Изучение репродуктивной токсичности рекомбинантной аллерговакцины для лечения аллергии на пыльцу березы и перекрестные аллергены

Резюме

Введение. Подавляющее большинство аллерговакцин в своем составе содержат природные аллергены, так как они изготавливаются из экстрактов природного сырья. Это накладывает ограничения на их использование: часто возникают нежелательные эффекты, а также такие вакцины не применяют для профилактики у здоровых лиц и не используют в период беременности и лактации, чтобы избежать сенсибилизации. Недавно была создана рекомбинантная гипоаллергенная вакцина ABP-Vax для лечения и профилактики аллергии на пыльцу березы и перекрестные аллергены. Благодаря своим гипоаллергенным свойствам эта вакцина имеет профилактический потенциал применения, а также потенциально может использоваться в период беременности.

Цель данной работы - экспериментальное изучение влияния аллерговакцины ABP-Vax на показатели генеративной функции (фертильности) самок крыс, а также на пре- и постнатальное развитие их потомства.

Материал и методы. Самкам крыс вводили многократно подкожно аллерговакцину ABP-Vax до спаривания и во время беременности. Курс инъекций охватывал период до зачатия и продолжался до периода лактации. Самок, получавших инъекции, спаривали с интактными самцами и определяли индексы генеративной функции самок, а также показатели эмбриотоксического действия аллерговакцины в пре- и постнатальный период.

Результаты. Анализ показателей пренатального развития потомства не выявил никаких признаков эмбриотоксического действия аллерговакцины. В части исследования по изучению постнатального развития потомства также не установлено влияния вакцины на физическое развитие потомства. Показатели репродуктивной функции экспериментальных животных имели нормальный уровень.

Заключение. Не установлено негативного влияния аллерговакцины ABP-Vax на генеративную функцию самок крыс, а также на пре- и постнатальное развитие их потомства. Результаты исследования подтверждают предположение о возможности применения ABP-Vax в период до зачатия, во время беременности и лактации.

Ключевые слова:аллерговакцина ABP-Vax; иммунизация; подкожное введение; репродуктивная токсичность; эмбриотоксическое действие; пренатальный период; постнатальный период

Для цитирования: Ковалева Е.В., Рыбалкин С.П., Шангараева В.А., Иванова Ю.В., Пасихов Г.Б., Шиловский И.П., Шершакова Н.Н., Онацкий Н.М., Хаитов М.Р. Изучение репродуктивной токсичности рекомбинантной аллерговакцины для лечения аллергии на пыльцу березы и перекрестные аллергены. Иммунология. 2023; 44 (6): 721-730. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2023-44-6-721-730

Финансирование. Работа выполнена в рамках государственного задания № 22.001.22.800 в НИЦ ТБП - филиале ФГБУ ГНЦ "Институт иммунологии" ФМБА России. Публикация результатов исследования в открытой печати разрешена.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Вклад авторов. Концепция и дизайн исследования - Рыбалкин С.П., Шиловский И.П., Шершакова Н.Н., Пасихов Г.Б.; сбор, обработка материала и статистическая обработка - Ковалева Е.В., Шангараева В.А., Иванова Ю.В.; написание текста и ответственность за целостность всех частей статьи - Ковалева Е.В.; редактирование - Рыбалкин С.П., Шиловский И.П.; утверждение окончательного варианта статьи - Рыбалкин С.П., Шиловский И.П., Онацкий Н.М., Хаитов М.Р.

Введение

Аллергические заболевания (АЗ) приобрели статус глобальных проблем, затрагивающих все человечество. Пищевая аллергия, аллергический ринит, атопический дерматит и атопическая бронхиальная астма относятся к самым распространенным АЗ среди всей неинфекционной патологии человека [1]. От АЗ страдает в среднем 30 % населения. Согласно статистике Всемирной организации здравоохранения, в США ~ 20 % населения страдает аллергией, в Германии - 25 % населения, в России - от 17 до 35 % (в зависимости от региона) [2-4]. В северных регионах нашей страны, а также в странах Северного полушария распространена аллергия на пыльцу березы (до 30 % от всех случаев аллергии) [5]. Кроме того, аллерген пыльцы березы по своей структуре очень похож на некоторые пищевые аллергены растительного происхождения, например аллергены яблока, сои, персика, арахиса. Вследствие этого у пациентов, страдающих аллергией на пыльцу березы, могут развиваться перекрестные реакции и на другие аллергены [6].

