Фенотипическая и функциональная гетерогенность субпопуляций нейтрофилов в норме и при патологии

• Потапнев Михаил Петрович
• Гущина Л.М.
• Мороз Л.А.

Резюме

Ключевые слова:нейтрофилы; иммунофенотип; субпопуляции; иммуносупрессия; G-MDSC; внеклеточные нейтрофильные ловушки

Введение

Полиморфноядерные нейтрофильные гранулоциты (нейтрофилы) рассматриваются как первый защитный клеточный барьер против инфекций, вызванных бактериями и грибами. Это наиболее многочисленные фагоциты в организме человека, которые быстро мобилизуются из кровотока в инфекционный очаг или место повреждения [1]. Противомикробная активность нейтрофилов значительно выше, чем у макрофагов, она определяется выделением активных форм кислорода (АФК) и азота (NO), антимикробными пептидами, протеазами [2-5]. За последние годы накопились новые данные об участии нейтрофилов в неинфекционном воспалении, их способности к иммуномодуляции, роли в восстановительных процессах заживления тканей после повреждения. Их рассмотрению и посвящен настоящий обзор литературы.

Гомеостаз нейтрофилов и их гетерогенность в норме

Около 60% всех клеток в костном мозге являются предшественниками миелопоэза. Пролиферирующие клетки нейтрофильного ряда включают миелобласты, промиелоциты, миелоциты и составляют около 17% всех клеток костного мозга [6, 7]. В результате созревания в течение 5-6 дней образуются гранулоциты, поступающие в кровоток. Около 50-70% всех лейкоцитов периферической крови составляют гранулоциты, циркулирующие в течение 12-18 ч и составляющие циркулирующий гранулоцитарный пул [1]. Гранулоциты селезенки, печени и других тканей (легких, кожи) составляют пул маргинальных нейтрофилов, которые остаются в тканях в течение 1-2 дней и могут рециркулировать в периферическую кровь, где составляют около 50% всех нейтрофилов. Ежедневно образуется 0,5-1,0 - 10¹¹ клеток [1, 8]. Содержание нейтрофилов в периферической крови - около 4,2 - 10⁹ клеток на литр крови, а их соотношение в периферической крови и костном мозге - 0,26. Время полужизни циркулирующих в периферической крови нейтрофилов составляет 19 ч [7]. Затем нейтрофилы подвергаются спонтанному апоптозу и удаляются макрофагами, в том числе частично путем обратной миграции через дренирующие лимфатические узлы в костный мозг [8, 9]. Считается, что миграция нейтрофилов, фагоцитировавших микробные частицы или продукты собственных разрушенных тканей, из очагов повреждения способствует их заживлению [10]. Отмирание путем апоптоза является основным путем естественной гибели нейтрофилов, которая протекает без воспаления. Нейтрофилы являются популяцией клеток организма человека, наиболее чувствительной к апоптозу. Особенностями апоптоза нейтрофилов являются отсутствие экспресси и антиапоптотических белков Bcl-2, неуточненного каскада каспаз, способности протеиназы 3 из гранул стареющих нейтрофилов прямо активировать каспазу-3 и вызывать апоптоз клеток. Ядерные белки MNDA, PCNA, CDK также участвуют в регуляции апоптоза нейтрофилов. Со своей стороны фагоцитоз апоптотических нейтрофилов макрофагами (эффероцитоз) приводит к снижению и ограничению воспалительного процесса [11, 12]. Нефагоцитированные апоптотические нейтрофилы подвергаются вторичному некрозу, что поддерживает очаг воспаления [10]. Кроме апоптоза, нейтрофилы, например, под действием S. aureus, могут подвергаться RIPK3-зависимому не-кроптозу, но без транслокации MLKL на внешнюю мембрану и без вовлечения RIPK1. Фагоцитоз микробных или других частиц, особенно после взаимодействия с антителами и/или компонентами комплемента, приводит нейтрофилы к апоптозу (фагоцитоз-индуцирован-ной клеточной гибели - phagocytosis induced cell death, PICD). Этот процесс сопровождается высвобождением АФК [1]. Всего известно более 10 механизмов клеточной гибели нейтрофилов, большинство из них напрямую связаны с развитием воспалительной реакции [13]. В процессе старения и клеточной гибели нейтрофилы образуют микрочастицы, содержащие на своей внешней поверхности фосфатидилсерин и взаимодействующий с ним аннексин А1. Этот комплекс имеет потенциальный противовоспалительный эффект за счет индукции (например, хондроцитами) трансформирующего фактора роста в (ТФРР) при полиартрите [14].

С учетом этапов созревания в костном мозге, распределения в периферической крови, органах и тканях организма человека, рециркуляции в периферическую кровь, спонтанного и индуцированного апоптоза, а также активации продуктами нормальной микрофлоры и патологическими продуктами эндогенного или экзогенного происхождения среди нейтрофилов выделяют различные иммунофенотипические субпопуляции клеток (табл. 1). Активация нейтрофилов также приводит к изменению функции и фенотипа нейтрофилов, гиперэкспрессии CD11b уже в течение 5 мин после воздействия бактерий и предшествует миграции нейтрофилов в очаг воспаления [15]. При этом снижается экспрессия CD62L и наблюдается гиперэкспрессия CD66b и CD16 [16].

