Динамика восстановления субпопуляций Т-лимфоцитов после действия различных повреждающих агентов

Резюме

Введение. Различные повреждающие агенты отличаются по характеру иммуносупрессивного действия на иммунную систему и вызывают в ней патогенетически различные репаративные изменения. Исследование механизмов восстановления Т-клеточного звена иммунитета при неблагоприятных воздействиях имеет важное значение как для понимания патогенеза этих процессов, так и для поиска адекватных методов их коррекции.

Цель работы - изучить вклад тимуса и периферических лимфоидных органов (на примере селезенки) в восстановление субпопуляций Т-лимфоцитов при равной степени исходного повреждения цитостатиком циклофосфаном и сублетальным облучением.

Материал и методы. Мыши линии C57BL/6 были разделены на 3 группы. 1-й группе (20 мышей) однократно вводили циклофосфан, 2-ю группу (20 мышей) однократно облучали рентгеновскими лучами в сублетальной дозе, 3-ю группу (8 мышей) составили интактные мыши (контроль). Забой мышей проводили на 10, 20, 30 и 60-е сутки. В тимусе и селезенке определяли клеточность и субпопуляционный состав Т-клеток методом проточной цитофлуориметрии.

Результаты. Выявлено, что облучение более глубоко повреждает активно делящиеся тимо-циты, чем циклофосфан. В тимусе формируется своеобразный блок на стадии DN4-тимоцитов. Полного восстановления тимуса не происходит даже через 2 мес после сублетального облучения. В наибольшей степени поражение радиацией затрагивает субпопуляцию цитотоксических Т-лимфоцитов, которая к 60-м суткам не восстанавливается полностью ни в тимусе, ни на периферии. Активно делящиеся тимоциты более подвержены действию повреждающих факторов, чем зрелые спленоциты. Существенный вклад в регенеративные процессы вносит гомеостатическая пролиферация, которая сопровождается конверсией фенотипа наивных Т-клеток и, как следствие, увеличением числа центральных Т-клеток памяти.

Заключение. Т-клеточное звено иммунной системы более чувствительно к ионизирующему облучению, чем к действию цитостатиков. При этом облучение в значительной степени повреждает не только лимфоидные элементы, но и строму тимуса. Оба вида воздействия приводят к снижению численности наивных Т-клеток и накоплению суррогатных Т-клеток памяти, следствием чего должно стать сужение репертуара Т-клеточных рецепторов, развитие иммунодефицита и различных иммунопатологических состояний, связанных с Т-клеточным ответом. Это следует учитывать при назначении оптимальных схем корригирующего лечения после облучения и химиотерапии.

Ключевые слова:Т-лимфоциты; циклофосфан; рентгеновское облучение; восстановление; проточная цитофлуориметрия

Для цитирования: Гринько Е.К., Вериго К.С., Мухина Е.А., Шарова Н.И., Комогорова В.В., Литвина М.М., Марзанова С.Н., Донецкова А.Д., Митин А.Н. Динамика восстановления субпопуляций Т-лимфоцитов после действия различных повреждающих агентов. Иммунология. 2021; 42 (4): 346-355. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2021-42-4-346-355

Финансирование. Работа проведена в рамках госзадания ФГБУ "ГНЦ Институт иммунологии" ФМБА России (ГЗ № 22.005.16.800).

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Введение

При воздействии на организм различных повреждающих агентов (ионизирующая радиация, некоторые химические соединения) развивается лимфопения, затрагивающая Т-клеточное звено иммунитета [1]. Неблагоприятные факторы могут действовать на живые организмы как спонтанно при экологических катастрофах, так и в качестве побочного эффекта при лечении ряда опухолевых и аутоиммунных заболеваний.