Аллерген-специфическая иммунотерапия (АСИТ) считается единственным патогенетическим способом лечения аллергии [7-9], однако она имеет свои ограничения в контексте безопасности. В ходе АСИТ могут возникать местные аллергические реакции: сыпь, зуд и раздражение, а в некоторых случаях - анафилактический шок [10]. В случае применения аллерговакцин нежелательные эффекты обусловлены содержанием в их составе аллергенов, так как подавляющее большинство аллерговакцин производится из экстрактов природного сырья.

Появляются новые способы усовершенствования аллерговакцин [1, 11, 12]. Недавно была разработана рекомбинантная аллерговакцина ABP-Vax для лечения и профилактики аллергии на пыльцу березы и перекрестные аллергены. В отличие от классических вакцин, она не содержит нативных аллергенов, а лишь их IgE-эпитопы в линейной гипоаллергенной форме, за счет чего был достигнут высокий профиль ее безопасности [13, 14].

Учитывая структурные сходства аллергена пыльцы березы (Bet v 1) и аллергена яблока (Mal d 1) в состав вакцины были включены пептиды, имитирующие IgE-эпитопы обоих аллергенов. Известно, что на короткие пептиды иммунный ответ не развивается, поэтому пептиды, имитирующие IgE-эпитопы аллергенов (Bet v 1 и Mal d 1) производились в виде рекомбинантного гибридного белка AB-PreS, в котором пептиды были объединены с белком PreS. Это белок вириона вируса гепатита В, он необходим вирусу для проникновения в клетку. В данной вакцинной конструкции этот белок используется в качестве носителя для повышения иммуногенности слитых с ним пептидов. Важной особенностью этого белка является то, что он не аллергенен, что позволяет использовать его в аллерговакцинах [15].

Наработка гибридного белка AB-PreS осуществлялась в Е. coli, после чего он абсорбировался на адъюванте (гидроокиси алюминия) для получения готовой лекарственной формы аллерговакцины ABP-Vax [13, 16].

Принимая во внимание гипоаллергенную природу вакцины, она может применяться не только для лечения аллергии, но и для профилактики, что невозможно для вакцин, основанных на экстрактах аллергенов. Кроме того, такую гипоаллергенную вакцину можно использовать в период беременности и лактации, так как она не содержит цельного аллергена. Тем не менее требуется экспериментальное подтверждение этого предположения. Поэтому целью данного исследования было изучение репродуктивной токсичности рекомбинантной аллерговакцины ABP-Vax.

Материал и методы

Регулирующие стандарты. Исследование было выполнено в соответствии с Межгосударственным стандартом ГОСТ 33044-2014 "Принципы надлежащей лабораторной практики", Методическими рекомендациями по изучению репродуктивной токсичности лекарственных средств [17] и "Руководством по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Иммунобиологические лекарственные препараты" [18].

Лабораторные животные и их содержание. До проведения экспериментов был составлен ветеринарный протокол № 827 (от 15.02.2023), утвержденный экспертной Комиссией по биоэтике НИЦ ТБП - филиала ФГБУ ГНЦ "Институт иммунологии" ФМБА России. Основные правила содержания и ухода соответствовали принятым Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и иных научных целей [19], а также программе "Руководство по содержанию и использованию лабораторных животных" [20].

В качестве тест-системы использовались половозрелые беспородные белые крысы, 60 самок массой 240-280 г (по 30 животных в подопытной и контрольной группах) и 30 интактных самцов (массой 260-300 г) для спаривания с иммунизированными самками. Сертифицированные животные были получены из питомника ФГБУН НЦБМТ ФМБА России, филиал "Столбовая", содержались на стандартном корме ООО "Лабораторкорм" (Россия) с соблюдением основных правил "Программы по устройству, оборудованию и содержанию вивария НИЦ ТБП - филиала ФГБУ ГНЦ "Институт иммунологии" ФМБА России" от 2023 г.

