Возрастные изменения содержания αβ-, γδ-Т-лимфоцитов и их некоторых минорных субпопуляций у здоровых детей

• Богомягкова Елена Назаровна
• Солпов Алексей Владимирович
• Терешков Павел Петрович
• Трушина Нина Геннадьевна
• Витковский Юрий Антонович

Резюме

Введение. Определение качественного и количественного состава клеток иммунной системы у здоровых детей важно для формирования пределов нормативных показателей содержания клеток, что необходимо как для исследовательских целей, так и для клинического применения. Данные о количественном содержании αβ-, γδ-T-лимфоцитов и, особенно, их минорных субпопуляций у детей разных возрастных групп ограничены и крайне противоречивы, поэтому существует необходимость в проведении подобных исследований.

Цель исследования - изучение относительного и абсолютного содержания лимфоцитов, Т-лимфоцитов, αβ- и γδ-Т-лимфоцитов, их минорных субпопуляций - двойных негативных и двойных позитивных Т-лимфоцитов (DNT- и DPT-клеток) в периферической крови здоровых детей разного возраста, а также оценка корреляционной связи между исследуемыми параметрами и возрастом детей.

Материал и методы. Объектом исследования служили образцы венозной крови 83 здоровых детей (мальчиков и девочек) в возрасте от 7 мес до 14 лет. Для выявления содержания лимфоцитов и их субпопуляций применяли моноклональные антитела, конъюгированные с различными флуорохромами. Определение исследуемых параметров проводили с использованием проточной цитофлуориметрии.

Результаты. Исследовано относительное содержание и абсолютное количество лимфоцитов, Т-лимфоцитов, αβ- и γδ-Т-лимфоцитов и их минорных субпопуляций (DNT-и DPT-клеток) у здоровых детей различных возрастных групп. Установлено снижение абсолютного числа γδ-T-киллеров в крови у детей старшего возраста. Содержание γδ-T-лимфоцитов, DNT- и DPT-клеток оставалось одинаковым во всех возрастных группах.

Заключение. Содержание лимфоцитов зависит от возраста. Абсолютное число лимфоцитов, Т-лимфоцитов, αβ-T-клеток и yS-T-киллеров прогрессивно снижается с возрастом, а количество γδ-T-лимфоцитов, γδ-T-хелперов и их минорных субпопуляций (DPT-и DNT-клеток) остается неизменным.

Ключевые слова:Т-клетки; αβ-Т-лимфоциты; γδ-Т-лимфоциты; здоровые дети; минорные субпопуляции; проточная цитофлуориметрия

Введение

В процессе формирования иммунной системы практически каждый детский возрастной период является критическим. На определенных этапах онтогенеза формируются различные звенья иммунитета и в дальнейшем происходит их окончательное созревание. В последние годы установлено, что клетки основных популяций лимфоцитов делятся на множество минорных (малых) субпопуляций, функции которых изучены недостаточно. В периферической крови и в зоне воспаления к одним из представителей малых субпопуляций относят Т-лимфоциты, негативные по маркерам CD4 и CD8 (двойные негативные, DNT) либо экспрессирующие на поверхности и тот и другой антиген (двойные позитивные, DPT). Данные о количественном содержании αβ-, γδ-T-лимфоцитов и, особенно, их минорных субпопуляций у здоровых детей разных возрастных групп ограничены и крайне противоречивы [1-3].

По наличию на поверхности Т-клеточного рецептора (TCR) все Т-лимфоциты делятся на две большие группы: αβ- и γδ-T-клетки. Посредством этого рецептора обеспечиваются внеклеточные стимулирующие сигналы, приводящие к активации Т-лимфоцитов [4-6]. Развитие и функция αβ-T-клеток зависят от распознавания αβ-TCR антигенных пептидов, представленных белками главного комплекса гистосовместимости (MHC). После распознавания комплекса пептид-MHC (pMHC) αβ-T-клетки дифференцируются в эффекторные клетки [7]. Отличительной особенностью γδ-Т-клеток является способность распознавать широкий спектр антигенов без участия молекул MHC. γδ-TCR распознает структурно разнообразные и биологически неродственные соединения, такие как липопептиды, белки микроорганизмов и собственные белки организма хозяина. Собственные протеины включают стресс-ассоциированные белки, неклассические MHC [8, 9] и классические комплексы pMHC [10]. При некоторых инфекциях γδ-T-клетки способствуют быстрому иммунному ответу против широкого спектра патогенов за счет присущей им способности продуцировать интерферон-γ (ИФН-γ) и интерлейкин-17 (ИЛ-17) [11, 12].