Фенотипические характеристики субпопуляций нейтрофилов не отражают напрямую их функцию. Субпопуляционный состав нейтрофилов зависит от стадии и активности заболевания, имеет диагностическое значение, может быть объектом терапевтического воздействия у пациентов [10].

"Стареющие" нейтрофилы, морфологически отличающиеся сильно сегментированным ядром, также вносят свой вклад в разнообразие субпопуляций нейтрофилов, циркулирующих в периферической крови [18]. Старение нейтрофилов протекает спонтанно либо под действием микробных продуктов нормальной микрофлоры человека, взаимодействующих с TLR- и CXCR4-рецепторами нейтрофилов [19]. В периферической крови циркулируют нейтрофилы с 3 или 4 сегментами ядра. Для нейтрофилов, покидающих периферическое русло, характерно более высокое (4-5) количество сегментов ядра, ассоциированное с высокой экспрессией молекул адгезии LFA-1, LFA-3, PECAM-1 [20]. "Стареющие" нейтрофилы проявляют (в условиях in vitro) противовоспалительные свойства. При воспалении "стареющие" нейтрофилы проявляют повышенный уровень экспрессии интегринов и образования внеклеточных нейтрофильных ловушек (ВНЛ; neutrophil extracellular traps, NET). Применение антибиотиков в этих условиях снижает уровень "стареющих" нейтрофилов, воспаления, последующей окклюзии сосудов и фиброза [10].

Хорошо известная морфологическая характеристика нейтрофилов - наличие гранул, содержащих биоактивные субстанции различного назначения. Наиболее хорошо известны и выражены при микроскопическом анализе первичные (азурофильные) гранулы, содержащие миелопероксидазу (МПО), азуроцидин, катепсин G, эластазу, лизоцим, дефензины и другие антимикробные пептиды. Они образуются на ранних стадиях мие-лопоэза - в промиелоците. Первичные гранулы преимущественно сливаются с фагосомами, где концентрация антимикробных протеинов после этого может достигать концентрации 500 мг/мл [21]. Остальные гранулы формируются на стадии образования сегментоядерного нейтрофила и преимущественно выделяют свое содержимое наружу. Среди них различают вторичные (специфические) гранулы, которые содержат лактоферрин, кателицидин, цитохром b₅₅₈, тромбоспондин, витронектин, коллагеназу, желатиназу и др.; третичные гранулы содержат цитохром b₅₅₈, желатиназу B, ацетилтрансферазу, ММР9 (matrix metalloproteinase 9) и др., секреторные везикулы (пузырьки), содержащие щелочную фосфатазу, DAF, рецептор к формилпептидам (fPR1), Mac-1, CD16, CXCR2 и др. [9, 22, 23]. Мембраны специфических и третичных гранул играют важную роль в фагоцитозе и внутриклеточном киллинге, так как содержат на своей поверхности много Mac-1 (CD 11b/ CD 18), CD 15, CD66 и другие молекулы адгезии, экспрессирующиеся при активации. Интересно, что высвобождение протеаз из азурофильных гранул вызывает активацию находящихся в неактивированной форме кателицидина, желатиназы и коллагеназ специфических гранул [2-24]. Считается, что пептидазы и ферменты, содержащиеся во вторичных и в третичных гранулах, особенно в секреторных везикулах, играют важную роль в миграции нейтрофилов из кровеносного русла в ткани по направлению к очагу поражения (воспаления) [9]. α-Дефензины вызывают миграцию в очаг поражения Т-клеток и незрелых дендритных клеток (ДК), формирующих антиген-специфический иммунный ответ [24].

Большинство нейтрофилов периферической крови в норме относятся к популяции высокой плотности. Их стандартно получают из периферической крови после осаждения эритроцитов. При патологических состояниях (воспалении, аутоиммунных реакциях, онкологических заболеваниях и реакции "трансплантат против хозяина") и беременности часть нейтрофилов периферической крови выделяются как клетки низкой плотности. Такие нейтрофилы низкой плотности (ННП) располагаются при центрифугировании периферической крови над градиентом плотности 1,110 г/см³, в то время как в норме находятся в осадке при центрифугировании периферической крови на градиенте плотности 1,076 г/см³ [25]. Позднее ННП стали выделять на Histopaque-1119 при 1440 об/мин в течение 30 мин [26] или в градиенте перколла. ННП имеют преимущественно незрелый тип морфологии (палочкоядерные клетки или миелоциты), экспрессируют активационные маркеры CD66b и CD11b, маркеры зрелых нейтрофилов CD16 и CD10, проявляют сниженную фагоцитарную активность и повышенную способность продуцировать цитокины ФНОα, ИЛ-1β, ИНФ-α/β, цитотоксичны в отношении эндотелиальных клеток кровеносных сосудов, склонны к усиленному образованию ВНЛ. Сниженный клиренс ННП в состоянии нетоза, связывание аутоантигенов и аутоантител, индукция провоспалительных цитокинов и тромбоза сосудов, как считается, играет важную роль при системной красной волчанке (СКВ) [9, 26, 27]. Избыточное появление в периферической крови ННП также ассоциировано с прогрессией опухоли [28]. С популяцией ННП в периферической (пуповинной) крови и плаценте связывают повышенную продукцию аргиназы, которая вызывает подавление Т-клеточного иммунитета, в том числе повышение содержания Т-регуляторных (Трег) клеток при успешной беременности. ННП в крови беременных не отличались по маркерам зрелости/дифференцировки, активационного и статуса дегрануляции от нейтрофилов нормальной плотности [8, 29]. Они имеют сниженную фагоцитарную активность, но сохраняют нормальный уровень бактерицидной активности [26]. Иммунофенотип и функциональная активность ННП вариабельны и зависят от патологического процесса, при котором они оцениваются [8, 27]. Количественно ННП оцениваются как процент от фракции мононуклеарных клеток, вместе с которыми они выделяются. При СКВ они составляют около 17% клеток (1,2-54%), в то время как в норме - около 5% [26].