Высокая чувствительность лимфоцитов к действию радиации и цитостатиков обусловлена их интенсивной пролиферацией, причиной гибели лимфоцитов является развитие апоптоза [2, 3]. В восстановлении численности Т-клеток задействованы 2 механизма: тимопоэз и гомеостатическая пролиферация. 1-й механизм обеспечивает приток наивных Т-лимфоцитов из тимуса, 2-й - за счет чрезмерной пролиферации ведет к накоплению Т-клеток памяти [4, 5]. Оценка вклада каждого механизма в восстановление Т-клеточного звена иммунной системы при неблагоприятных внешних воздействиях на организм имеет важное значение как для понимания патогенеза данных процессов, так и для поиска адекватных методов их коррекции [6].

Учитывая, что различные повреждающие агенты отличаются по характеру иммуносупрессивного действия на Т-клеточное звено иммунитета и вызывают в нем патогенетически различные репаративные изменения, в настоящей работе мы исследовали вклад тимуса и периферических лимфоидных органов (на примере селезенки) в восстановление субпопуляций Т-лимфоцитов при равной степени исходного повреждения.

Материал и методы

Экспериментальные животные и дизайн исследования. Эксперимент проводили на мышах линии C57BL/6, самках весом 18-20 г, полученных из питомника "Столбовая" ФГБУН НЦБМТ ФМБА России. Мыши были разделены на 3 группы: группа, подвергнутая однократному воздействию цитостатика (20 мышей); группа, подвергнутая сублетальному облучению (20 мышей); контрольная группа интактных животных (8 мышей). В качестве цитостатического препарата использовали Циклофосфан-ЛЭНС (ЦФ, Россия) в дозе 125 мг/кг внутрибрюшинно [7]. Для получения сублетальной дозы облучения (4 Гр) использовали рентгеновский аппарат "АРДОК-1" (Россия). Все процедуры с экспериментальными животными проводили в соответствии с правилами лабораторной практики [Европейская конвенция о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях (ETS N123), приказ Минздравсоцразвития РФ от 23.08.2010 № 708н "Об утверждении правил лабораторной практики" и Положение об этическом отношении к лабораторным животным ФГБУ "ГНЦ Институт иммунологии" ФМБА России].

Лабораторные исследования. Оценку состояния Т-клеточного звена иммунной системы проводили на 10, 20, 30 и 60-е сутки после воздействия повреждающих факторов. Мышей забивали методом цервикальной дислокации, извлекали тимус и селезенку, освобождали их от соединительной ткани и гомогенизировали. Полученную суспензию клеток освобождали от эритроцитов с помощью лизирующего буфера фирмы eBioscience (США) и переводили в раствор PBS c 1,0 % BSA и 0,1 % ЭДТА. Численность и жизнеспособность клеток, предварительно окрашенных эозином, определяли в камере Горяева.

Фенотипическую оценку выделенных тимоцитов и спленоцитов выполняли методом проточной цитометрии. Оценивали соотношение основных субпопуляций тимоцитов по экспрессии маркеров CD4 и CD8-дубль-негативные (DN - double-negative), дубль-позитивные (DP - double-positive), сингл-позитивные CD4+- и CD8+-тимоциты (SP CD4+ и SP CD8+ - singlepositive), а также соотношение субпопуляций DN-тимоцитов по коэкспрессии маркеров CD44 и CD25 -DN1 (CD44highCD25low/-), DN2 (CD44highCD25high), DN3 (CD44lowCD25high), DN4 (CD44lowCD25low). Среди спленоцитов оценивали долю всех Т-клеток (CD3+), Т-хелперов (CD3+CD4+), цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ-CD3+CD8+), а также соотношение основных возрастных субпопуляций Т-клеток, отражающих состояние гомеостаза Т-клеточного звена иммунной системы, по коэкспрессии маркеров CD44 и CD62L - наивных Т-клеток (Tnaïve - CD44lowCD62Lhigh) и центральных Т-клеток памяти (Tcm - CD44highCD62Lhigh). Использовали следующие комбинации моноклональных антител фирмы eBioscience (США) (препараты для изотипических контролей той же фирмы): 1) anti-CD3-FITC, anti-CD4-PerCP-Cy5.5, anti-CD8-APC-eFluor780, anti-CD44-PE-Cy7, anti-CD25-APC; 2) anti-CD3-FITC, anti-CD4-PerCP-Cy5.5, anti-CD8-APC-eFluor780, anti-CD44-PE-Cy7, anti-СD62L-PE. Проточную цитометрию выполняли на проточном цитометре BD FACSCanto™ II (Becton Dickinson, США). Данные анализировали с помощью программного обеспечения FlowJo X (США).