В тимусе развиваются незрелые Т-клетки с иммунофенотипом CD3⁺CD4⁻CD8⁻. Это CD3⁺-T-лимфоциты, которые не экспрессируют ни поверхностные молекулы CD4, ни CD8, иначе их называют DNT (двойные негативные Т-лимфоциты). Известно, что молекула CD4 является корецептором для TCR, помогающим ему взаимодействовать с MHC-II. Но, несмотря на то что в DNT-клетках отсутствует молекула CD4, DNT-клетки могут распознавать MHC-II и поддерживать антигенную специфичность [13]. DNT-клетки составляют 1-5 % всех Т-клеток. Установлено, что они обладают иммунорегуляторными функциями и являются мощными клетками-супрессорами [14, 15]. В отличие от αβ-DNT-клеток, γδ-DNT-клетки могут распознавать антигены без участия молекул МНС [16]. Считается, что DNТ-клетки могут играть роль в аутоиммунных реакциях [17-19].

Двойные позитивные клетки (CD3⁺CD4⁺CD8⁺) (DPT-клетки) пока также остаются плохо описанными, часто результаты посвященных им исследований противоречивы. Исследователи отмечают, что DPT-клетки могут играть роль мощных иммуносупрессоров или Т-лимфоцитов с высоким цитотоксическим потенциалом [20, 21]. Другие авторы указывают, что у DPT-клеток существуют разные фенотипы, которые являются результатом различного происхождения, и этим обосновано функциональное различие данных клеток [22].

Цель нашего исследования - изучение относительного и абсолютного содержания лимфоцитов, Т-лимфоцитов, αβ- и γδ-Т-лимфоцитов, их минорных субпопуляций (DNT- и DPT-клеток) в периферической крови здоровых детей разного возраста, а также оценка корреляционной связи между исследуемыми параметрами и возрастом детей.

Материал и методы

Участники исследования. Исследование проводилось согласно протоколу Конвенции Совета Европы о правах человека и биомедицине 1999 г. и Хельсинкской декларации ВМА 2000 г. Объектом исследования служили образцы венозной крови практически здоровых детей, полученная путем пункции периферической вены и собранная в вакуумные пробирки с цитратом Na (3,8 %). Все исследования проводились в рамках диспансерной программы для своевременного выявления скрытых вариантов обменной патологии. Признаки воспалительной реакции в исследуемых группах детей по состоянию периферической крови (показатели общего анализа крови, содержание белков острой фазы воспаления) отсутствовали. Обследовано в общей сложности 83 практически здоровых ребенка (47 мальчиков и 36 девочек) в возрасте от 7 мес до 14 лет. Все дети были подразделены на 6 исследуемых групп: 1-я группа - дети до 1 года, 2-я группа - от 1 года до 2 лет, 3-я группа - от 2 до 5 лет, 4-я группа - от 6 до 8 лет, 5-я группа - от 8 до 12, 6-я группа - дети старше 12 лет. Подготовку образцов периферической крови и настройку проточного цитофлуориметра проводили в соответствии с рекомендациями, изложенными С.В. Хайдуковым и соавт. [23].

Критерии включения в исследование:

- информированное добровольное согласие родителей детей на участие в исследовании;

- здоровые дети в возрасте от 7 мес до 14 лет, после осмотра врачом-педиатром, без клинических признаков и отсутствием в анамнезе аллергии, инфекционных, воспалительных и хронических заболеваний, не принимающие лекарственных средств во время исследования и в течение 2 нед до проведения исследования.

Критерии исключения из исследования:

- дети в возрастной категории старше 14 лет;

- дети с инфекционными, воспалительными и аллергическими заболеваниями в анамнезе; дети, принимающие лекарственные средства.