Образование ВНЛ в результате нетоза в настоящее время рассматривают как способность части нейтрофилов (20-25%) высвобождать ДНК, гистоны, ферменты гранул в ответ на контакт с S. aureus или другие активаторы, формировать внутрисосудистую сеть, способную задерживать бактерии, грибы, вирусы и клетки, циркулирующие в кровотоке [1, 4, 9, 22, 24, 30, 31]. Прежде всего отмечают широкую антимикробную защитную функцию нетоза нейтрофилов, которую связывают с участием не менее 24 белков нейтрофилов в образовании и функционировании ВНЛ [9]. Наряду с литической формой нетоза, когда образование ВНЛ сопряжено с разрушением нейтрофила под действием патоген-ассоциированных молекулярных структур (паттернов) (pathogen-associated molecular patterns, PAMPs) рассматривается нелитическая форма, индуцируемая через TLR2/TLR4 или рецепторы комплемента нейтрофилов с участием ядерных или митохондриальных компонентов без разрушения внешних клеточных мембран. В таком случае после формирования ВНЛ нейтрофилы сохраняют жизнеспособность и активность [31]. Пока неясно, с какой субпопуляцией нейтрофилов связана эта форма нетоза в ответ на микробные стимулы.

Для нейтрофилов (как и других клеток) характерно образование микровезикул (размером 50-1000 нм). Они сохраняют основные функции нейтрофилов, включая антибактериальную, противовирусную, противогрибковую. При этом нейтрофильные микровезикулы, в отличие от ВНЛ, обладают выраженной способностью подавлять рост гифов грибов, они цитотоксичны для клеток грибов благодаря взаимодействию молекул CD63 микровезикул (размером <100 нм) с поверхностью клеток грибов и содержанию миелопероксидазы, АФК, неспецифической эстеразы, азуроцидина, катепсина G. Иммуномодулирующее действие микровезикул включает подавление созревания ДК, снижение продукции цитокинов воспаления ИНФ-γ и ФНОα, индукции Тh1. Функциональная активность микровезикул зависит от стимула, индуцирующего нейтрофилы [32, 33].

Антимикробная и цитотоксическая функция нейтрофилов в очаге повреждения (воспаления)

Классической функцией нейтрофилов считается фагоцитоз и внутриклеточный киллинг микроорганизмов. Отсутствие/блокада миграции нейтрофилов из периферической крови в инфекционный очаг приводит к диссеминации инфекционного агента и сепсису [31]. Стратегия антибактериальной активности нейтрофилов базируется на последовательности событий, включающих хемотаксис, фагоцитоз, дегрануляцию нейтрофилов, образовании ВНЛ и микровезикул [22]. Нейтрофилы осуществляют фагоцитоз опсонизированных микробных и других частиц в течение нескольких минут. После фагоцитоза бактерий и грибков нейтрофилы переходят в состояние покоя, граничащее с обратимым апоптозом. Выброс провоспалительных цитокинов ИЛ-1β, ФНОα, ИЛ-6 и других в очаге микробного воспаления приводит к локальному повышению активности нейтрофилов и длительности их выживания в активном состоянии [1, 34]. Внутриклеточный киллинг микроорганизмов происходит по кислород-зависимому и кислород-независимому путям с участием содержимого гранул нейтрофилов [1, 2, 22]. В то же время известно, что ряд бактерий (Streptococcus pyogenes, высоковирулентные штаммы Staphylococcus aureus) и грибов (B. dermatitidis, H. capsulatum) вызывают некроз/ некроптоз нейтрофилов, т.е. их литическую гибель, диссеминацию микроорганизмов, прямое повреждение окружающих тканей [1]. Другая тактика взаимодействия с нейтрофилами у простейших и гельминтов: она часто заключается во внутриклеточном паразитировании и поддержании жизнеспособности нейтрофилов путем подавления их апоптотической гибели. Для таких патогенов из-за значительных размеров предполагается привлечение других механизмов защиты с использование естественных киллерных (ЕК) клеток, тучных клеток, эозинофилов с контактным механизмом защитного действия [1]. Для вирусов характерно инфицирование определенных типов клеток вследствие тропизма инфицирующих агентов. Основной механизм участия нейтрофилов в противовирусной защите - антителозависимая цитотоксичность против вирус-инфицированных клеток (хотя она слабее, чем цитотоксичность, опосредованная макрофагами или НК-клетками). Для части вирусов (герпес-вирусы, вирус Западного Нила) показана возможность репликации в нейтрофилах. При этом они включают антиапоптотические механизмы, предотвращающие гибель нейтрофилов. ВИЧ способен инфицировать нейтрофилы через рецепторы (CD4, CCR5, TLR 7/8) или при фагоцитозе вирусных частиц в комплексе с белками крови. При ВИЧ-инфекции наблюдаются нейтропения, ослабленный апоптоз и усиленный некроз нейтрофилов, ослабление их антимикробной функции, что способствует появлению оппортунистических инфекций. α-Дефензины нейтрофилов, оказывая мягкое противовоспалительное действие, способствуют хроническому течению ВИЧ-инфекции [35]. Формирование ВНЛ рассматривают как одну из стратегий антимикробной защиты, когда сеть гистоноподобных белков, ДНК, наличие миелопероксидазы и альфа-дефензинов оказывает губительное действие на бактерии, грибы, вирусы [1, 35]. В то же время известно, что P. aeruginosa устойчива к киллингу в ВНЛ, а формируемые с участием ВНЛ очаги фиброза в легких выступают как резервуар выживших бактерий [36]. Независимо от причины и исхода воспаления, высвобождение нейтрофилами содержимого гранул, лизис клеток, образование ВНЛ оказывает повреждающее действие на окружающие ткани пациента [1].