Дизайном исследования было определено 5-кратное подкожное введение вакцины самкам крыс: в 63, 42 и 21-й день до спаривания, за 1 день до начала спаривания с интактными самцами и в 20-й день беременности. Данный режим введения позволил получить данные как о воздействии аллерговакцины ABP-Vax на генеративную функцию крыс, так и о влиянии на пре- и постнатальное развитие потомства [21].

Вакцину вводили самкам крыс в область лопатки в дозе 400 мкг/кг, что соответствует 350-кратной предполагаемой для человека прививочной дозе (ПД). При этом вводимая животным доза в объеме 0,5 мл соответствовала однократной ПД - 80 мкг/особь. Расчет доз для введения животным проводили из предположения, что суточная терапевтическая доза препарата для человека составляет 80 мкг полипептида AB-PreS, что соответствует 1,14 мкг/кг. Контрольной группе самок крыс вводили в эквивалентном объеме водный раствор вспомогательных веществ тестируемой вакцины.

В течение периода введения и беременности ежедневно проводили учет общего клинического состояния животных. Динамику массы тела в период введения и беременности регистрировали каждую неделю. Ежедневно визуально оценивали потребление корма и воды животными.

После 4-кратного курса введения к иммунизированным самкам ежедневно в течение двух эстральных циклов (10 дней) подсаживали интактных самцов для группового спаривания произвольным выбором в соотношении 1 : 2. Факт спаривания определяли по наличию сперматозоидов в утренних нативных вагинальных мазках или при обнаружении копулятивной пробки.

Бóльшая часть самок из обеих групп подвергалась некропсии на 20-й день беременности с определением показателей гестации. Животных выводили из эксперимента цервикальной дислокацией на фоне общей анестезии ингаляцией углекислого газа с подачей последнего в камеру для эвтаназии в объеме 20 % от объема камеры в минуту. У самок подсчитывали число мест имплантации в матке, количество желтых тел в яичниках, ранних и поздних резорбций, количество живых и мертвых плодов (в расчете на одну самку). Матки без видимых имплантаций обрабатывали раствором сульфида аммония для установления возможных видимых мест имплантаций [22]. На основании полученных данных проводили расчет показателей пред- и постимплантационной смертности потомства [17].

Плоды извлекали, проводили внешний осмотр, проверяли на жизнеспособность и аномалии, регистрировали краниокаудальный размер и массу. Часть плодов фиксировали в 96 % спирте и окрашивали по методу Доусона с целью оценки развития скелета и костной системы (в модификации А.П. Дыбана) [23], а часть - помещали в жидкость Буэна для фиксации и последующего изучения состояния внутренних органов по методу Вильсона [24, 25]. Исследования возможных патологий скелета и внутренних органов плодов проводили с помощью бинокулярного микроскопа Olympus SZ2-ST (Япония) с окулярами 10× и объективом с переменным увеличением 0,8-4.

На 20-й день беременности по 10 самок из каждой группы, отсаженных на роды, снова иммунизировали вакциной с последующей регистрацией продолжительности и характера родов. После рождения регистрировали количество живых и мертвых крысят при рождении, количество самок и самцов в помете, внешние отклонения или уродства у крысят.

С 4-го дня после родов в процессе развития потомства определяли следующие параметры: выживаемость, массу тела, отмечали сроки отлипания ушной раковины, появления первичного шерстного покрова, прорезывания зубов, открытия глаз, опускания семенников, открытия влагалища. Кроме того, проводили изучение скорости созревания сенсорно-двигательных рефлексов в период вскармливания. За единицу наблюдения принимался помет от каждой самки. В возрасте 40-44 дней развития потомства из каждой группы было отобрано по 6 крысят каждого пола, у которых проводилась оценка двигательной и ориентировочно-исследовательской активности в тесте "Открытое поле".

По окончании экспериментов по результатам регистрации факта наличия беременности при некропсии и учета родов, вычисляли индексы, характеризующие генеративную функцию животных: плодовитости, фертильности и беременности [26].