Статистическая обработка. Статистическую обработку выполняли методами непараметрического анализа в программном пакете Statistica 12.5 (Stat Soft Inc., США). Данные представляли в виде Ме (LQ-UQ), где Ме - медиана, LQ - нижний квартиль, UQ - верхний квартиль. Для попарного сравнения опытных групп с контрольной использовали 17-критерий Манна-Уитни. Статистически значимым различие групп считали при р < 0,05.

Результаты

Анализ динамики восстановления Т-клеточного звена иммунной системы после введения ЦФ или сублетального облучения начали с оценки динамики общей численности клеток тимуса и селезенки, представленных на графике нормализованных данных (рис. 1), где за единицу принято число клеток у мышей контрольной группы (0-е сутки), и абсолютных значений (табл. 1).

Рис. 1. Динамика восстановления общей клеточности в тимусе и селезенке после введения циклофосфана (ЦФ)/облучения (здесь и на рис. 2-6 данные нормализованы относительно контроля)

Таблица 1. Численность клеток в тимусе и селезенки мышей линии C57BL/6 после воздействия циклофосфана (ЦФ) и облучения, млн

Примечание. Здесь и в табл. 2-5: * - p <0,05 в сравнении с контролем.

После введения ЦФ численность тимоцитов упала до минимума на 10-е сутки, составив 37 % от уровня контрольной группы, и восстановилась до уровня контроля на 20-е сутки, статистически значимо не меняясь до конца эксперимента. Численность тимоцитов после облучения снижалась более равномерно, к 10-м суткам составив 58 %, а к 20-м суткам - 36 % от уровня контрольной группы. Но и восстановление численности началось позже, достигнув к 30-м суткам 57 %, а к 60-м суткам - только 65 % от уровня контрольной группы, то есть не достигнув показателей интактных животных.

Численность спленоцитов после однократного введения ЦФ статистически значимо снизилась только к 20-м суткам и составила 47 % от уровня контрольной группы, оставаясь достоверно ниже уровня контроля к 30-м суткам (55 %) и полностью восстановившись к концу эксперимента. После сублетального рентгеновского облучения численность спленоцитов снизилась до 39 % от уровня контрольной группы уже на 10-е сутки и оставалась на низком уровне вплоть до 30-х суток, составляя соответственно 40 и 53% на 20-е и 30-е сутки. Однако к концу эксперимента число клеток в селезенке возросло до 116 % от уровня контроля, статистически значимо превысив число клеток у интактных мышей.

При оценке популяционного состава тимоцитов после воздействия ЦФ (рис. 2, табл. 2) было показано, что численность наиболее юной популяции - DN-тимоцитов - после снижения на 10-е сутки до 30 % выросла более чем 3 раза по сравнению с уровнем контрольной группы к 20-м суткам, оставаясь в 1,6 раза выше на 30-е сутки и вернувшись к уровню интактных мышей на 60-е сутки. После облучения численность DN-тимоцитов (рис. 2, табл. 2) снизилась до минимума только к 20-м суткам - 18 % от уровня контрольной группы, к 30-м суткам достигла выраженного пика восстановления, в 2,2 раза превышающего уровень контрольной группы. К концу эксперимента численность DN-тимоцитов снова достоверно снизилась до 76 % от уровня интактных животных.

Таблица 2. Численность субпопуляций тимоцитов мышей линии C57BL/6 после воздействия циклофосфана (ЦФ) и облучения, млн

Рис. 2. Динамика восстановления основных субпопуляций тимоцитов (DN, DP, SP)

Здесь и на рис. 3: А - после введения циклофосфана (ЦФ); Б - после облучения.