В очаге воспаления и/или повреждения тканей наряду с факторами микроорганизмов (PAMPs) появляется множество молекулярных структур, связанных с повреждением тканей (damage-associated molecular patterns, DAMPs), которые распознаются нейтрофилами и определяют их миграцию и функциональную активность [37-39]. Компоненты клеточной стенки микроорганизмов и токсины выступают не только в качестве PAMPs, активирующих иммуновоспалительный ответ организма хозяина, но и как прямые агенты повреждения тканей. Продукты повреждения тканей человека включают ядерные белки HMGB1 и ДНК, митохондриальные формил-пептиды, цитоплазматические белки теплового шока, кальпротектин и другие молекулы, выступающие как активаторы иммуновоспалительного ответа нейтрофилов. Одновременно в процессе некроза/ некроптоза нейтрофилы сами выступают как источник DAMPs [4, 37, 40]. В самом очаге повреждения выделение нейтрофилами ферментов, цитокинов и других растворимых субстанций сопровождается подавлением подвижности клеток [41]. Вовлечение нейтрофилов и выброс ими в очаге поражения содержимого гранул в результате дегрануляции, а также образования ВНЛ формирует локальную литическую реакцию с высокой концентрацией повреждающих факторов, АФК, ферментов, цитокинов, гистонов. Это приводит к гибели микроорганизмов (в случае инфекционного воспаления) и повреждению тканей (в случае инфекционного и стерильного воспаления) [42]. Значимые размеры локального повреждения и/или ВНЛ, содержащие в значительном количестве высокотоксичные катионные гистоны, могут быть причиной сепсиса. Гистоны и другие поликатионы, выделяемые некротизированной тканью и нейтрофилами, обнаруживают в периферической крови при заболеваниях сердца, почек, печени, легких, поджелудочной железы [38, 43]. Существует прямая корреляция уровней образования ВНЛ, С-реактивного белка, уровня фибриногена, что указывает на связь образования ВНЛ с системным коагуляционным и воспалительным ответом [44].

Секреция цитокинов нейтрофилами

В процессе межклеточной кооперации в очаге повреждения существенную роль играют цитокины. Под действием индукторов воспаления и цитокинов формируется пул отвечающих клеток и прогноз воспаления. Как при микробном, так и при стерильном воспалении нейтрофилы активно вовлекаются в локальной процесс продукции цитокинов. В очаге поражения концентрация провоспалительных цитокинов ИЛ-1β, ФНОα, ИЛ-6, ИЛ-12, ИЛ-17А, гранулоцитарного колониестимулирующего фактора (Г-КСФ) нейтрофильного происхождения может достигать значительных величин [4, 24, 34]. По количеству генерируемых цитокинов и мРНК цитокинов нейтрофилы в десятки раз уступают другим лейкоцитам, но большое количество мигрирующих в очаг поражения нейтрофилов создает локально высокую концентрацию цитокинов. Секретируемые нейтрофилами цитокины выступают как аутокринные факторы, поддерживающие длительную жизнеспособность фагоцитирующих клеток. В то же время продукция нейтрофилами ИЛ-6 и ИЛ-17А остается под вопросом, и предположительно она связана с моноцитами, мигрирующими в очаг поражения вслед за нейтрофилами [45]. Выделяемые нейтрофилами под действием микроорганизмов M. tuberculosis, Candida albicans хемокины (CXCL1/GRO-α, CXCL8/ИЛ-8) привлекают в очаг воспаления новые нейтрофилы. Под действием ИНФ-γ в комбинации с бактериальным липополисахаридом (ЛПС) или ФНОα нейтрофилы выделяют CXCL9/MIG и CXCL10/IP-10, вызывающие хемотаксис Thl-клеток, что важно для формирования Т-клеточного иммунного ответа. Активированные нейтрофилы могут выделять CCL2/MCP-1 и CCL20/MIP-3α, которые вызывают миграцию в очаг поражения ТЫ7-клеток, определяющих защиту от внеклеточных патогенов [46]. ТЫ7-клетки также участвуют в хронических воспалительных и аутоиммунных процессах. Так, в патогенезе болезни Лайма суставы сначала инфильтрируются нейтрофилами, а затем Th1- и Тh17-клетками [47]. Высокий уровень секретируемого нейтрофилами ИЛ-8 и миграция Th17-клеток ассоциируется с прогрессией ВИЧ-инфекции в СПИД [35]. Нейтрофилы, инфицированные R5-вирусом иммунодефицита человека (ВИЧ), выделяют CCL2/MCP-1 и ИЛ-10, способствуя прогрессии заболевания. Гли-цирризин (glycyrrhizin), обладающий противовирусной активностью, активно подавляет продукцию нейтрофилами обоих цитокинов. При контакте с тканью роговицы, инфицированной герпес-вирусом (HSV-1), нейтрофилы выделяет CXCL9/MIG, привлекающий CD4⁺-Th1-клетки с противовирусной активностью [46].

