Содержание коагрегатов тромбоцитов с αβ-, γδ-Т-лимфоцитами и их некоторыми минорными субпопуляциями в крови у здоровых детей

• Богомягкова Елена Назаровна
• Солпов Алексей Владимирович
• Витковский Юрий Антонович
• Терешков Павел Петрович

Резюме

Введение. Тромбоциты способны вступать в контактные адгезионные взаимодействия практически со всеми форменными элементами крови. Формирование коагрегатов тромбоцитов и лейкоцитов в кровотоке играет определенную роль в физиологических процессах миграции клеток, а степень их взаимодействия изменяется при патологии. В литературе сведения об адгезионном взаимодействии тромбоцитов с лейкоцитами, особенно с лимфоцитами и их субпопуляциями, в крови у здоровых детей представлены скудно.

Цель исследования - изучение относительного содержания и абсолютного количества коагрегатов тромбоцитов с лимфоцитами, Т-лимфоцитами, αβ- и γδ-Т-лимфоцитами, их минорными субпопуляциями - двойными негативными и двойными позитивными Т-лимфоцитами (DNT- и DPT-клетками), в периферической крови здоровых детей разного возраста, а также оценка корреляционной связи между исследуемыми параметрами и возрастом детей.

Материал и методы. Объектом исследования служили образцы венозной крови 83 здоровых детей (мальчиков и девочек) в возрасте от 7 мес до 14 лет. Для выявления лимфоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов применяли моноклональные антитела, конъюгированные с различными флуорохромами. Определение исследуемых параметров проводили с использованием проточной цитофлуориметрии.

Результаты. Исследовано относительное содержание и абсолютное количество лимфоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов у здоровых детей разных возрастных групп. Установлено снижение абсолютного числа коагрегатов тромбоцитов с Т-лимфоцитами, а именно с αβ-Т-лимфоцитами в крови у детей старшего возраста. В то же время наблюдалось повышение относительного содержания общего пула лейкоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов и коагрегатов (кровяных пластинок) с двойными негативными Т-клетками у детей старших возрастных групп по сравнению с детьми младшего возраста.

Заключение. Содержание лимфоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов зависит от возраста. Абсолютное число коагрегатов тромбоцитов с Т-лимфоцитами, αβ-Т-лимфоцитами снижается с возрастом, а содержание коагрегатов с γδ-T-лимфоцитами остается неизменным. При этом наблюдалось повышение относительного содержания общего пула лейкоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов и коагрегатов (кровяных пластинок) с двойными негативными Т-клетками у детей старшего возраста.

Ключевые слова:лимфоцитарно-тромбоцитарная адгезия; лимфоцитарно-тромбоцитарные коагрегаты

Введение

Традиционно тромбоциты считаются участниками системы гемостаза благодаря их способности останавливать кровотечение в мелких сосудах, инициировать процесс свертывания крови и регулировать фибринолиз [1-3]. Известно, что тромбоциты участвуют в иммунном ответе. Кровяные пластинки способны распознавать паттерны инфекционных агентов посредством паттерн-распознающих рецепторов (PRRs) и участвовать в активации врожденного иммунитета [4-7]. Проявляя такую функцию, они запускают воспалительную реакцию, вовлекают в нее лейкоциты, эндотелий сосудистой стенки, регулируют ангиогенез, продуцируют факторы роста, цитокины, хемокины [8, 9].

В последние годы установлено, что клетки основных популяций лимфоцитов делятся на множество минорных (малых) субпопуляций, функции которых изучены недостаточно. В периферической крови и в зоне воспаления к одним из представителей малых субпопуляций относят Т-лимфоциты, негативные по маркерам CD4 и CD8 (двойные негативные, DNT) либо экспрессирующие на поверхности и тот и другой антиген (двойные позитивные, DPT) [10, 11].