Более детальный субпопуляционный анализ DN-тимоцитов (рис. 3, табл. 3) показал, что при введении ЦФ после статистически значимого уменьшения численности всех субпопуляций DN-тимоцитов на 10-е сутки резкий рост численности всей популяции на 20-е сутки в основном был обусловлен ростом численности DN4, которая почти в 11 раз превышала уровень контрольной группы, тогда как для DN1 и DN3 этот рост достигал 230 и 140 %, а для DN2 -только 50 % от уровня контрольной группы. К 60-м суткам все субпопуляции DN-тимоцитов, кроме DN2, достигли уровня интактных мышей, а численность DN2 к концу эксперимента составила только 40 % от уровня контрольной группы.

Таблица 3. Численность DN-тимоцитов мышей линии C57BL/6 после действия циклофосфана (ЦФ)/облучения, млн

Рис. 3. Динамика восстановления субпопуляций DN-тимоцитов

При анализе динамики восстановления DN-тимоцитов после сублетального облучения (см. рис. 3, табл. 3) было установлено, что основной вклад в восстановление численности DN-тимоцитов на 30-е сутки, как и при воздействии ЦФ, вносили DN4, а самой чувствительной оказалась DN2-субпопуляция. Важной особенностью динамики восстановления тимопоэза после сублетального облучения стало статистически значимое превышение DN4-субпопуляцией в 1,5 раза уровня контроля. К 20-м суткам, времени наиболее выраженного снижения численности всей популяции DN-тимоцитов, уровень DN1 упал до 70 %, DN2 - до 10 %, DN3 - до 12 % и DN4 - до 21 % от уровня контрольной группы, все отличия статистически достоверны. На 30-е сутки численность субпопуляций DN3 и DN4 выросла и превысила уровень интактных мышей в 1,6 и 7 раз соответственно, а численность субпопуляций DN1 и DN2 осталась ниже уровня контрольной группы и составила 54 % и 28 % соответственно. Однако в отличие от группы с цитостатиком к 60-м суткам после сублетального облучения большая часть DN-субпопуляций не достигла уровня контрольной группы. Только численность субпопуляции DN4 в 1,5 раза превышала уровень контроля, численность всех остальных субпопуляций была снижена. Численность субпопуляций DN1, DN2 и DN3 составляла 58, 51 и 63 % от уровня интактных животных соответственно.

Динамика изменения численности более зрелой DP-популяции (см. рис. 2, табл. 2), самой многочисленной среди тимоцитов, практически полностью совпадала с динамикой изменения общей численности всех тимоцитов. Так, после введения ЦФ численность DP-тимоцитов на 10-е сутки снизилась до 40 %, а уже к 30-м суткам восстановилась до уровня контрольной группы. После сублетального облучения численность DP-тимоцитов снижалась более равномерно, достигнув 63 и 28 % от уровня контрольной группы на 10-е и 20-е сутки соответственно, после чего происходило частичное восстановление их численности до 55 % к 30-м суткам, которое сохранялось вплоть до 60-х суток, времени окончания эксперимента.

Динамика изменения численности зрелых SP-популяций после воздействия цитостатика в целом повторяла динамику снижения и восстановления DP-популяции, только в случае SP CD4+-популяции нормализованные по отношению к контролю показатели в фазе восстановления были несколько ниже - 20 % на 10-е сутки (отличие достоверное по отношению к показателям контрольной группы) и от 80 до 70 % с 20-х по 60-е сутки, а в случае SP CD8+-популяции, наоборот, значительно выше - также 20 % на 10-е сутки, но уже 250 % на 20-е сутки, 150 % на 30-е сутки и 120 % на 60-е сутки. Отличия от контроля во всех точках, кроме 60-х суток, были достоверными. В то же время после рентгеновского облучения динамика восстановления SP-популяций значительно отличалась от динамики восстановления DP-тимоцитов. Максимальное снижение численности SP-популяций наблюдалось уже на 10-е сутки после облучения, то есть на 10 суток раньше, чем в случае DP- и DN-тимоцитов, и достигало 31 % как для SP CD4+-, так и для SP CD8+-популяций. Восстановление SP-тимоцитов также начиналось на 10 дней раньше: на 20-е сутки численность SP CD4+-популяции составляла 59 %, на 30-е сутки - 47 %, а на 60-е сутки уже превосходила уровень контрольной группы в 1,4 раза. Численность SP CD8+-популяции на 20-е сутки составляла 91 % от уровня контроля, но затем постепенно снижалась до 66 и 49 % на 30-е и 60-е сутки соответственно.