Цитометрический анализ. Для выявления основных популяций и субпопуляций лимфоцитов применялись моноклональные антитела (МкАт), конъюгированные с различными флуорохромами для выявления Т-лимфоцитов (CD3⁺), αβ-Т-лимфоцитов (CD3⁺TCRαβ), γδ-Т-лимфоцитов (CD3⁺TCRγδ⁺), αβ-Т-лимфоцитов хелперов (CD3⁺CD4⁺CD8^-TCRαβ⁺ ) и киллеров (CD3⁺CD4^-CD8⁺TCRαβ⁺), γδ-Т-лимфоцитов хелперов (CD3⁺CD4⁺CD8^-TCRγδ⁺) и киллеров (CD3⁺CD4^-CD8⁺TCRγδ⁺), DNT (CD3⁺CD4^-CD8^-) и DPT (CD3⁺CD4⁺CD8⁺). Использовались МкАт производства Beckman Coulter (США). Эритроциты из образцов удаляли при помощи коммерческого лизирующего раствора BD FACS™ Lysing Solution (кат. № 349202, Becton Dickinson, США).

По завершении инкубации образцы однократно отмывали от несвязавшихся антител избытком забуференного фосфатами физиологического раствора (7 мин при 300g), а полученный клеточный осадок ресуспендировали в 300 мкл забуференного фосфатами физиологического раствора, содержавшего 1 % нейтрального параформальдегида (кат. № HT5011, Sigma-Aldrich, США). Абсолютные значения были получены в одноплатформенной системе с помощью реагента Flow Count™ (Beckman Coulter, США).

Анализ образцов проводили на проточном цитофлуориметре Cyto FLEX LX (Beckman Coulter, США), оснащенном четырьмя диодными лазерами 355, 405, 488 и 561 нм. Обработку цитофлуориметрических данных проводили при помощи программ Cyt Expertsoftware v.2.0 и Kaluza™ v.2.1.1 (Beckman Coulter, США). В каждом образце анализировалось ≥ 50 000 лимфоцитов периферической крови.

Статистическая обработка. При проведении статистического анализа руководствовались принципами Международного комитета редакторов медицинских журналов (ICMJE) и рекомендациями "Статистический анализ и методы в публикуемой литературе" (SAMPL). Оценка нормальности распределения признаков проводилась с помощью критерия Шапиро-Уилка. Учитывая негауссово распределение, количественные признаки представлены в виде медианы и 95% доверительного интервала: Me (95 % ДИ).

Для сравнения 3 исследуемых групп по одному количественному признаку применялся критерий Краскела-Уоллиса (H). При наличии статистически значимых различий проводилось попарное сравнение с помощью U-критерия Манна-Уитни с поправкой Бонферрони. Во всех случаях р < 0,05 считали статистически значимым. Для определения фактической степени параллелизма между исследуемыми параметрами и возрастом ребенка использовали коэффициент корреляции Спирмена. Силу связи между исследуемыми параметрами определяли по шкале Чеддока. Статистическая обработка результатов исследования осуществлялась с помощью пакета программ IBM SPSS Statistics Version 25.0 (International Business Machines Corporation, license No.Z125-3301-14, США).

Результаты

Как и следовало ожидать, у детей начиная с 2-летнего возраста отмечалось постепенное снижение содержания лимфоцитов в 1,5 раза, и к пубертатному периоду их содержание достигло 42 % от общего числа лейкоцитов по сравнению с группой детей в возрасте до 1 года (U = 15,0; p < 0,001) (рис. 1). Различие относительного числа лимфоцитов между группами значимо проявлялось с 6-летнего возраста (p < 0,01). У детей в возрасте от 1 года до 5 лет эти показатели не различались между собой (p > 0,05). Средние значения содержания Т-лимфоцитов, αβ- и γδ-T-лимфоцитов, а также их некоторых субпопуляций в периферической крови детей разного возраста представлены на рис. 1 и в табл. 1. Из представленных данных видно, что процентное содержание Т-лимфоцитов, αβ- и γδ-T-лимфоцитов и их субпопуляций (αβ-Т-хелперов, αβ-Т-киллеров, γδ-Т-хелперов, γδ-Т-киллеров, минорных DNT- и DPT-клеток) с возрастом не менялось во всех исследуемых группах (p > 0,05).

Между возрастом детей и относительным числом лимфоцитов установлена заметная обратная корреляционная связь (r = -0,64; p < 0,001). При этом наблюдалась слабая положительная связь между возрастом и относительным числом γδ-Т-лимфоцитов (r = 0,22; p < 0,05) и слабая обратная - с относительным числом αβ-Т-хелперов (r = -0,22; p < 0,05). Не обнаружены корреляционные связи для других субпопуляций Т-лимфоцитов, включая минорные DNT- и DPT-субпопуляции (p > 0,05), что подтверждает наши предположения об отсутствии влияния возраста на процентное содержание субпопуляций Т-лимфоцитов у детей.