За последние годы выделяемые нейтрофилами цитокины связывают не только с их участием в воспалительной реакции (ИЛ-1α, ИЛ-1β, ФНОα, СХСL8/ИЛ-8, CXCL1/GRO-α, CXCL10/IP-10, CCL2/MCP-1, CCL3/MIP-1α, CCL4/MIP-1β), но также с участием в кроветворении (Г-КСФ), ангиогенезе (VEGF, FGF2, HGF), заживлении ран, аутоиммунных и опухолевых заболеваниях [45]. При аутоиммунной патологии (ревматоидный артрит, РА) или онкологических заболеваниях (солидные опухоли, В-клеточная MALT-лимфома) нейтрофилы выделяют цитокины BAFF и APRIL, вызывающие длительную выживаемость и пролиферацию нормальных и опухолевых В-клеток [4]. Выделение BAFF, APRIL, CXCL12/SDF-1, а также CD40L более характерно для нейтрофилов (N_BH), локализующихся в маргинальной зоне селезенки и обладающих Т-независимой В-хелперной функцией [48, 49]. Такие N_BH также обладают повышенной способностью образовывать ВНЛ.

Иммуномодулирующее действие нейтрофилов

Гетерогенность нейтрофилов определяется прежде всего их функцией, которая становится более разнообразной при патологических состояниях. Провоспалительные нейтрофилы (N1) низкой плотности часто выявляются в периферической крови пациентов с СКВ, РА, псориазом, хронической гранулематозной болезнью, васкулитом. Иммунофенотипически такие нейтрофилы при СКВ рассматриваются как преимущественно незрелые [26], но они также могут быть описаны и как активированные зрелые клетки (CD10⁺CD11c^lowCD14^lowCD15^highCD16^high). Иммуносупрессорные нейтрофилы (N2) низкой плотности, более известные как гранулоцитарные миелоидные супрессорные клетки (granulocytic myeloid-derived suppressor cells, G-MDSCs) часто выявляют в периферической крови пациентов с онкологическими заболеваниями, при остром и хроническом воспалении, травме, инфекции, сепсисе, реакции "трансплантат против хозяина", а также при беременности. G-MDSCs выявляются в периферической крови доноров гемопоэтических стволовых клеток, мобилизованных Г-КСФ и описываются как SSC^highCD33^int/dimCD14^lowCD15^highCD16⁺CD33⁺CD66b⁺CD114⁺HLA-DR^- и схожи с фенотипом нормальных зрелых нейтрофилов [50]. Такие нейтрофилы с иммуносупрессорными свойствами проявляют иммунофенотипические признаки активированных зрелых клеток (за счет повышенной экспрессии CD66b, CD11b, сниженной экспрессия CD 16, CD62L). Одновременно они могут иметь общие маркеры с дегранулированными нейтрофилами (повышенная экспрессия CD63-антигена внутриклеточных гранул) или незрелыми нейтрофилами, экспрессируют ингибиторные молекулы PD-L1, с помощью которых подавляют функция CD8⁺-Т-клеток [51]. Эти клетки появляются одновременно с Трег-клетками и поддерживают их иммуносупрессорный статус [8, 51].