В целом, полученные результаты указывают на более глубокие повреждения тимуса при облучении, чем при воздействии ЦФ, затрагивающие не только быстроделящиеся тимоциты, но и клетки стромы тимуса, а возможно, и гемопоэтические клетки - костномозговые предшественники тимоцитов.

Анализ восстановления периферического отдела Т-клеточного звена иммунной системы был выполнен на спленоцитах мышей, подвергшихся воздействию ЦФ или сублетального облучения. Изначально была проведена оценка динамики численности Т-хелперов и ЦТЛ среди спленоцитов (рис. 4, табл. 4).

Таблица 4. Численность спленоцитов мышей линии C57BL/6 после действия циклофосфана (ЦФ)/облучения, млн

Рис. 4. Динамика восстановления Т-хелперов и цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) в селезенке после действия циклофосфана (ЦФ)/облучения

После введения ЦФ динамика изменения численности Т-хелперов и ЦТЛ в селезенке в целом соответствовала динамике изменения общей численности спленоцитов - с максимальным снижением относительно показателей контрольной группы обеих популяций на 20-е сутки и с постепенным восстановлением к 60-м суткам. При этом снижение численности было более выраженным, а восстановление - менее полным среди ЦТЛ, чем среди Т-хелперов. Так, численность Т-хелперов достигла минимальных значений на 20-е сутки и составила 48 % от уровня контрольной группы, на 30-е сутки она восстановилась до 62 % и достигла уровня контроля на 60-е сутки после введения ЦФ. Численность ЦТЛ постепенно снижалась до 54 % на 10-е сутки, 26 % на 20-е сутки и 25 % на 30-е сутки после введения ЦФ, и только к 60-м суткам восстановилась до 76 % от уровня контрольной группы. Все описанные изменения были статистически достоверными.

Изменение численности Т-хелперов и ЦТЛ после сублетального облучения было более выражено, при этом популяция CD8+-Т-клеток, как и в случае введения ЦФ, страдала в большей степени, чем популяция CD4+-T-клеток. Численность Т-хелперов менялась следующим образом: 62, 30, 42 и 137 % от уровня контрольной группы на 10, 20, 30 и 60-е сутки соответственно. Численность ЦТЛ составила 16, 20, 28 и 65 % от уровня контроля на 10, 20, 30 и 60-е сутки соответственно. Таким образом, восстановление ЦТЛ было неполным, как и в группе с введением ЦФ.

Предполагая участие гомеостатической пролиферации в восстановлении периферических Т-клеток при развитии Т-лимфопении после воздействия повреждающих факторов и, как следствие, конверсию фенотипа наивных Т-клеток, при которой они приобретают фенотип Т-клеток памяти без контакта с антигеном, мы исследовали динамику восстановления численности наивных (Tnaïve) и центральных Т-клеток памяти (Tcm) среди Т-хелперов (рис. 5, табл. 5) и ЦТЛ (рис. 6, табл. 5).