Таким образом, изучение относительного содержания Т-лимфоцитов, их популяций и субпопуляций полностью не раскрывает особенности возрастной динамики клеточного состава иммунокомпетентных клеток у детей.

Рис. 1. Относительное содержание Т-лимфоцитов, αβ- и γδ-T-лимфоцитов у детей различного возраста

Здесь и на рис. 2: * - значимые различия по критерию Н Крускала-Уоллеса; ** - различия между отдельными группами достоверны (p < 0,01).

Таблица 1. Относительное содержание субпопуляций αβ- и γδ-T-лимфоцитов у детей различного возраста

Иная картина открылась при анализе абсолютного содержания изучаемых популяций и субпопуляций Т-лимфоцитов. Так, обнаружено, что абсолютное число лимфоцитов, Т-лимфоцитов, αβ-T-клеток и γδ-T-киллеров снижалось по мере увеличения возраста детей. Эти изменения представлены на рис. 2. Установлено, что у детей абсолютное содержание Т-лимфоцитов в течение первых 8 лет остается примерно на одном уровне, но начиная с 6-летнего возраста оно начинает снижаться вплоть до самой старшей возрастной группы (p < 0,01). С возрастом абсолютное содержание клеток уменьшается, и в 12 лет оно составляет примерно половину от общего количества лимфоцитов по сравнению с детьми младенческого возраста (p < 0,05). Уменьшение количества клеток наблюдалось практически во всех сравниваемых группах (p < 0,001). Так, медианы абсолютного содержания лимфоцитов уменьшались в 2,06 раза (U = 8,0; p < 0,001), а Т-лимфоцитов - в 2,03 раза (U = 6,0; p < 0,001) (рис. 2). Общее абсолютное содержание αβ-T-клеток уменьшалось по мере взросления ребенка в 2,05 раза (U = 4,0, p < 0,001) (см. рис. 2).

Рис. 2. Абсолютное содержание Т-лимфоцитов, αβ- и γδ-T-лимфоцитов у детей различного возраста

Результаты исследования также представлены в табл. 2. В отличие от относительных величин, выявлено снижение абсолютного содержания αβ-Т-хелперов, αβ-Т-киллеров и γδ-Т-киллеров во всех возрастных группах. Так, у детей 6-й группы по сравнению с 1-й абсолютное содержание αβ-Т-хелперов падало в 1,8 раза, а абсолютное содержание αβ-Т-лимфоцитов киллеров - в 1,4 раза (U = 4,0, p < 0,001; U = 18,0, p = 0,001, соответственно) (табл. 2). К 12-летнему возрасту абсолютное содержание γδ-Т-киллеров также снижалось в 1,8 раза по сравнению с младенческим возрастом (U = 34,54; p = 0,01).

Абсолютное содержание γδ-T-лимфоцитов, γδ-T-хелперов, DPT- и DNT-клеток представлено на рис. 2 и в табл. 2. Обращает на себя внимание низкое абсолютное содержание DPT-клеток у детей всех исследуемых групп. В то же время абсолютное содержание DNT-клеток оставалось неизменным во всех возрастных группах (см. рис. 2, табл. 2). В этих случаях отсутствие динамики абсолютного содержания лимфоцитов указанных субпопуляций совпадает с таковой относительного содержания клеток.

Таким образом, абсолютное содержание лимфоцитов, Т-лимфоцитов, αβ-T-клеток и γδ-T-киллеров снижалось по мере увеличения возраста детей, а абсолютное содержание γδ-T-лимфоцитов, γδ-T-хелперов, DPT- и DNT-клеток оставалось неизменным во всех возрастных группах.

Таблица 2. Абсолютное содержание субпопуляций αβ- и γδ-T-лимфоцитов у детей различного возраста

Установлено, что возраст оказывает влияние на абсолютное число αβ- и γδ-T-лимфоцитов и их некоторых минорных субпопуляций (табл. 3). Обнаружена заметная обратная связь между абсолютным числом лимфоцитов, Т-лимфоцитов, αβ-T-клеток и αβ-T-хелперов и возрастом детей, а также установлена умеренная обратная связь между абсолютным числом αβ- и γδ-T-киллеров и детским возрастом. В остальных случаях наблюдались слабые корреляционные связи между этими показателями.