Ю.А. Витковским и соавт. установлено, что лимфоциты способны к спонтанному адгезионному взаимодействию с тромбоцитами. В общем пуле лимфоцитов обнаруживается до 14 ± 1 % контактирующих с тромбоцитами клеток. Обнаружено, что клетками, спонтанно взаимодействующими с тромбоцитами, являются Т-лимфоциты, несущие маркеры СD3 и CD4 [12]. Также выявлено, что в физиологических условиях тромбоциты обеспечивают контакт свежевыделенных CD4⁺-Т-клеток крови и CD4⁺-Т-лимфоцитов клеточной линии с поврежденным участком сосудистой стенки. Авторами описаны клеточно-тромбоцитарные адгезионные мосты и влияние различных показателей потоковой скорости сдвига на формирование тромбоцитарно-лимфоцитарных кластеров in vitro [13, 14]. Выявлено, что в условиях циркуляции в формировании коагрегатов с тромбоцитами участвуют как αβ-, так и γδ-T-лимфоциты, причем количественно в составе агрегатов преобладают αβ-Т-клетки. В процентном отношении большая часть γδ-T-лимфоцитов находится в контактном взаимодействии с тромбоцитами [15].

В литературе сведения об адгезионном лейкоцитарно-тромбоцитарном взаимодействии у здоровых детей в основном получены при обследовании ограниченных возрастных групп, которые служили в качестве групп сравнения при исследовании различных заболеваний [16, 17]. Описано увеличение количества моноцитарно-тромбоцитарных агрегатов в крови здоровых 7-летних детей в сравнении со взрослыми [18]. Однако взаимодействие αβ-, γδ-Т-лимфоцитов и их некоторых минорных субпопуляций с тромбоцитами у здоровых детей разного возраста до сих пор не изучено.

Цель нашего исследования - изучение относительного и абсолютного содержания коагрегатов тромбоцитов с лимфоцитами, Т-лимфоцитами, αβ- и γδ-Т-лимфоцитами, их минорными субпопуляциями - двойными негативными и двойными позитивными Т-лимфоцитами (DNT- и DPT-клетками) в периферической крови здоровых детей разного возраста, а также оценка корреляционной связи между исследуемыми параметрами и возрастом детей.

Материал и методы

Участники исследования. Исследование проводили согласно протоколу Конвенции Совета Европы о правах человека и биомедицине 1999 г. и Хельсинкской декларации ВМА 2000 г. Объектом исследования служили образцы венозной крови практически здоровых детей, полученные путем пункции периферической вены и собранные в вакуумные пробирки с цитратом натрия (3,8 %). Все исследования проводили в рамках диспансерной программы для своевременного выявления скрытых вариантов обменной патологии. Признаки воспалительной реакции в исследуемых группах детей по состоянию периферической крови (показатели общего анализа крови, содержание белков острой фазы воспаления) отсутствовали. В общей сложности обследованы 83 практически здоровых ребенка (47 мальчиков и 36 девочек) в возрасте от 7 мес до 14 лет. Все дети были разделены на 6 исследуемых групп: 1-я группа - дети до 1 года, 2-я группа - от 1 года до 2 лет, 3-я группа - от 2 до 5 лет, 4-я группа - от 6 до 8 лет, 5-я группа - от 8 до 12 лет, 6-я группа - дети старше 12 лет. Подготовку образцов периферической крови и настройку проточного цитофлуориметра проводили в соответствии с рекомендациями, изложенными С.В. Хайдуковым и соавт. [19].

Критерии включения в исследование: информированное добровольное согласие родителей детей на участие в исследовании; здоровые дети в возрасте от 7 мес до 14 лет, после осмотра врачом-педиатром, без клинических признаков и отсутствии в анамнезе аллергии, инфекционных, воспалительных и хронических заболеваний, не принимающие лекарственных средств во время исследования и в течение 2 недель до проведения исследования.

Критерии исключения из исследования: дети старше 14 лет; дети с инфекционными и воспалительными заболеваниями, с аллергическими заболеваниями в анамнезе; дети, принимающие лекарственные средства.