Статистический анализ данных. Для количественных данных вычисляли средние значения (М) и среднее квадратическое отклонение (SD). Для оценки межгрупповых различий использовался критерий Манна-Уитни и угловое преобразование Фишера [27] при уровне доверительной вероятности 95 % при p ≤ 0,05 в программе Statistica v.10.0 (StatSoft, США).

Результаты

В течение всего периода введения и на протяжении беременности у крыс подопытной и контрольной групп клиническое состояние и поведенческие реакции соответствовали видовым нормам, случаев прерывания беременности не было. Во время курса введения аллерговакцины и в течение всего периода беременности масса тела животных имела положительную динамику без значимых межгрупповых различий.

При проведении некропсии животных обеих групп никаких патологических изменений не выявлено. Матку извлекали из брюшной полости, рассекали оболочку, освобождая плод, и регистрировали показатели гестации. Результаты оценки эмбриотоксического действия в опытной и контрольной группах приведены в табл. 1. При окрашивании сульфидом аммония маток крыс, у которых при вскрытии не выявлено плодов или различимых мест имплантации, не обнаружено ранних резорбций.

Исходя из данных табл. 1, значения показателей количества желтых тел, мест имплантации, живых плодов в расчете на одну самку в обеих группах крыс не имели статистически значимых различий. В одном помете в контрольной группе был обнаружен один мертвый плод, а в группе самок, получавших аллерговакцину, обнаружена одна поздняя резорбция. Следует отметить, что частота резорбции не выходила за рамки нормальных показателей у беспородных крыс [28]. При оценке показателей массы тела и краниокаудального размера плодов никаких межгрупповых различий не выявлено. В потомстве соотношение самцов и самок в подопытной и в контрольной группах статистически не различалось.

При изучении развития костной системы у потомства крыс в подопытной и контрольной группах было отмечено анатомически правильное строение и расположение костей скелета с высокой степенью оссификации всех его отделов. Обнаруженные случаи неполной оссификации отдельных сегментов грудины и подъязычной кости имели примерно одинаковую частоту встречаемости как в подопытной, так и в контрольной группах. При изучении состояния внутренних органов методом серийных срезов все исследованные плоды обеих групп крыс имели морфологические признаки завершенного органогенеза. У отдельных плодов были установлены несущественные единичные изменения, встречавшиеся с одинаковой частотой в подопытной и в контрольной группах.

Самки крыс, получившие последнюю инъекцию вакцины и носителя на 20-й день беременности и оставленные для рождения потомства, родили во всех случаях (10 из 10 в каждой группе). При этом не отмечено случаев патологических родов или мертворождения. Продолжительность беременности, среднее количество потомства и соотношение количества самцов и самок в помете в обеих группах значимо не отличались. Все плоды были доношены, не отличались по размерам в потомстве контрольных крыс и не имели аномалий и пороков развития. После рождения ежедневно проводили наблюдения за физическим развитием потомства. В течение периода вскармливания до отъема сохранность потомства составила 100 %. Масса тела пометов в период вскармливания и до отъема не отличалась в потомстве крыс, получавших вакцину, по сравнению с потомством крыс, получавших носитель.

Внутри групп, а также отдельных пометов сколько-нибудь значимых различий в физическом развитии потомства не наблюдалось, все зарегистрированные показатели крысят находились в рамках видовой нормы [28, 29]. Результаты определения параметров физического развития потомства представлены в табл. 2.

Скорость созревания рефлексов и формирования реакций на отдельные стимулы у крысят, чьи матери получали вакцину, не отличалась от таковой в контрольной группе и соответствовала нормальным видовым показателям [29].

Анализ двигательной активности и ориентировочно-исследовательского поведения потомства самок крыс, получавших вакцину и носитель в тесте "Открытое поле" не выявил статистически значимых межгрупповых различий (табл. 3).

По результатам проведенных экспериментов был проведен расчет ряда основных индексов, характеризующих генеративную функцию животных (табл. 4). Полученные значения индексов фертильности, плодовитости и беременности в подопытной группе крыс значимо не отличались от индексов контрольной группы.