Рис. 5. Динамика восстановления возрастных субпопуляций Т-хелперов в селезенке после действия циклофосфана (ЦФ)/ облучения

Рис. 6. Динамика восстановления возрастных субпопуляций цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) в селезенке после действия циклофосфана (ЦФ)/облучения

Таблица 5. Численность "возрастных" субпопуляций Т хелперов (CD4+) и ЦТЛ (CD8+) мышей линии C57BL/6 после действия циклофосфана (ЦФ)/облучения, млн

После введения ЦФ численность наивных Т-хелперов значительно снизилась, оставаясь ниже уровня контрольной группы вплоть до 60-х суток, когда она достигла 65 % от уровня контрольной группы. В то же время численность Т-хелперов с фенотипом центральных Т-клеток памяти снижалась менее выраженно на всем протяжении восстановительного периода, а на 60-е сутки в 1,9 раза превышала уровень контрольной группы. Соотношение наивных Т-хелперов и Т-хелперов с фенотипом центральных клеток памяти (Tnaïve/Tcm) снизилось с 23,6 (показатель контрольной группы) до 10,4 (рис. 7). Аналогичная динамика изменения численности наивных Т-хелперов и Т-хелперов с фенотипом центральных клеток памяти наблюдалась после сублетального облучения. При этом на 60-е сутки их численность составила 105 и 245 % соответственно, а соотношение Tnaïve/Tcm снизилось с 23,6 до 9,9.

Рис. 7. Изменение соотношения наивных и центральных Т-клеток памяти среди Т-хелперов и цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) в селезенке на 60-е сутки после действия циклофосфана (ЦФ)/облучения

При оценке численности возрастных популяций ЦТЛ (см. рис. 6, табл. 5) наблюдалась та же тенденция к более выраженному снижению численности наивных Т-клеток по сравнению с центральными Т-клетками памяти на всем протяжении периода восстановления как после введения ЦФ, так и после рентгеновского облучения. На 60-е сутки после введения ЦФ численность наивных ЦТЛ составила 76 %, ЦТЛ с фенотипом центральных клеток памяти - 125 % от уровня контрольной группы, а соотношение Tnaïve/Tcm снизилось с 3,9 до 2,4 по отношению к контрольной группе (см. рис. 7). После сублетального облучения на 60-е сутки численность наивных ЦТЛ составила 50 %, ЦТЛ с фенотипом центральных клеток памяти - 141 % от уровня контрольной группы, а соотношение Tnaïve/Tcm снизилось с 3,9 до 1,7 по отношению к контрольной группе.

Таким образом, развившаяся Т-лимфопения независимо от повреждающего фактора приводила к конверсии фенотипа наивных Т-клеток как среди Т-хелперов, так и среди ЦТЛ.

Обсуждение

Воздействие цитостатика и ионизирующего излучения на организм животных приводит к развитию лимфопении, затрагивающей как периферические, так и центральные органы иммунной системы, в частности селезенку и тимус.

В проведенном исследовании было установлено, что в тимусе численность клеток достигает минимума на 10-е сутки после воздействия ЦФ и на 20-е сутки после сублетального рентгеновского облучения. В то же время после введения ЦФ уже на 20-е сутки численность тимоцитов восстанавливается до уровня контрольной группы, а после сублетального облучения даже на 60-е сутки, в последний день наблюдения, не достигает уровня контроля. Можно предположить, что более позднее снижение численности тимоцитов при сублетальном облучении обусловлено пиком экстренной регенерации тимуса, который следует за более выраженным снижением численности тимоцитов на 5-е сутки после сублетального облучения [8], а менее эффективное восстановление тимопоэза после сублетального облучения, возможно, свидетельствует о более глубоком повреждении органа, в частности тимусного эпителия, который отвечает за дифференцировку тимоцитов, и, соответственно, о большей устойчивости тимусных эпителиальных клеток к повреждающему действию ЦФ в терапевтических дозах.

В пользу данных предположений говорит и анализ динамики восстановления отдельных субпопуляций тимоцитов. Так, на 10-е сутки после сублетального облучения в отсутствие роста численности DN1-субпопуляции, отражающей поступление предшественников тимоцитов из костного мозга, наблюдается рост численности DN4-субпопуляции, сопровождающийся последующим ростом численности CD4+-SP- и CD8+-SP-субпопуляций на 20-е сутки, что, скорее всего, свидетельствует об экстренном восстановлении тимуса на 10-е сутки за счет дифференцировки радиоустойчивой субпопуляции DN-тимоцитов, например за счет DN2-субпопуляции, которая по результатам ранее проведенных работ была определена как наиболее резистентная к действию радиационного облучения по сравнению с остальными популяциями тимоцитов [9].