Цитометрический анализ. Выявление тромбоцитарно-лейкоцитарных комплексов проводили общепринятым способом с помощью моноклональных антител (МкАт), конъюгированных с различными флуорохромами [20]. Проводили определение коагрегатов тромбоцитов с различными видами лейкоцитов: в общем пуле лейкоцитов (PLC, Platelet leukocyte Coaggregates), в общем пуле лимфоцитов (PLymC, Platelet Lymphocyte Coaggregates), с Т-лимфоцитами - в их общем пуле (PTcelC, Platelet T cells Coaggregates), а также среди Т-хелперов (PThelpC, Platelet Т-helper Coaggregates), Т-киллеров (PTkillerC, Platelet Т-killer Coaggregates). Далее содержание лимфоцитарно-тромбоцитарных комплексов изучали среди αβ- и γδ-Т-клеток - в их общем пуле (PαβТcelC, Platelet αβ-T cells Coaggregates), (PγδТcelC, Platelet γδ-T cells Coaggregates), среди αβ-Т-хелперов (PαβТhelpC, Platelet αβ-Т-helper Coaggregates) и αβ-Т-киллеров (PαβТkillerC, Platelet αβ-Т-killer Coaggregates), γδ-Т-хелперов (PγδТhelpC, Platelet γδ-Т-helper Coaggregates) и γδ-Т-киллеров (PγδТkillerC, Platelet γδ-Т-killer Coaggregates). Также исследовали контактное взаимодействие тромбоцитов с минорными субпопуляциями лимфоцитов: двойными позитивными Т-лимфоцитами (PDPTC, Platelet DPT Coaggregates), двойными негативными Т-лимфоцитами (PDNTC, Platelet DNT Coaggregates).

Подсчет относительного числа коагрегатов тромбоцитов и клеток проводили от общих клеточных популяций к их малым субпопуляциям в соответствии с их общепринятой иерархической последовательностью. В качестве маркеров поверхностных молекул тромбоцитов использовали МкАт CD42а-FITC. Все использованные МкАт производства Beckman Coulter (США). Эритроциты из образцов удаляли при помощи коммерческого лизирующего раствора BDFACS™ Lysing Solution (кат. № 349202, Becton Dickinson, США).

По завершении инкубации образцы однократно отмывали от несвязавшихся антител избытком забуференного фосфатами физиологического раствора (7 мин при 300 g), а полученный клеточный осадок ресуспендировали в 300 мкл забуференного фосфатами физиологического раствора, содержавшего 1 % нейтрального параформальдегида (кат. № HT5011, Sigma-Aldrich, США).

Абсолютные значения были получены в одноплатформенной системе с помощью реагента Flow Count™ (Beckman Coulter, США). Анализ образцов проводили на проточном цитофлуориметре CytoFLEXLX (Beckman Coulter, США), оснащенном 4 диодными лазерами с длиной волны 355, 405, 488 и 561 нм. Обработку цитофлуориметрических данных проводили при помощи программ Cyt Expertsoftware v.2.0 и Kaluza™ v.2.1.1 (Beckman Coulter, США). В каждом образце анализировалось ≥ 50 000 лимфоцитов периферической крови.

Статистическая обработка. При проведении статистического анализа руководствовались принципами Международного комитета редакторов медицинских журналов (ICMJE) и рекомендациями "Статистический анализ и методы в публикуемой литературе" (SAMPL). Нормальность распределения признаков оценивали с помощью критерия Шапиро-Уилка. Учитывая негауссово распределение, количественные признаки представлены в виде медианы и 95 % доверительного интервала: Me [95 % доверительный интервал (ДИ)]. Для сравнения всех 6 исследуемых групп по одному количественному признаку применялся критерий Краскела-Уоллиса (H). При наличии статистически значимых различий проводилось попарное сравнение с помощью критерия Манна-Уитни (U) с поправкой Бонферрони. Во всех случаях р < 0,05 считали статистически значимым. Для выявления и оценки корреляционных связей между исследуемыми параметрами и возрастом ребенка использовали коэффициент ранговой корреляции Спирмена. Силу связи между исследуемыми параметрами определяли по шкале Чеддока. Статистическую обработку результатов исследования осуществляли с помощью пакета программ IBM SPSS Statistics Version 25.0 (International Business Machines Corporation, license No.Z125-3301-14, США).