Обсуждение

В данном исследовании было изучено потенциальное влияние новой рекомбинантной аллерговакцины ABP-Vax для лечения и профилактики аллергии на пыльцу березы и перекрестной пищевой аллергии на генеративную функцию беспородных белых самок крыс, а также пре- и постнатальное развитие потомства самок, иммунизированных вакциной до спаривания и во время беременности. Крыса как тест-система в исследовании репродуктивной токсичности является оптимальным выбором ввиду хорошей воспроизводимости модели развития потомства, а также низкого уровня спонтанных аномалий и пороков развития.

В исследовании акцент сделан на дробном воздействии постоянной дозы вакцины (предполагаемая доза для человека составляет 80 мкг по белку) на организм самок крыс через равные временные промежутки, начальные точки которых соответствуют наиболее важным периодам пренатального и постнатального развития потомства. При этом воздействие вакцины ABP-Vax на подопытных животных начинали в период до спаривания, чтобы обеспечить нарастание ответной иммунной реакции к моменту спаривания крыс и ее поддержание в указанные выше периоды развития потомства [30]. Таким образом, приводимые результаты охватывают период от зачатия до достижения потомством половой зрелости при многократных иммунизациях материнского поколения вакциной ABP-Vax.

На основании проведенных экспериментов можно заключить, что 5-кратное подкожное введение аллерговакцины ABP-Vax материнскому поколению в период до спаривания и во время беременности хорошо переносилось крысами, не вызывая изменения общего клинического состояния, поведенческие реакции соответствовали видовой норме, масса тела животных до спаривания и во время беременности имела положительную динамику без межгрупповых различий. Кроме того, в течение всего периода беременности у подопытных и контрольных крыс не отмечено случаев спонтанного прерывания беременности, показатели эмбриотоксического действия в пренатальный период также значимо не отличались.

Обнаруженные случаи отсутствия отдельных центров оссификации у плодов обеих групп были немногочисленными, при этом данный показатель у плодов подопытной и контрольной групп соответствовал нормальным значениям для 20-го дня беременности крыс, средняя продолжительность которой составляет 23 дня, именно в последнем периоде до родов завершается процесс оссификации скелета плодов [31].

При изучении аномалий развития и патологии органов плодов, их немногочисленность, а также то, что повреждения обнаруживали лишь в отдельных пометах как в подопытной, так и в контрольной группах, свидетельствует об отсутствии связи описанных изменений с действием вакцины.

Самки подопытной и контрольной групп, оставленные для рождения потомства, родили во всех случаях. При клиническом наблюдении за материнским поколением не отмечено нарушений материнского поведения в предшествующий родам период и весь период вскармливания потомства. Роды самок, получавших аллерговакцину, не отличались по характеру и продолжительности от родов контрольных животных, преждевременных родов не отмечено. Оценка постнатального развития потомства не выявила нарушений показателей физического развития, сроков созревания сенсорно-двигательных рефлексов и уровня исследовательской и двигательной активности у подопытных и контрольных животных. У крысят внутри отдельных пометов сроки созревания физических параметров развития, рефлексов и реакций были маловариабельны, а сами рефлексы и реакции хорошо выраженными при их установлении.

Показатели генеративной функции самок, такие как индексы фертильности, плодовитости и беременности, в подопытной группе крыс значимо не отличались от индексов контрольной группы и соответствовали нормальному уровню [28].

Предполагаемый курс применения вакцины, необходимый для достижения устойчивого результата при профилактике и терапии, составляет дробное многократное введение через равные промежутки времени. Данная особенность, а также необходимость применения аллерговакцины у пациентов репродуктивного возраста обусловливают важность тщательного исследования безопасности такой терапии в отношении репродуктивной функции и развития потомства. Наблюдаемые в нашем исследовании полная сохранность фертильности материнского поколения, нормальное развитие эмбриона, плода и рожденного потомства на фоне многократной вакцинации самок крыс вакциной ABP-Vax свидетельствует об отсутствии влияния данной вакцины на репродуктивную функцию животных. Эти данные представляют важную информацию о безопасности, необходимую для планирования клинических исследований.

Заключение

В результате проведенного исследования не выявлено влияния аллерговакцины ABP-Vax на генеративную функцию самок крыс, а также никаких признаков неблагоприятного воздействия вакцины ABP-Vax или связанного с ней иммунного ответа на рост и развитие потомства в эмбриофетальном и постнатальном периоде развития потомства.