Таблица 3. Фактическая степень параллелизма между абсолютным содержанием субпопуляций Т-лимфоцитов и возрастом ребенка

Обсуждение

Определение качественного и количественного состава клеток иммунной системы у здоровых детей имеет важное значение для понимания физиологических особенностей развивающегося организма ребенка, а также для формирования шкалы нормальных показателей содержания клеток, что необходимо как для исследовательских целей, так и для клинического применения с целью диагностики и контроля лечения различных заболеваний.

Установлено, что содержание циркулирующих лимфоцитов у детей претерпевает изменения на протяжении всего онтогенеза иммунной системы ребенка [24]. Так, в нашем исследовании показано, что абсолютное содержание αβ-Т-клеток, составляющих основной пул всех лимфоцитов, с возрастом снижается. Такая же динамика наблюдается и для абсолютного содержания γδ-T-киллеров на фоне постоянного уровня γδ-T-лимфоцитов.

Известно, что у детей раннего возраста врожденный иммунитет преобладает над специфическими адаптивными реакциями иммунной системы [25, 26]. γδ-Т-клетки являются представителями как врожденного, так и адаптивного иммунитета. γδ-T-лимфоциты напрямую распознают и уничтожают клетки-мишени за счет своей цитотоксической активности или формируют иммунный ответ на антиген в кооперации с другими иммунными клетками. В отличие от αβ-Т-клеток, которые в основном покидают тимус в качестве наивных клеток, γδ-Т-клетки уже изначально обладают эффекторной функцией [27]. После рождения и до 6-10 лет у детей γδ-Т-клетки начинают быстро заселять периферические ткани и барьерные органы и в зависимости от места локализации составляют 10-100 % от общего числа лимфоцитов. Миграция этих клеток прежде всего необходима для выполнения их цитотоксических функций [28]. По причине усиления воздействия патогенов на иммунитет ребенка сразу после рождения и из-за задержки созревания αβ-Т-лимфоцитов наблюдается преобладание защитной роли неонатальных γδ-Т-клеток [29, 30]. По-видимому, вышеперечисленные свойства γδ-Т-клеток обусловливают то, что их количество остается неизменным в крови у детей исследованных нами групп.

Среди минорных субпопуляции γδ-Т-лимфоцитов выделяют особую группу - DNT-клетки. Эти лимфоциты составляют ~70 % от общего числа γδ-Т-клеток [31]. DNT-клетки экспрессируют промежуточные уровни CD3/TCR и подразделяются на αβ-DNT- и γδ-DNT-клетки. Из них γδ-DNT-клетки преобладают в периферической крови. DNT-лимфоциты способны выступать в роли иммунорегуляторных клеток, подавляя антиген-специфичный Т-клеточный иммунный ответ [32]. Обнаружено, что относительное и абсолютное содержание этих клеток также оставались неизменными в исследуемых группах. Полученные результаты изучения абсолютного содержания DNT-клеток согласуются с данными исследования Y. Ding и соавт. [33]. В то же время другими авторами показано, что относительное содержание γδ-T-лимфоцитов и DNT-клеток увеличивается с возрастом у детей до 5-10 лет [34]. Несмотря на накопленные за последнее время сведения, роль DNТ-клеток в развитии физиологических и патологических реакций организма еще до конца не изучена.

К минорным субпопуляциям γδ-Т-лимфоцитов относят также DPT-клетки. Обнаружено, что в крови здоровых детей исследованных групп содержание этих клеток регистрировалось на постоянном низком количественном уровне. Ранее показано, что DPT-клетки являются антиген-специфическими клетками памяти с функциями как CD4⁺-, так и CD8⁺-Т-клеток: они продуцируют Th1-цитокины и обладают цитотоксичностью на уровне CD8⁺-Т-киллеров [35, 36]. По утверждению ряда авторов, увеличение численности этой минорной субпопуляции Т-клеток возникает при патологических состояниях, таких как хронические вирусные инфекции (ВЭБ, ВИЧ), а также при некоторых аутоиммунных, аллергических и онкологических заболеваниях [37].