Результаты

Полученные нами значения абсолютного числа и относительного содержания лимфоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов в периферической крови детей разного возраста представлены на рис. 1-3 и в табл. 1, 2. В таблицах приведены параметры, статистически значимо отличающиеся между группами. Установлено, что с увеличением возраста ребенка абсолютное количество коагрегатов в общем пуле лимфоцитов (PLymC) и в общем пуле Т-лимфоцитов (PTcelC), а также среди Т-хелперов (PThelpC), в общем пуле αβ-Т-лимфоцитов (PαβTC), среди αβ-Т-хелперов (PαβТhelpC) и αβ-Т-киллеров (PαβТkillerC) снижалось (p < 0,05) (см. рис. 1, 2, табл. 1).

Рис. 1. Содержание лимфоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов PTcelC, PThelpC, PαβTC, PαβThelpC, PαβTkillC у детей в периферической крови

* - значимые различия по критерию Н Краскела-Уоллиса; ** - различия между отдельными группами достоверны (p < 0,01).

Рис. 2. Содержание лимфоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов PLC, PLymC у детей в периферической крови

Рис. 3. Относительное содержание лимфоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов PLC, PDNTC у детей в периферической крови

Таблица 1. Содержание лимфоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов у детей различного возраста, лимф/мкл

Примечание. * - значимые различия по Н-критерию Краскела-Уоллиса.

Постепенное уменьшение количества коагрегатов наблюдалось практически во всех сравниваемых группах. Нами выявлено снижение количества PαβThelpC в 2,7 раза (U = 21,0; p < 0,05) и снижение количества PTcelC в 1,8 раза (U = 29,5; p < 0,05), в свою очередь количество PThelpC снижалось в 2,5 раза (U = 25,0; p < 0,05), PαβTkillC - в 1,7 раза (U = 30,0; p < 0,05), PαβTC - в 2,3 раза (U = 25,0; p < 0,05), PLymC - в 3,2 раза (U = 9,0; p < 0,05) (см. рис. 1, 2, табл. 1). Разница абсолютного количества лимфоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов между группами значимо проявлялась, начиная с младенческого возраста (p < 0,05). У детей 1-й и 2-й возрастных групп показатели не различались между собой (p > 0,05). При этом число ко-агрегатов в общем пуле γδ-T-лимфоцитов (PγδТC) оставалось неизменным.

Между возрастом детей и показателями PαβThelpC, PThelpC, PαβTC, PLymC обнаружена заметная обратная корреляционная связь (r = -0,56; p < 0,05). Это подтверждает наши предположения о влиянии возраста на абсолютное количество лимфоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов у детей.

Определенный интерес представляет не только абсолютное количество лейкоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов, но и их относительное содержание. Начиная с младенческого возраста, постепенно повышается содержание общих лейкоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов (PLC) и коагрегатов тромбоцитов с двойными негативными T-лимфоцитами (PDNT). Относительное содержание PLC возрастало в 2 раза, и к пубертатному периоду их содержание достигло 30 % от общего числа коагрегатов по сравнению с группой детей в возрасте до 1 года. Доля PDNT увеличивалась в 1,7 раза, и к 12 годам их содержание увеличилось до 10 % от общего числа коагрегатов по сравнению с детьми младшего возраста (см. рис. 3, табл. 2). У детей в возрасте от 1 года до 5 лет показатели не различались между собой (p > 0,05).

Между возрастом детей и относительным числом PDNTC и PLC обнаружена умеренная прямая корреляционная связь (r = 0,39; p < 0,05).

Таблица 2. Относительное содержание лимфоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов у детей разного возраста, %

Примечание. * - значимые различия по Н-критерию Краскела-Уоллиса.

Обсуждение

Ранее показано, что тромбоциты способны вступать в контактное взаимодействие с различными субпопуляциями лимфоцитов [21, 22]. Установлено, что циркулирующие лимфоцитарно-тромбоцитарные коагрегаты важны для последующей активации и миграции лимфоцитов в ткани. Это играет значительную роль в иммунном ответе [23].