Таким образом, исследование репродуктивной токсичности разработанной аллерговакцины подтверждает наше предположение о возможности ее применения в период беременности и лактации. Однако для окончательного подтверждения этих выводов потребуются клинические исследования.

Литература

1. Шиловский И.П., Барвинская Е.Д., Каганова М.М., Ковчина В.И., Юмашев К.В., Корнеев А.В., Никольский А.А., Вишнякова Л.И., Брылина В.Е., Русак Т.Е., Курбачева О.М., Дынева М.Е., Петухова О.А., Гудима Г.О., Кудлай Д.А., Хаитов М.Р. Модель аллергического ринита у мышей, имитирующая основные проявления патологии человека. Иммунология. 2022; 43 (6): 654-72. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2022-43-6-654-672

2. Dierick B.J.H., van der Molen T., Flokstra-de Blok B.M.J., Muraro A., Postma M.J., Kocks J.W.H., van Boven J.F.M. Burden and socioeconomics of asthma, allergic rhinitis, atopic dermatitis and food allergy. Expert Rev. Pharmacoecon Outcomes Res. 2020; 20 (5): 437-53. DOI: https://doi.org/10.1080/14737167.2020.1819793

3. Akdis C.A., Agache I. Global Atlas of Allergy. EAACI. 2014. URL: http://hub.eaaci.org/education_books/global-atlas-of-allergy/

4. Астафьева Н.Г., Баранов А.А., Вишнева Е.А., Дайхес Н.А., Жестков А.В., Ильина Н.И., Карнеева О.В., Карпова Е.П., Ким И.А., Крюков А.И., Курбачева О.М., Мешкова Р.Я., Намазова-Баранова Л.С., Ненашева Н.М., Новик Г.А., Носуля Е.В., Павлова К.С., Пампура А.Н., Свистушкин В.М., Селимзянова Л.Р., Хаитов М.Р., Хаитов Р.М. Аллергический ринит. Российский аллергологический журнал. 2022; 19 (1): 100-41. DOI: https://doi.org/10.36691/RJA1524

5.Elisyutina O., Lupinek C., Fedenko E., Litovkina A., Smolnikov E., Ilina N., Kudlay D., Shilovskiy I., Valenta R., Khaitov M. IgE-reactivity profiles to allergen molecules in Russian children with and without symptoms of allergy revealed by micro-array analysis. Pediatr. Allergy Immunol. 2021; 32 (2): 251-63. DOI: https://doi.org/10.1111/pai.13354

6.Elisyutina O., Fedenko E., Campana R., Litovkina A., Ilina N., Kudlay D., Egorenkov E., Smirnov V., Valenta R., Lupinek C., Khaitov M. Bet v 1-specific IgE levels and PR-10 reactivity discriminate silent sensitization from phenotypes of birch allergy. Allergy. 2019; 74 (12): 2525-8. DOI: https://doi.org/10.1111/all.13931

7.Pipet A., Botturi K., Pinot D., Vervloet D., Magnan A. Allergen-specific immunotherapy in allergic rhinitis and asthma. Mechanisms and proof of efficacy. Respir. Med. 2009; 103: 800-12. DOI: https://www.doi.org/10.1016/j.rmed.2009.01.008

8.Khinchi M.S., Poulsen L.K., Carat F., André C., Hansen A.B., Malling H.J. Clinical efficacy of sublingual and subcutaneous birch pollen allergen-specific immunotherapy: a randomized, placebo-controlled, double-blind, double-dummy study. Allergy. 2004; 59 (1): 45-53. DOI: https://doi.org/10.1046/j.1398-9995.2003.00387.x

9. Бабахин А.А. Шиловский И.П., Андреев И.В., Козмин Л.Д., Ходаковский И.П., Мартынов А.И., Хаитов М.Р. и др. Экспериментальная аллергенспецифическая иммунотерапия аллерговакциной "Тимпол" на модели IgE-зависимой бронхиальной астмы у мышей. Иммунология. 2012; 33 (3): 134-41.