Иммуносупрессорные нейтрофилы (G-MDSCs) выявлены в периферической крови при беременности и у новорожденных, при сепсисе и у пациентов с онкологическими заболеваниями [28, 29, 51, 52]. Иммуносупрессорные свойства нейтрофилов проявляются после активации Г-КСФ, ИНФ-γ, при прямом контакте с мезенхимальными стволовыми клетками или с опухолевыми клетками [48]. В организме человека популяцию иммуносупрессорных нейтрофилов выявляют в селезенке, плаценте, легких. G-MDSCs, включающие зрелые и незрелые нейтрофилы, имеют иммунофенотип CD14^-CD11b⁺CD15⁺(CD66b⁺), а экспрессия CD 13 ассоциируется с более высокой иммуносупрессией Т-клеток и худшим прогнозом для пациентов с онкологическими заболеваниями [53]. Предполагают, что возможным маркером таких G-MDSCs у пациентов с онкологическими заболеваниями может быть рецептор окисленного липопротеина низкой плотности (oxidized low density lipoprotein receptor 1, LOX-1) [54]. По данным других авторов, G-MDSCs - это CD16^highCD62L^low-зрелые нейтрофилы с гиперсегментированным ядром, экспрессирующие интегрин Mac-1, которые после стимуляции ЛПС проявляют выраженное супрессорное действием в отношении Т-клеток [55]. Индукция G-MDSCs в костном мозге и их миграция в периферическую кровь наблюдается под действием MAMPs (микробных молекулярных структур /microbe-associated molecular patterns), PAMPs, DAMPs, цитокинов (ИНФ-γ, ИЛ-1β, ИЛ-4, ИЛ-7, ИЛ-10, ИЛ-13, ФНОα, CXCL3/GRO-γ), белков острой фазы (α₂-макроглобулин, сывороточный амилоид А). G-MDSCs оказывают иммуносупрессорное действие путем деградации L-аргинина [необходим для синтеза CD3ζ-цепи (CD247) Т-клеточного рецептора и активности ЕК-клеток], продукции АФК и активных форм азота, выделения иммуносупрессивных цитокинов ИЛ-10 и трансформирующего фактора роста β (ТРФβ), активации Т-регуляторных клеток (Трег) [52]. Высокий уровень G-MDSCs (CD14^-CD15⁺-ННП) - до 36% всех лейкоцитов периферической крови - выявляется у пациентов отделений интенсивной терапии и реанимации крупных больниц и является предшественником нозокомиальных инфекций, ассоциируется с неблагоприятным клиническим статусом и прогнозом [56]. Есть предположение, что высокий уровень G-MDSCs в периферической крови чаще встречается при инфекции грам-положительными бактериями, а МMDSCs - при инфекции грам-отрицательными бактериями (М - макрофагальные) [52]. Считается, что субпопуляция G-MDSC-нейтрофилов вносит свой вклад в прогрессию ВИЧ-инфекции [35].

У доноров гранулоцитов после стимуляции Г-КСФ в периферической крови появляются CD10⁺-популяции зрелых нейтрофилов низкой плотности и высокой плотности, которые способны подавлять Т-клеточный иммунный ответ. Популяция CD10^--незрелых нейтрофилов, наоборот, стимулирует пролиферацию и продукцию цитокинов Т-лимфоцитами человека [57].

Новым за последнее десятилетие стало выявление атипичной антиген-презентирующей функции нейтрофилов, а также иммуномодулирующего действия нейтрофилов в отношении ДК, естественных киллерных клеток (ЕК), В- и Т-лимфоцитов. Нейтрофилы не экспрессируют HLA класса II и костимулирующие молекулы CD80, CD86, CD83, CD40 на внешней поверхности. При активации цитокинами ИФН-γ, Г-КСФ, фагоцитозе опсонизированных эритроцитов; при инфекциях, аутоиммунных заболеваниях (РА, гранулематоз Вегенера) нейтрофилы приобретают функцию антиген-презентации антиген-специфическим Т-лимфоцитам (как CD4⁺-Т-лимфоцитам, так и CD8⁺-Т-лимфоцитам), хотя и в меньшей степени по сравнению с макрофагами [58, 59]. Для этого достаточно наличие антигена и антигенспецифических Т-лимфоцитов. Такая антиген-презентация касается Т-клеток памяти, но не наивных Т-клеток. Процесс антиген-презентации происходит в региональных лимфоузлах, куда нейтрофилы попадают из очагов воспаления при РА, гранулематозе Вегенера, сепсисе, раке [58]. Хорошо известна способность нейтрофилов, активированных в очагах воспаления, вызывать созревание ДК из моноцитов крови, которые, в свою очередь, способствуют пролиферации Т-лимфоцитов и их дифференцировке в Th1-клетки [4, 59]. Этому способствуют ФНОα и другие цитокины, локально выделяемые активированными нейтрофилами. Некроптоз нейтрофилов и образование ВНЛ вызывают поляризацию Th1-клеток, в то время как апоптотические нейтрофилы, ННП и G-MDSCs, наоборот, способствуют образованию Th2-клеток и Трег-клеток [48]. Важное значение для созревания ДК и Thl-клеток имеют лактоферин, кателицидин LL-37 вторичных гранул нейтрофилов. Наоборот, а-дефензины, эластаза и миелопероксидаза первичных гранул нейтрофилов при дегрануляции (и высвобождении из некротизированных клеток) обладают противовоспалительными действием, подавляют созревание ДК, продукцию ИЛ-1βмакрофагами [24]. Прямое взаимодействие с нейтрофилами приводит к удлинению сроков жизни ДК [35].

Нейтрофилы прямо или вместе с ДК (субпопуляцией SLAN⁺-ДК) влияют на ЕК-клетки, не изменяя их цитотоксическую активность, но усиливая продукцию цитокинов ИФН-γ, Г-КСФ [4]. Это имеет патогенетическое значение для поддержания воспалительного процесса в слизистой желудочно-кишечного тракта при болезни Крона и кожи при псориазе и остром фебрильном нейтрофильном дерматозе (синдроме Свита).