Нами выявлено, что абсолютное содержание лимфоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов среди различных субпопуляций T-лимфоцитов здоровых детей имеет свои особенности: количество коагрегатов PLymC, PTcelC, PThelpC с возрастом детей снижается. Такая же динамика наблюдается и для абсолютного количества коагрегатов тромбоцитов с αβ-T-лимфоцитами на фоне постоянного уровня коагрегатов тромбоцитов с γδ-T-лимфоцитами.

Согласно современным представлениям, тромбоциты оказывают влияние на функцию лимфоцитов через прямой межклеточный контакт или растворимые медиаторы. В отличие от γδ-T-лимфоцитов, которые также адгезируют на своей поверхности тромбоциты, αβ-T-лимфоциты в большей степени вступают в адгезионное взаимодействие с тромбоцитами [24]. Хотелось бы отметить, что тромбоциты усиливают адгезию и клеточную миграцию Т-хелперов и Т-киллеров [25]. Однако у детей до 10 лет функциональная активность тромбоцитов снижена [26]. Мы предполагаем, что к пубертатному периоду происходит созревание тромбоцитов и тромбоциты усиливают миграцию лимфоцитов в зависимости от экспрессии ими тех или иных молекул адгезии [27]. Кроме того, у детей наблюдается ассоциированное с возрастом физиологическое уменьшение количества Т-клеток, связанное с инволюцией тимуса [28, 29]. Вероятно, за счет инволютивных процессов в тимусе, высокой способности тромбоцитов усиливать миграцию Т-лимфоцитов в ткани из циркуляции эти причины повлияли на снижение количества лимфоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов по мере взросления детей.

Отдельно хотелось бы отметить, что у детей снижено число PDPTC. Ранее установлено, что в процессе инволюции тимуса уменьшается количество двойных позитивных Т-клеток (DPT) [30]. С этим согласуются полученные нами данные о низком количестве PDPTC у детей. Наоборот, рост этой минорной субпопуляции Т-клеток наблюдается только при патологических состояниях, таких как хронические вирусные инфекции (ВЭБ-инфекция, ВИЧ-инфекция), а также при некоторых аутоиммунных, аллергических и онкологических заболеваниях [31].

Обнаружено, что при взрослении детей наблюдается увеличение процентного содержания общего пула лейкоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов (PLC). Увеличение PLC можно объяснить изменением степени экспрессии молекул адгезии на мембране лейкоцитов или тромбоцитов. Так, ранее обнаружено, что число PLC возрастало у взрослых при увеличении количества P-селектина на поверхности тромбоцитов. Ингибирование этой молекулы приводило к снижению содержания PLC [32]. Возможно, подобный механизм взаимодействия лежит в основе увеличения относительного содержания PLC и у детей. Также ранее показано, что относительное содержание моноцитарно-тромбоцитарных коагрегатов в общей циркуляции увеличено у детей в сравнении со взрослыми, но при этом не наблюдалось повышенной экспрессии P-селектина. Причину роста степени адгезионного взаимодействия моноцитов и тромбоцитов авторы объясняют возможным участием других молекул адгезии: Mac-1, LFA-1 и ICAM-2 [33].

Закономерно возникает вопрос: за счет каких видов лейкоцитов наблюдается количественный рост общих лейкоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов? Мы предполагаем, что основной вклад в нарастание их числа вносят нейтрофилы и моноциты. Известно, что с появлением второго перекреста кривой динамики относительного содержания лимфоцитов и нейтрофилов в возрасте 5-6 лет происходит подъем числа нейтрофилов. Установлено, что нейтрофилы активно вступают во взаимодействие с тромбоцитами. Кроме того, они образуют внеклеточные ловушки (NETs), в процесс формирования которых вовлекаются тромбоциты [34]. Конечно, для подтверждения этих предположений требуются дальнейшие исследования способности тромбоцитов вступать в адгезионный контакт с другими видами лейкоцитов.