10. Winther L., Arnved J., Malling H.J., Nolte H., Mosbech H. Side-effects of allergen-specific immunotherapy. A prospective multi-centre study. Clin. Exp. Allergy. 2006; 36 (3): 254-60. DOI: https://www.doi.org/10.1111/j.1365-2222.2006.02340.x

11. Dorofeeva Y., Shilovskiy I., Tulaeva I., Focke-Tejkl M., Flicker S., Kudlay D., Khaitov M., Karsonova A., Riabova K., Karaulov A., Khanferyan R., Pickl W.F., Wekerle T., Valenta R. Past, present, and future of allergen immunotherapy vaccines. Allergy. 2021; 76 (1): 131-49. DOI: https://doi.org/10.1111/all.14300

12. Елисютина О.Г., Шершакова Н.Н., Смирнов В.В., Шиловский И.П., Корнеев А.В., Порошина А.С., Смольников Е.В., Литовкина А.О., Феденко Е.С., Кудлай Д.А., Валента Р., Хаитов М.Р. Новые подходы к аллерген-специфической иммунотерапии (АСИТ): разработка рекомбинантной вакцины от аллергии на пыльцу березы. Иммунология. 2022; 43 (6): 621-631. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2021-42-6-621-631

13. Khaitov M., Shilovskiy I., Valenta R., Weber M., Korneev A., Tulaeva I., Gattinger P., Hage M., Hofer G., Konradsen J., Keller W., Akinfenwa O., Poroshina A., Ilina N., Fedenko E., Elisyutina O.G., Litovkina A., Smolnikov E.V., Nikonova A., Rybalkin S., Aldobaev V., Smirnov V., Shershakova N., Petukhova O., Kudlay D., Shatilov A., Timofeeva A., Campana R., Rabdano S., Trukhin V., Udin S., Skvortsova V. Recombinant PreS-fusion protein vaccine for birch pollen and apple allergy. Authorea Preprints; 2023. DOI: https://doi.org/10.22541/au.168205504.41863157/v1

14. Brazhnikov G., Smolnikov E., Litovkina A., Jiang T., Shatilov A., Tulaeva I., Tulaev M., Karaulov A., Poroshina A., Zhernov Y., Focke-Tejkl M., Weber M., Akinfenwa O., Elisyutina O., Andreev S., Shilovskiy I., Shershakova N., Smirnov V., Fedenko E., Lepeshkova T.S., Beltyukov E.C., Naumova V.V., Kundi M., Khaitov M., Wiedermann U., Valenta R., Campana R. Natural human Bet v 1-specific IgG antibodies recognize non-conformational epitopes whereas IgE reacts with conformational epitopes. Allergy. 2023. DOI: https://doi.org/10.1111/all.15865

15. Niederberger V., Neubauer A., Gevaert P., Zidarn M., Worm M., Aberer W., Malling H.J., Pfaar O., Klimek L., Pfützner W., Ring J., Darsow U., Novak N., Gerth van Wijk R., Eckl-Dorna J., Focke-Tejkl M., Weber M., Müller H.H., Klinger J., Stolz F., Breit N., Henning R., Valenta R. Safety and efficacy of immunotherapy with the recombinant B-cell epitope-based grass pollen vaccine BM32. J Allergy Clin Immunol. 2018; 142 (2): 497-509.e9. DOI: https://doi.org/10.1016/j.jaci.2017.09.052

16. Зимина Е.М., Калошин А.А., Михайлова Н.А., Меркушова Е.Д., Ганковская Л.В. Влияние соотношения белка и гидроокиси алюминия на проявление протективных свойств рекомбинантного белка слияния OprF-aTox-OprI Pseudomonas aeruginosa и экспрессию генов молекул врожденного иммунитета. Иммунология. 2021; 42 (1): 29-37. DOI: https://doi.org/10.33029/0206-4952-2021-42-1-29-37