Выявлено, что на фоне неизменного уровня γδ-T-лимфоцитов, γδ-T-хелперов и их некоторых минорных субпопуляций в крови у здоровых детей с возрастом снижалось содержание γδ-T-киллеров. γδ-T-киллеры являются яркими представителями клеток врожденного иммунитета. Они способны экстренно мигрировать в ткани из кровотока, компенсируя недостаточность периферического адаптивного иммунного ответа у детей, особенно в раннем возрасте. Их высокое содержание на ранних этапах постнатального онтогенеза необходимо для поддержания адекватной защиты против огромного количества антигенов, с которыми контактирует ребенок. Вероятно, за счет инволютивных процессов в тимусе, высокой способности к миграции в ткани из циркуляции и подавляющего влияния половых гормонов число лимфоцитов у детей к 12 годам снижается [38].

Заключение

Таким образом, содержание лимфоцитов зависит от возраста. Абсолютное содержание лимфоцитов, Т-лимфоцитов, αβ-T-клеток и γδ-T-киллеров прогрессивно снижается с возрастом, а количество γδ-T-лимфоцитов, γδ-T-хелперов и их минорных субпопуляций (DPT- и DNT-клеток) остается неизменным.

Вклад авторов. Концепция и дизайн исследования - Е.Н. Богомягкова, А.В. Солпов; сбор и обработка материала - Е.Н. Богомягкова, Н.Г. Трушина, П.П. Терешков; написание текста - Е.Н. Богомягкова; редактирование - А.В. Солпов, Ю.А Витковский.

Выражаем благодарность В.А. Мудрову за статистическую обработку данных.

Литература

1. Tosato F., Bucciol G., Pantano G., Putti M.C., Sanzari M.C., Basso G., Plebani M. Lymphocytes subsets reference values in childhood. Cytometry A. 2015; 87 (1): 81-5. DOI: https://www.doi.org/10.1002/cyto.a.22520

2. Valiathan R., Ashman M., Asthana D. Effects of Ageing on the Immune System: Infants to Elderly. Scand J Immunol. 2016; 83 (4): 255-66. DOI: https://www.doi.org/10.1111/sji.12413

3. Mandala W.L., Ananworanich J., Apornpong T., Kerr S.J., MacLennan J.M., Hanson C., Jaimulwong T., Gondwe E.N., Rosenblatt H.M., Bunupuradah T., Molyneux M.E., Spector S.A., Pancharoen C., Gelman R.S., Mac Lennan C.A., Shearer W.T. Control lymphocyte subsets: can one country's values serve for another's? J Allergy ClinImmunol. 2014; 134 (3): 759-61.e8. DOI: https://www.doi.org/10.1016/j.jaci.2014.06.030

4. Kumar B.V., Connors T., Farber D.L. Human T cell development, localization, and function throughout life. Immunity. 2018; 48 (2): 202-213. DOI: https://www.doi.org/10.1016/j.immuni.2018.01.007

5. Hwang J.R., Byeon Y., Kim D., Park S.G. Recent insights of T cell receptor-mediated signaling pathways for T cell activation and development. ExpMol Med. 2020; 52 (5): 750-61. DOI: https://www.doi.org/10.1038/s12276-020-0435-8

6. Muro R., Takayanagi H., Nitta T. T cell receptor signaling for γδT cell development. Inflamm Regener. 2019; 39 (6). DOI: https://doi.org/10.1186/s41232-019-0095-z

7. Gaud G., Lesourne R., Love P.E. Regulatory mechanisms in T cell receptor signaling. Nat Rev Immunol. 2018; (8): 485-97. DOI: https://www.doi.org/10.1038/s41577-018-0020-8

8. Vermijlen D., Gatti D., Kouzeli A., Rus T., Eberl M. γδ T cell responses: How many ligands will it take till we know? Semin Cell Dev Biol. 2018; 84: 75-86. DOI: https://www.doi.org/10.1016/j.semcdb.2017.10.009

9. Солпова О.А. Участие TCRαβ- и γδ-T-лимфоцитов, P-селектина в формировании клеточно-тромбоцитарных коагрегатов. ЭНИ Забайкальский медицинский вестник. 2016; (2): 71-9.