Рост численности наиболее юной субпопуляции, DN-тимоцитов, достигает пика на 20-е сутки после введения ЦФ и на 30-е сутки после облучения, который в случае воздействия цитостатика сопровождается одновременным ростом численности всех остальных, более зрелых, субпопуляций до и выше уровня интактных мышей, а в случае рентгеновского облучения - менее выраженным ростом, статистически значимо не достигающим уровня контроля даже к последнему дню эксперимента через 60 дней после облучения, что, по всей вероятности, и свидетельствует о нарушении процесса дифференцировки тимоцитов при радиационном поражении. Более глубокое поражение тимуса при облучении согласуется с результатами ранее выполненных работ [4, 10, 11].

Однако, несмотря на столь значимые различия в восстановлении тимопоэза, восстановление численности спленоцитов, включая Т-лимфоциты, на 60-е сутки было одинаково эффективным как после воздействия ЦФ, так и после сублетального рентгеновского облучения - для Т-хелперов оно было полным, а для ЦТЛ частичным, что говорит о сходном уровне поражения стромы периферических лимфоидных органов и о задействовании одинаковых механизмов периферического восстановления при развитии Т-лимфопении, в частности, о гомеостатической пролиферации Т-клеток [12, 13], которая приводит к накоплению суррогатных Т-клеток памяти, о чем свидетельствует как увеличение абсолютной численности лимфоцитов с фенотипом центральных Т-клеток памяти, так и снижение соотношения численности наивных Т-клеток и центральных Т-клеток памяти (Tnaïve/Tcm).

Заключение

Можно констатировать, что Т-клеточное звено иммунной системы более чувствительно к ионизирующему облучению, чем к действию цитостатиков. При этом облучение в значительной степени повреждает не только лимфоидные элементы, но и строму тимуса. Оба вида воздействия приводят к снижению численности наивных Т-клеток и накоплению суррогатных Т-клеток памяти, следствием чего должно стать сужение репертуара Т-клеточных рецепторов, развитие иммунодефицита и различных иммунопатологических состояний, связанных с Т-клеточным ответом, что следует учитывать при выборе терапии, требующей назначения цитостатиков или ионизирующего облучения, а также последующего корригирующего лечения.

Вклад авторов. Концепция и дизайн исследования -Митин А.Н., Марзанова С.Н., Донецкова А.Д.; сбор и обработка материала - Гринько Е.К., Вериго К. С., Мухина Е.А., Шарова Н.И.; анализ цитометрических данных - Комогорова В.В., Литвина М.М.; статистическая обработка - Гринько Е.К., Вериго К.С.; написание и редактирование текста - Донецкова А. Д., Митин А.Н.

Литература

1. Williams K.M., Hakim F.T., Gress R.E. T cell immune reconstitution following lymphodepletion. Semin. Immunol. 2007; 19 (5): 318-30. DOI: https://doi.org/10.1016/j.smim.2007.10.004

2. Суслов А.П., Караулов А.В., Геринг С., Брондз Б.Д. Чувствительность предшественников субпопуляций Т-лимфоцитов к циклофосфамиду и гидрокортизону. Иммунология. 1980; 2: 53-6.

3. Ярилин А.А. Иммунология : учебник. Москва : ГЭОТАР-Медиа, 2010: 752 с.

4. Донецкова А.Д., Шарова Н.И., Никонова М.Ф., Митин А.Н., Литвина М.М., Комогорова В.В., Ярилин А.А. Вклад тимуса в восстановление популяции Т-клеток после действия различных повреждающих агентов. Иммунология. 2013; 6: 309-13.

5. Митин А.Н., Литвина М.М., Комогорова В.В., Шарова Н.И., Ярилин А.А. Вклад гомеостатической пролиферации и связанных с ней процессов в восстановление популяции периферических Т-клеток в условиях лимфопении, индуцированной облучением. Иммунология. 2013; 5: 242-7.

