol. 2007; 4 (6): 419-29.

16. Hastie A.T., Moore W.C., Meyers D.A., Vestal P.L., Li H., Peters S.P. et al. Analyses of asthma severity phenotypes and inflammatory proteins in subjects stratified by sputum granulocytes. J. Allergy Clin. Immunol. 2010; 125 (5): 1028-36. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jaci.2010.02.008

17. Puthothu B., Krueger M., Heinze J., Forster J., Heinzmann A. Impact of IL8 and IL8-receptor alpha polymorphisms on the genetics of bronchial asthma and severe RSV infections. Clin. Mol. Allergy. 2006; 4: 2. DOI: https://doi.org/10.1186/1476-7961-4-2

18. Wood L.G., Baines K.I., Fu J. Scott H.A., Gibson P.G. The neutrophilic inflammatory phenotype is associated with systemic inflammation in asthma. Chest. 2012; 142 (1): 86-93. DOI: https://doi.org/10.1378/chest.11-1838

19. Маянский А.Н. НАДФ-оксидаза нейтрофилов: активация и регуляция. Цитокины и воспаление. 2007; 6 (3): 3-13.

20. Серебренникова С.Н., Семинский И.Ж. Роль цитокинов в воспалительном процессе (сообщение 1). Сибирский медицинский журнал. 2008; 6: 5-8.

21. Соловьева И. А., Собко Е. А., Крапошина А.Ю., Демко И.В., Салмина А.Б. Современные представления о роли CD38 в патогенезе бронхиальной астмы. Пульмонология. 2013; 23 (5): 81-4. DOI: https://doi.org/10.18093/0869-0189-2013-0-5-81-84

22. Tirumurugaan K.G., Kang B.N., Panettieri R.A., Foster D.N., Walseth T.F., Kannan M.S. Regulation of the cd38 promoter in human airway smooth muscle cells by TNF-alpha and dexamethasone. Respir. Res. 2008; 9 (1): 26. DOI: https://doi.org/10.1186/1465-9921-9-26

23. Якушенко Е.В., Лопатникова Ю.А., Сенников С.В. Интерлейкин-18 и его роль в иммунном ответе. Медицинская иммунология. 2005; 7 (4): 355-64.

24. Nakanishi K., Yoshimoto T., Tsutsui H., Okamura H. Interleukin-18 is a unique cytokine that stimulates both Th1 and Th2 responses depending on its cytokine milieu. Cytokine Growth Factor Rev. 2001; 12 (1): 53-72. DOI: https://doi.org/10.1016/s1359-6101(00)00015-0

25. Shore S.A., Moore P.E. Effects of cytokines on contractile and dilator responses of airway smooth muscle. Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 2002; 29 (10): 859-66. DOI: https://doi.org/10.1046/j.1440-1681.2002.03756.x

26. Иванчук И.И., Огородова Л.М., Сазонов Э.А., Лещева И.С., Копьева А.П., Петрова И.В. и др. Влияние рекомбинантного интерлейкина-5 на апоптотическую гибель эозинофилов периферической крови больных бронхиальной астмой. Медицинская иммунология. 2004; 6 (1-2): 117-20.

27. Oh J.W., Seroogy C.M., Meyer E.H., Akbari O., Berry G., Fathman C.G. et al. CD4 T-helper cells engineered to produce IL-10 prevent allergen-induced airway hyperreactivity and inflammation. J. Allergy Clin. Immunol. 2002; 110 (3): 460-68. DOI: https://doi.org/10.1067/mai.2002.127512

Главный редактор
ГЛАВНЫЙ РЕДАКТОР
Хаитов Рахим Мусаевич
Академик РАН, доктор медицинских наук, профессор, заслуженный деятель науки Российской Федерации, научный руководитель ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России, главный аллерголог-иммунолог Минздрава России

Медицина сегодня
Московская урологическая школа.

Московская урологическая школа Урология - область медицинской науки, которая интенсивно развивается. Ежегодно появляются новые научные данные, обнародуются результаты исследований и разработок, меняются алгоритмы диагностики и лечения пациентов с теми или иными болезнями...

"120 лет кафедре оториноларингологии с клиникой ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова".

24-25 ноября 2020 г. состоится Юбилейная научно-практическая конференция с международным участием "120 лет кафедре оториноларингологии с клиникой ПСПбГМУ им. акад. И.П. Павлова". Мероприятие, посвященное 120-летию со дня основания второй в России кафедры, пройдет в...

"Левитановские чтения" - 2020.

Всероссийская научно-практическая конференция "Левитановские чтения" - 2020 27-28 ноября 2020 г. состоится Всероссийская научно-практическая конференция "Левитановские чтения", посвященная различным аспектам организации медицинской помощи пациентам с язвенным колитом и...


Журналы «ГЭОТАР-Медиа»