10. Benveniste P.M., Roy S., Nakatsugawa M., Chen E.L.Y., Nguyen L., Millar D.G., Ohashi P.S., Hirano N., Adams E.J., Zúñiga-Pflücker J.C. Generation and molecular recognition of melanoma-associated antigen-specific human γδ T cells. Sci Immunol. 2018; 3 (30): eaav4036. DOI: https://www.doi.org/10.1126/sciimmunol.aav4036

11. Guo X.J., Dash P., Crawford J.C., Allen E.K., Zamora A.E., Boyd D.F., Duan S., Bajracharya R., Awad W.A., Apiwattanakul N., Vogel P., Kanneganti T.D., Thomas P.G. Lung γδ T Cells Mediate Protective Responses during Neonatal Influenza Infection that Are Associated with Type 2 Immunity. Immunity. 2018; 49 (3): 531-44.e6. DOI: https://www.doi.org/10.1016/j.immuni.2018.07.011

12. Lawand M., Déchanet-Merville J., Dieu-Nosjean M.C. Key Features of Gamma-Delta T-Cell Subsets in Human Diseases and Their Immunotherapeutic Implications. Front Immunol. 2017; 8: 761. DOI: https://www.doi.org/10.3389/fimmu.2017.00761

13. Tian D., Yang L., Wang S. et al. Double negative T cells mediate Lag3-dependent antigen-specific protection in allergic asthma. Nat Commun. 2019; (10): 4246. DOI: https://doi.org/10.1038/s41467-019-12243-0

14. Haug T., Aigner M., Peuser M.M., Strobl C.D., Hildner K., Mougiakakos D., Bruns H., Mackensen A., Völkl S. Human double-negative regulatory T-cells induce a metabolic and functional switch in effector T-cells by suppressing mTOR activity. Front Immunol. 2019; 10: 883. DOI: https://www.doi.org/10.3389/fimmu.2019.00883

15. Lerkvaleekul B., Apiwattanakul N., Klinmalai C., Hongeng S., Vilaiyuk S. Age-related changes in lymphocyte subpopulations in healthy Thai children. J Clin Lab Anal. 2020; 34 (5): e23156. DOI: https://www.doi.org/10.1002/jcla.23156

16. Liapis K., Tsagarakis N.J., Panitsas F., Taparkou A., Liapis I., Roubakis C., Tsokanas D., Vasileiou P., Grigoriou E., Kakiopoulos G., Psarra K., Farmaki E., Paterakis G. Causes of double-negative T-cell lymphocytosis in children and adults. J ClinPathol. 2020; 73 (7): 431-8. DOI: https://www.doi.org/10.1136/jclinpath-2019-206255

17. Li H., Adamopoulos I.E., Moulton V.R., Stillman I.E., Herbert Z., Moon J.J., Sharabi A., Krishfield S., Tsokos M.G., Tsokos G.C. Systemic lupus erythematosus favors the generation of IL-17 producing double negative T cells. NatCommun. 2020; 11 (1): 2859. DOI: https://www.doi.org/10.1038/s41467-020-16636-4

18. Alexander J.J., Jacob A., Chang A., Quigg R.J., Jarvis J.N. Double negative T cells, a potential biomarker for systemic lupus erythematosus. Precis ClinMed. 2020; 3 (1): 34-43. DOI: https://www.doi.org/10.1093/pcmedi/pbaa001

19. Brandt D., Hedrich C.M. TCRαβ⁺CD3⁺CD4^-CD8^- (double negative) T cells in autoimmunity. Autoimmunity Reviews. 2018; 17 (4): 422-30. DOI: https://www.doi.org/10.1016/j.autrev.2018.02.001

20. Overgaard N.H., Jung J.W., Steptoe R.J., Wells J.W. CD4⁺/CD8⁺ double-positive T cells: more than just a developmental stage? J Leukoc Biol. 2015; 97 (1): 31-8. DOI: https://www.doi.org/10.1189/jlb.1RU0814-382

21. Bohner P., Chevalier M.F., Cesson V., Rodrigues-Dias S.C., Dartiguenave F., Burruni R., Tawadros T., Valerio M., Lucca I., Nardelli-Haefliger D., Jichlinski P., Derré L. Double Positive CD4⁺CD8⁺ T Cells Are Enriched in Urological Cancers and Favor T Helper-2 Polarization. Front Immunol. 2019; 10: 622. DOI: https://www.doi.org/10.3389/fimmu.2019.00622

22. Parrot T., Gorin J.B., Ponzetta A., Maleki K.T., Kammann T., Emgård J., Perez-Potti A., Sekine T., Rivera-Ballesteros O.; Karolinska COVID-19 Study Group, Gredmark-Russ S., Rooyackers O., Folkesson E., Eriksson L.I., Norrby-Teglund A., Ljunggren H.G., Björkström N.K., Aleman S., Buggert M., Klingström J., Strålin K., Sandberg J.K. MAIT cell activation and dynamics associated with COVID-19 disease severity. Sci Immunol. 2020; 5 (51): eabe1670. DOI: https://www.doi.org/10.1126/sciimmunol.abe1670

23. Хайдуков С.В., Байдун Л.А., Зурочка А.В., Тотолян А.А. Стандартизованная технология "исследование субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови с применением проточных цитофлюориметров-анализаторов" (проект). Медицинская иммунология. 2012; 14 (3): 255-68.