Взаимодействие с В-лимфоцитами базируется на секреторной активности нейтрофилов, выделяющих специфические активирующие цитокины BAFF и APRIL, определяющих Т-независимый хелперный эффект нейтрофилов [4, 48, 59]. Такие нейтрофилы, обладающие В-хелперной функцией (B-cell-helper neutrophils, N_BH), как отмечалось выше, обнаруживают в маргинальной зоне селезенки и активируют преимущественно полиреактивные В-клетки, секретируют BAFF, APRIL, CD40L, ИЛ-21, CXCL12/SDF-1, образуют больше ВНЛ. В то же время не выявлено существенного влияния нейтрофилов с В-хелперной функцией на Т-зависимую продукцию антител фолликулярными В-клетками лимфоузлов и селезенки [48].

Взаимодействие нейтрофилов и Т-лимфоцитов также имеет место. Хорошо известна способность нейтрофилов подавлять функции Т-лимфоцитов при прямом контакте, опосредованная молекулами Mac-1 и PD-L1 нейтрофилов. Это вносит существенный вклад в патогенез ВИЧ-инфекции, сепсиса, рака [30]. С другой стороны, нейтрофилы как антиген-представляющие клетки способны инициировать антиген-специфический HLA-II-зависимый ответ CD4⁺-Т-клеток памяти. Иммуносупрессорное действие нейтрофилов при раке, гепатите В, ВИЧ-инфекции/СПИДе, у новорожденных и беременных, при мобилизации гранулоцитов с помощью Г-КСФ у здоровых доноров связано преимущественно с иммуносупрессорными ННП/G-MDSCs. Эти клетки участвуют в поляризации Т-клеточного ответа, вызывая подавление ТЫ-клеток и усиливая противовоспалительный Т-клеточный ответ, определяемый Th2-клетками и Трег. Взаимодействие нейтрофилов с Трег и γδТ-клетками описано как прямое (при межклеточном контакте) или опосредованное выделением содержимого гранул нейтрофилов. Результатом такого взаимодействия может быть стимуляция или подавление функции Т-клеток в зависимости от патологического состояния или условия изучения функций нейтрофилов [24, 48, 59, 60].

Нейтрофилы и развитие инфекционного процесса

Фагоцитоз микробных или других частиц приводит нейтрофилы к апоптозу (phagocytosis-induced cell death, PICD). Такие нейтрофилы удаляются макрофагами в печени, селезенке, костном мозге путем эффероцитоза [1]. Действие нейтрофилов распространяется в отношении как внеклеточных, так и внутриклеточных микроорганизмов. Всего в нейтрофилах описано около 300 ферментных и белковых компонентов (преимущественно содержащихся в гранулах), участвующих в антимикробной защите [22]. Некротизирующие нейтрофилы также биологически активны. Наличие отмирающих клеток (но не выделяемых ими факторов) снижает фагоцитоз микроорганизмов живыми нейтрофилами и макрофагами, что способствует прогрессии инфекционного процесса (вызванного, например, Mycobacterium tuberculosis) [61]. Выделяемые в процессе активации и отмирания клеток из гранул и других субклеточных структур нейтрофилов цитокины, хемокины, DAMPs, металлопротеазы формируют локальный очаг воспаления, способствуя активному удерживанию и перевариванию бактерий, грибов, вирусов [4, 37, 35]. ВНЛ, образующиеся при отмирании нейтрофилов, также проявляют антимикробную активность и сдерживают распространение микроорганизмов [4, 22].

У пациентов с инфекционными заболеваниями стимулирование гемопоэза микробными продуктами и цитокинами приводит к выбросу в периферическую кровь незрелых палочкоядерных нейтрофилов со сниженным уровнем фагоцитоза и образования АФК, определяющих внутриклеточный киллинг патогенных микроорганизмов [1, 2, 22]. При сепсисе выявлено снижение образования ВНЛ, миграции нейтрофилов и замедление процессов апоптоза при исходном его более высоком уровне, что прямо коррелировало с более высокой тяжестью и смертностью пациентов [62]. Нейтрофилы при сепсисе экспрессируют ингибиторные PD-L1 молекулы, вызывающие апоптотическую гибель лимфоцитов при межклеточном контакте [59], а также усиливается образование нейтрофильных микровезикул. При септических состояниях в крови увеличено содержание ННП с иммуносупрессорными характеристиками (G-MDSCs), что коррелирует с ухудшением клинического состояния пациентов с сепсисом [63].

Нейтрофилы и аутоиммунные заболевания

Нейтрофилы активно участвуют в патогенезе аутоиммунных заболеваний. Так, описанная при СКВ субпопуляция ННП после индукции ИФН-α/β выделяет преимущественно провоспалительные цитокины.