6. Hickman S.P., Turka L.A. Homeostatic T cell proliferation as a barrier to T cell tolerance. Philos. Trans. R. Soc. Lond. B. Biol. Sci. 2005; 360 (1461): 1713-21. DOI: https://doi.org/10.1098/rstb.2005.1699

7. Arai Y., Choi U., Corsino C.I., Koontz S.M., Tajima M., Sweeney C.L., Black M.A., Feldman S.A., Dinauer M.C., Malech H.L. Myeloid conditioning with c-kit-targeted CAR-T cells enables donor stem cell engraftment. Mol. Ther. 2018; 26 (5): 1181-97. DOI: https://doi.org/10.1016/j.ymthe.2018.03.003

8. Митин А.Н., Комогорова В.В., Литвина М.М., Шевелев С.В., Шарова Н.И., Ярилин А.А. Динамика субпопуляций при регенерации тимуса после облучения. Иммунология. 2012; 33 (6): 297-302.

9. Calvo-Asensio I., Sugrue T., Bosco N., Rolink A., Ceredig R. DN2 thymocytes activate a specific robust DNA damage response to ionizing radiation-induced DNA double-strand breaks. Front. Immunol. 2018; 9: 1312. DOI: https://doi.org/10.3389/fimmu.2018.01312

10. Hiesche K.D., Révész L. The role of bone marrow in different phases of the cellular repopulation of irradiated mouse thymus. Beitr. Pathol. 1975; 155 (2): 181-92. DOI: https://doi.org/10.1016/s0005-8165(75)80191-0

11. Лебединская Е.А., Лебединская О.В., Годовалов А.П.,Прокудин В.С. Иммуноморфологические особенности тимуса крыс на фоне введения цитостатика в эксперименте. Саратовский научно-медицинский журнал. 2016; 1: 12-4.

12. Wu T., Plett P.A., Chua H.L., Jacobsen M., Sandusky G.E., MacVittie T.J., Orschell C.M. Immune reconstitution and thymic involution in the acute and delayed hematopoietic radiation syndromes. Health Phys. 2020; 119 (5): 647-58. DOI: https://doi.org/10.1097/HP.0000000000001352

13. Włodarczyk M., Ograczyk E., Kowalewicz-Kulbat M., Druszczyńska M., Rudnicka W., Fol M. effect of cyclophosphamide treatment on central and effector memory T cells in mice. Int. J. Toxicol. 2018; 37 (5): 373-82. DOI: https://doi.org/10.1177/1091581818780128

Главный редактор
ГЛАВНЫЙ РЕДАКТОР
Хаитов Рахим Мусаевич
Академик РАН, доктор медицинских наук, профессор, заслуженный деятель науки Российской Федерации, научный руководитель ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России, главный аллерголог-иммунолог Минздрава России
РОСМЕДОБР 2021
Вскрытие
Медицина сегодня
III Конгресс "Психическое здоровье человека XXI века"

ДЕТИ. ОБЩЕСТВО. БУДУЩЕЕ. III Конгресс "Психическое здоровье человека XXI века" Более 10 тысяч медицинских и немедицинских специалистов в сфере охраны психического здоровья, а также представителей социально-ориентированных НКО, деловых кругов, СМИ из 37 стран стали...

II Национальный междисциплинарный конгресс "Времена года. Женское здоровье от юного до серебряного и золотого возраста".

Пресс-релиз 21 и 22 октября 2021 года состоится II Национальный междисциплинарный конгресс "Времена года. Женское здоровье от юного до серебряного и золотого возраста" . Конгресс будет посвящен 20-летию Российской Ассоциации Маммологов и 15-летию первой кафедры клинической...

VIII Байкальские офтальмологические чтения "Визуализация в офтальмологии. Настоящее и будущее"

VIII Байкальские офтальмологические чтения "Визуализация в офтальмологии. Настоящее и будущее" 4-5 декабря 2021 года состоится Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием VIII Байкальские офтальмологические чтения "Визуализация в офтальмологии....


Журналы «ГЭОТАР-Медиа»