24. Marchant A., Kollmann T.R. Understanding the ontogeny of the immune system to promote immune-mediated health for life. Front Immunol. 2015; 6: 77. DOI: https://www.doi.org/10.3389/fimmu.2015.00077

25. Kollmann T.R., Kampmann B., Mazmanian S.K., Marchant A., Levy O. Protecting the newborn and young infant from infectious diseases: lessons from immune ontogeny. Immunity. 2017; 46 (3): 350-63. DOI: https://www.doi.org/10.1016/j.immuni.2017.03.009

26. Semmes E.C., Chen J.-L., Goswami1 R., Burt T.D., Permar S.R. Fouda G.G. Understanding early-life adaptive immunity to guide interventions for pediatric healthfront. Immunol. 2021. DOI: https://doi.org/10.3389/fimmu.2020.595297

27. Parker M.E., Ciofani M. Regulation of γδ T Cell Effector Diversification in the Thymus. FrontImmunol. 2020; 11: 42. DOI: https://doi.org/10.3389/fimmu.2020.00042

28. Fischer M.A., Golovchenko N.B., Edelblum K.L. γδ T cell migration: Separating trafficking from surveillance behaviors at barrier surfaces. 2020. DOI: https://doi.org/10.1111/imr.12915

29. Dimova T., Brouwer M., Gosselin F., Tassignon J., Leo O., Donner C., Marchant A., Vermijlen D. Effector Vγ9Vδ2 T cells dominate the human fetal γδ T-cell repertoire. Proc Natl Acad Sci USA. 2015; 112 (6): E556-65. DOI: https://doi.org/10.1073/pnas.1412058112

30. Clark B.L., Thomas P.G. A Cell for the Ages: Human γδ T Cells across the Lifespan. Int J Mol Sci. 2020; 21 (23): 8903. DOI: https://doi.org/10.3390/ijms21238903

31. Xu W., Lau Z.W.X., Fulop T., Larbi A. The Aging of γδ T Cells. Cells. 2020; 9 (5): 1181. DOI: https://doi.org/10.3390/cells9051181

32. D'Acquisto F., Crompton T. CD3⁺CD4^-CD8^- (double negative) T cells: saviours or villains of the immune response? Biochem Pharmacol. 2011; 82 (4): 333-40. DOI: https://doi.org/10.1016/j.bcp.2011.05.019

33. Ding Yu., Zhou L., Xia Yu., Song H., Yang J., Zhao X. Reference values for peripheral blood lymphocyte subsets of healthy children in China. Journal of Allergology and Clinical Immunology. 2018. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jaci.2018.04.022

34. Valiathan R., Ashman M., Asthana D. Effects of Ageing on the Immune System: Infants to Elderly. Scand J Immunol. 2016; 83 (4): 255-66. DOI: https://doi.org/10.1111/sji.12413

35. Хайдуков С.В. Малые субпопуляции Т-хелперов (Th наивные тимические, Th наивные центральные, Th9, Th22и CD4⁺CD8⁺ дважды положительные Т-клетки. Медицинская иммунология. 2013; 15 (6): 503-12.

36. Хайдуков С.В., Байдун Л.В. Современные подходы к оценке клеточной составляющей иммунного статуса. Медицинский алфавит. 2015; 2 (8): 44-51.

37. Жирков А.А., Алексеева Л.А., Железникова Г.Ф., Скрипченко Н.В., Монахова Н.Е., Бессонова Т.В. Основные и малые субпопуляции лимфоцитов крови и цереброспинальной жидкости при менингитах у детей. Инфекция и иммунитет. 2021; 11 (1): 111-22.

38. Супрун Е.Н. Состояние иммунной системы в различные возрастные периоды. Аллергология и иммунология в педиатрии. 2013; (35): 31-6.

Материалы данного сайта распространяются на условиях лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License («Атрибуция - Всемирная»)