Выявлено, что относительное содержание PDNTC увеличивалось у детей старшего возраста по сравнению с младшими возрастными группами. Описано, что DNT-клетки защищены от апоптоза в вилочковой железе за счет высокого уровня экспрессии белка Bcl-2 [35], поэтому нельзя исключить возможность усиленной миграции этих клеток из тимуса в кровоток. Вероятно, благодаря этому механизму объясняется увеличение относительного содержания DNT-клеток с возрастом у детей к 5-10 годам [36]. Таким образом, возможно, что за счет активного взаимодействия тромбоцитов с DNT-лимфоцитами относительное содержание PDNTC растет по мере взросления детей.

Заключение

Впервые исследовано содержание лейкоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов у здоровых детей. Полученные результаты показали, что по мере взросления у детей снижается абсолютное число тромбоцитарноклеточных коагрегатов среди лимфоцитов и Т-лимфоцитов (в их общем пуле, среди Т-хелперов), а также уменьшается количество коагрегатов среди αβ-Т-клеток (в их общем пуле, среди αβ-Т-хелперов и αβ-Т-киллеров). При этом увеличивается процентное содержание общих лейкоцитарно-тромбоцитарных коагрегатов (PLC), а также способность тромбоцитов вступать в контакт с DNТ-лимфоцитами.

Выражаем благодарность В.А. Мудрову за статистическую обработку данных и Н.Г. Трушиной за помощь в сборе материала.

Литература

1. Mezger M., Nording H., Sauter R. et al. Platelets and immune responses during thrombo inflammation. Front Immunol. 2019; 10: 1731. DOI: https://www.doi.org/10.3389/fimmu.2019.01731

2. Gerrits A.J., Frelinger A.L. 3rd, Michelson A.D. Whole blood analysis of leukocyte-platelet aggregates. Curr. Protoc. Cytom. 2016; 78: 6.15.1-10. DOI: https://www.doi.org/10.1002/cpcy.8

3. Xu X.R., Zhang D., Oswald B.E., Carrim N., Wang X. Hou Y., Zhang Q., Lavalle C., McKeown T., Marshall A.H., Ni H. Platelets are versatile cells: New discoveries in hemostasis, thrombosis, immune responses, tumor metastasis and beyond. Crit. Rev. Clin. Lab Sci. 2016; 53 (6): 409-30. DOI: https://www.doi.org/10.1080/10408363.2016.1200008

4. Свиридова С.П., Сомонова О.В., Кашия Ш.Р., Обухова О.А., Сотников А.В. Роль тромбоцитов в воспалении и иммунитете. Исследования и практика в медицине. 2018; 5 (3): 40-52. DOI: https://www.doi.org/10.17709/2409-2231-2018-5-3-4

5. Ali R.A., Wuescher L.M., Worth R.G. Platelets: essential components of the immune system. Curr. Trends Immunol. 2015; 16: 65-78. PMID: 27818580; PMCID: PMC5096834.

6. Nurden A.T. The biology of the platelet with special reference to inflammation, wound healing and immunity. Front. Biosci. (Landmark Ed.). 2018; 23: 726-51. DOI: https://www.doi.org/10.2741/4613

7. Łukasik Z.M., Makowski M., Makowska J.S. From blood coagulation to innate and adaptive immunity: the role of platelets in the physiology and pathology of autoimmune disorders. Rheumatol. Int. 2018; 38 (6): 959-74. DOI: https://www.doi.org/10.1007/s00296-018-4001-9

8. Lam F.W., Vijayan K.V., Rumbaut R.E. Platelets and their interactions with other immune cells. Compr. Physiol. 2015; 5 (3): 1265-80. DOI: https://www.doi.org/:10.1002/cphy.c140074

9. Hottz E.D., Azevedo-Quintanilha I.G., Palhinha L. et al. Platelet activation and platelet-monocyte aggregate formation trigger tissue factor expression in patients with severe COVID-19. Blood. 2020; 136 (11): 1330-41. DOI: https://www.doi.org/10.1182/blood.2020007252