17. Дурнев А.Д., Смольникова Н.М., Скосырева А.М., Немова Е.П., Соломина А.С., Шреде О.В., Гуськова Т.А., Верстакова О.Л., Сюбаев Р.Д. Методические рекомендации по изучению репродуктивной токсичности лекарственных средств. В кн.: Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая. Миронов А.Н., Бунатян Н.Д., Васильев А.Н., Верстакова О.Л., Журавлева М.В., Лепахин В.К., Коробов Н.В., Меркулов В.А., Орехов С.Н., СакаеваИ.В., Утешев Д.В., Яворский А.Н., ред. Москва: Гриф и К, 2012. С. 80-93. ISBN 978-5-8125-1466-3

18. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств (Иммунобиологические лекарственные препараты). Часть вторая. Миронов А.Н., Меркулов В.А., Бунатян Н.Д., Бондарев В.П., Борисевич И.В., Журавлева М.В., Мовсесянц А.А., Медуницын Н.В., Горбунов М.А., Озерецковский Н.А., Супотницкий М.В., ред. Москва: Гриф и К, 2012. 536 c. ISBN 978-5-8125-17667-0

19. Европейская Конвенция о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях. Страсбург. 18 марта 1986 г. URL: https://ruslasa.ru/wp-content/uploads/2017/06/Evropejskaya-Konvencziya-ETS123.pdf

20. Руководство по содержанию и использованию лабораторных животных. Восьмое издание, пер. с англ. Белозерцева И.В., Красильщикова М.С. ред. Москва: ИРБИС, 2017. 336 с. ISBN: 978-5-9909917-0-5

21. Barrow P.C. Reproductive toxicity testing for pharmaceuticals under ICH. Reproductive Toxicology, 2009. 28: 172-9. DOI: https://doi.org/10.1016/j.reprotox.2009.03.013

22.Salewski E. Färbemethode zum makroskopischen Nachweis von Implantationsstellen am Uterus der Ratte. Naunyn - Schmiedebergs Arch 247, 367 (1964). DOI: https://doi.org/10.1007/BF02308461

23. Дыбан А.П., Баранов В.С., Акимова И.М. Основные методические подходы к тестированию тератогенной активности химических веществ. Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1970; 59 (10): 89-100.

24. Дыбан А.П., Пучков В.Ф., Чеботарь Н.А. Методические указания по изучению эмбриотоксического действия фармакологических веществ и влияние их на репродуктивную функцию. Москва: Φармакологический комитет, 1986. 21 с.

25. Wilson J.G. Embryological considerations in teratology. In: Teratology: Principles and Techniques. Eds. Wilson J.G., Warkany J. 1965 University of Chicago, Chicago, IL. pp. 251-77. DOI: https://doi.org/10.1111/j.1749-6632.1965.tb12260.x

26. Общая токсикология. Курляндский Б.А., Филов В.А., ред. Москва: Медицина, 2002, 608 с. ISBN: 5-225-04609-6

27. Реброва О.Ю. Статистический анализ медицинских данных. Применение пакета прикладных программ STATISTICA. Москва, Медиасфера, 2002. 312 с. ISBN: 5-89084-013-4

28. Юшков Б.Г., Корнева Е.А., Черешнев В.А. Понятие нормы в физиологии и патологии. Физиологические константы лабораторных животных. Екатеринбург, УрО РАН, 2021. 864 с. ISBN: 978-5-7691-2542-3

29. Физические, биохимические и биометрические показатели нормы экспериментальных животных. Справочник. Макаров В.Г., Макарова М.Н., ред. ООО "Издательство "Лема", Спб, 2013 г. ISBN 978-5-98709-619-2

30.Barrow P.C. Developmental and reproductive toxicity testing of vaccines. J. Pharmacol. Toxicol. Methods. 2012; 65 (2): 58-63. DOI: https://doi.org/10.1016/j.vascn.2011.12.001

31.Aliverti V., Bonanomi L., Giavini E., Leone V.G., Mariani L. The extent of fetal ossification as an index of delayed development in teratogenic studies on the rat. Teratology. 1979; 20 (2): 237-42. DOI: https://doi.org/10.1002/tera.1420200208

Материалы данного сайта распространяются на условиях лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License («Атрибуция - Всемирная»)

Главный редактор
ГЛАВНЫЙ РЕДАКТОР
Хаитов Муса Рахимович

Член-корреспондент РАН, доктор медицинских наук, профессор, директор ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России


Журналы «ГЭОТАР-Медиа»