10. Lisco A., Wong C.S., Price S. et al. Paradoxical CD4 lymphopenia in autoimmune lymphoproliferative syndrome (ALPS). Front. Immunol. 2019; 10: 1193. DOI: https://www.doi.org/10.3389/fimmu. 2019.01193

11. Bohner P., Chevalier M.F., Cesson V. et al. Double positive CD4⁺CD8⁺ T cells are enriched in urological cancers and favor T helper-2 polarization. Front. Immunol. 2019; 10: 622. DOI: https://www.doi.org/10.3389/fimmu.2019.00622

12. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов А.В. Феномен лимфоцитарно-тромбоцитарного розеткообразования. Иммунология. 1999; (4): 35-7.

13. Solpov A., Shenkman B., Vitkovsky Y., Brill G., Koltakov A., Farzam N., Varon D., Bank I., Savion N. Platelets enhance CD4⁺ lymphocyte adhesion to extracellular matrix under flow conditions: role of platelet aggregation, integrins, and non-integrin receptors. Thromb. Haemost. 2006; 95 (5): 815-21. PMID: 16676073.

14. Витковский Ю.А., Кузник Б.И., Солпов А.В. Патогенетическое значение лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии. Медицинская иммунология 2006; 8 (5-6): 745-53.

15. Diacovo T.G., Roth S.J., Morita C.T., Rosat J.P., Brenner M.B., Springer T.A. Interactions of human alpha/beta and gamma/delta T lymphocyte subsets in shear flow with E-selectin and P-selectin. J. Exp. Med. 1996; 183 (3): 1193-1203. DOI: https://www.doi.org/10.1084/jem.183.3.1193

16. Кузник Б.И., Батожаргалова Б.Ц., Витковский Ю.А. Состояние иммунитета и лимфоцитарно-тромбоцитарной адгезии у детей с хроническим деформирующим бронхитом. Медицинская иммунология. 2008; 10 (6): 583-8.

17. Долина А.Б., Кузник Б.И., Розенберг В.Я., Вишнякова Т.М., Витковский Ю.А. Влияние тималина на состояние иммунитета и лимфоцитарно-тромбоцитарную адгезию у детей с вторичным инфекционным эндокардитом. Медицинская иммунология. 2010; 12 (4-5): 381-386. DOI: https://doi.org/10.15789/1563-0625-2010-4-5-381-386

18. Vignesh P., Rawat A., Shandilya J.K., Singh Sachdeva M.U., Ahluwalia J., Singh S. Monocyte platelet aggregates in children with Kawasaki disease - a preliminary study from a tertiary care centre in North-West India. Pediatr. Rheumatol. Online J. 2021; 19 (1): 25. DOI: https://www.doi.org/10.1186/s12969-021-00515-3

19. Хайдуков С.В., Байдун Л.А., Зурочка А.В., Тотолян А.А. Стандартизованная технология "Исследование субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови с применением проточных цитофлюориметров-анализаторов" (проект). Медицинская иммунология. 2012; 14 (3): 255-68. DOI: https://doi.org/10.15789/1563-0625-2012-3-255-268

20. Finsterbusch M., Schrottmaier W.C., Kral-Pointner J.B., Salzmann M., Assinger A. Measuring and interpreting platelet-leukocyte aggregates. Platelets. 2018; 29 (7): 677-85. DOI: https://www.doi.org/:10.1080/09537104.2018.1430358

21. Кузник Б.И., Витковский Ю.А., Солпов А.В. Адгезивные молекулы и лейкоцитарно-тромбоцитарные взаимодействия. Вестник гематологии. 2006; 2 (2): 42-55.

22. Zamora C., Cantó E., Nieto J.C., Bardina J., Diaz-Torné C., Moya P., Magallares B., Ortiz M.A., Julià G., Juarez C., Llobet J.M., Vidal S. Binding of platelets to lymphocytes: a potential anti-inflammatory therapy in rheumatoid arthritis. J. Immunol. 2017; 198 (8): 3099-108. DOI: https://www.doi.org/10.4049/jimmunol.1601708

23. Tan S., Zhang J., Sun Y., Gistera A., Sheng Z., Malmström R.E., Hou M., Peng J., Ma C., Liao W., Li N. Platelets enhance CD4⁺ central memory T cell responses via platelet factor 4-dependent mitochondrial biogenesis and cell proliferation. Platelets. 2021; Jun 17: 1-11. DOI: https://www.doi.org/10.1080/09537104.2021.1936479

24. Солпова О.А. Участие TCRαβ- и γδ-T-лимфоцитов, P-селектина в формировании клеточно-тромбоцитарных коагрегатов. Забайкальский медицинский вестник. 2016; (2): 71-9.

25. Koupenova M., Clancy L., Corkrey H.A., Freedman J.E. Circulating platelets as mediators of immunity, inflammation, and thrombosis. Circ. Res. 2018; 122 (2): 337-51. DOI: https://www.doi.org/10.1161/CIRCRESAHA.117.310795

26. Herken K., Glauner M., Robert S.C. et al. Age-dependent control of collagen-dependent platelet responses by thrombospondin-1-comparative analysis of platelets from neonates, children, adolescents, and adults. Int. J. Mol. Sci. 2021; 22 (9): 4883. DOI: https://www.doi.org/10.3390/ijms22094883

27. Gaertner F., Massberg S. Patrolling the vascular borders: platelets in immunity to infection and cancer. Nat. Rev. Immunol. 2019; 19 (12): 747-60. DOI: https://www.doi.org/10.1038/s41577-019-0202-z

28. Супрун Е.Н. Состояние иммунной системы в различные возрастные периоды. Аллергология и иммунология в педиатрии. 2013; (35): 31-6.

29. Гусельникова В.В., Полевщиков А.В. Тучные клетки тимуса: на перекрестке трех дорог. Иммунология. 2021; 42 (4): 327-36. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2021-42-4-327-336

30. Thomas R., Wang W., Su D.M. Contributions of age-related thymic involution to immunosenescence and inflammaging. Immun. Ageing. 2020; 17: 2. DOI: https://doi.org/10.1186/s12979-020-0173-8

31. Жирков А.А., Алексеева Л.А., Железникова Г.Ф., Скрипченко Н.В., Монахова Н.Е., Бессонова Т.В. Основные и малые субпопуляции лимфоцитов крови и цереброспинальной жидкости при менингитах у детей. Инфекция и иммунитет. 2021; 11 (1): 111-22.

32. Shenkman B., Brill G., Solpov A., Vitkovsky Y., Kuznik B., Koltakov A., Kotev-Emeth S., Savion N., Bank I. CD4⁺ lymphocytes require platelets for adhesion to immobilized fibronectin in flow: role of beta(1) (CD29)-, beta(2) (CD18)-related integrins and non-integrin receptors. Cell. Immunol. 2006; 242 (1): 52-9. DOI: https://doi.org/10.1016/j.cellimm.2006.09.005

33. Yip C., Ignjatovic V., Attard C., Monagle P., Linden M.D. First report of elevated monocyte-platelet aggregates in healthy children. PLoS One. 2013; 8 (6): e67416. DOI: https://www.doi.org/10.1371/journal.pone.0067416

34. Kim J., Bae J.S. Tumor-associated macrophages and neutrophils in tumor microenvironment. Mediators Inflamm. 2016; 2016: 6058147. DOI: https://doi.org/10.1155/2016/6058147

35. Старская И.С., Полевщиков А.В. Морфологические аспекты атрофии тимуса при стрессе. Иммунология. 2013; 34 (5): 271-7.

36. Lerkvaleekul B., Apiwattanakul N., Klinmalai C., Hongeng S., Vilaiyuk S. Age-related changes in lymphocyte subpopulations in healthy Thai children. J. Clin. Lab. Anal. 2020; 34 (5): e23156. DOI: https://www.doi.org/10.1002/jcla.23156

Материалы данного сайта распространяются на условиях лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License («Атрибуция - Всемирная»)