ННП подвергаются ускоренной гибели по сравнению с нормальными нейтрофилами. Это сопровождается выбросом молекул DAMPs (ядерной и митохондриальной ДНК, LL-37, HMGB1), распознаваемых провоспалительными рецепторами TLR4 [16]. Нейтрофилы являются также источником цитрулинированных аутоантигенов в суставах и внутренних органах при серопозитивном РА. Взаимодействие DAMPs с аутоантителами, циркулирующими в крови пациентов, приводит к образованию иммунных комплексов, которые захватываются ВНЛ и распознаются плазматическими ДК [10]. Образуемые при гибели нейтрофилов ВНЛ и DAMPs выступают как патогенетические факторы прогрессии артрита [16]. При РА фракция ННП представляют собой незрелые нейтрофилы с удлиненным сроком жизни, низким уровнем образования ВНЛ и сниженным уровнем активации под действием цитокинов [63]. Нейтрофилы синовиальной жидкости пораженных суставов при РА характеризуются повышенной экспрессией HLA класса II, костимулирующих молекул СD80 и СD86 на ранних стадиях заболевания и взаимодействием с Т-лимфоцитами. На поздних стадиях заболевания нейтрофилы локализуются в В-клеточных зонах лимфоузлов, проявляют хелперную функцию в отношении аутореактивных В-лимфоцитов, продуцирующих антинейтрофильные (ANCA) и другие аутоантитела. На этой стадии заболевания нейтрофилы более чувствительны к литическому образованию ВНЛ, которые способны прямо стимулировать В-клетки памяти через TLR9-рецепторы по Т-независимому пути. Усиленное образование ВНЛ стимулирует плазмоцитоидные ДК секретировать ИНФ-α, дополнительно усиливающий нетоз при васкулитах, СКВ, псориазе, сахарном диабете типа 1. Как и при СКВ, при РА в периферической крови увеличивается содержание G-MDSCs, которые вызывают образование Th17-клеток из наивных Т-лимфоцитов [30, 48]. При атеросклерозе эффероцитоз нейтрофилов сопровождается высвобождением ДНК, стимулирующей продукцию макрофагами ИЛ-1β, поддерживающего локальное воспаление [10]. В экспериментальных исследованиях (на мышах) показано, что нейтрофилы регионарных лимфоузлов выделяют противовоспалительный липоксин А₄ (LXA₄), подавляющий воспаление при аутоиммунном синдроме "сухого глаза" [60]. Подавление функции или количества этих нейтрофилов приводит к повышению количества эффекторных провоспалительных Th1- и Th17-клеток, снижению количества Трег лимфоцитов, обострению синдрома "сухого глаза".

Нейтрофилы и опухолевый процесс

Миелоидные клетки, как считается, способствуют опухолевому росту. Один из наиболее широко используемых прогностических признаков в онкологии - соотношение нейтрофилов и лимфоцитов периферической крови. Его значение более 4 достоверно ассоциируется с плохим прогнозоввыживанияпри любыхтипахрака (солидных опухолей) и на любых стадиях заболевания [64]. Нейтрофилы микроокружения опухолевого узла находятся под действием растворимых факторов, продлевающих их жизнь. Опухоль-ассоциированные нейтрофилы (tumor-associated neutrophils, TANs) выступают как популяция нейтрофилов, находящаяся внутри опухолевого узла (интратуморально) или в составе опухолевого микроокружения (перитуморально). TANs играют важную роль в формировании ниши для опухолевых клеток и дальнейшей прогрессии опухоли [65]. Показано, что неблагоприятный прогноз продолжительности жизни пациентов связан с увеличением пула интратумораль-ных нейтрофилов [65, 66]. Хемокины CXCL1, CXCL2, CXCL8/nn-8,CXCL5, CXCL12, CCL2, CCL3/MIP-1α, а также липидные медиаторы (лейкотриен LTB4) способствуют инфильтрации нейтрофилами опухолевых узлов, прежде всего опосредованной CXCR2 рецепторным взаимодействием [65]. На ранних этапах формирования опухоли нейтрофилы и гибридные клетки нейтрофилов и ДК оказывают противоопухолевое действие, реализуемое напрямую или через стимуляцию Т-клеточного звена противоопухолевого иммунитета [30, 65]. В последующем наблюдают поляризацию нейтрофилов с противоопухолевой (N1) и опухоль-стимулирующей (N2) активностью, подтвержденную данными транскриптом, различающих эти субпопуляции нейтрофилов. Nl-нейтрофилы являются гиперсегментированными, CD11b⁺-опухоль-ассоциированными нейтрофилами с повышенными противоопухолевой цитотоксичностью и экспрессией цитокинов воспаления, сниженным уровнем аргиназы. N1-нейтрофилы чувствительны к блокирующему действию TФРβ и зависят от индуцирующего действия ИНФ-β. Противоопухолевое действие N1 нейтрофилов зависит от CD8⁺-Т-лимфоцитов. Большинство TANs относятся к N2-нейтрофилам с опухоль-стимулирующей активностью, повышенным уровнем аргиназы, сниженной продукцией цитокинов воспаления. Они связаны с G-MDSCs и активностью ТФРβ, продуцируемым опухолевыми клетками [4, 8, 28, 67]. N1/N2-поляризация нейтрофилов хорошо доказана у экспериментальных животных (мышей), но не у человека. Для патологии человека более приемлемо разграничение функций, характерное для незрелых нейтрофилов (CD15⁺CD11b⁺CD66b⁺CD14^-CD10^-) с палочковидным ядром в сравнении со зрелыми нейтрофилами (CD15⁺CD11b⁺CD66b⁺CD14^-CD10⁺) с сегментированным ядром, обладающими иммуносупрессорной функцией [28, 51, 65]. TANs обычно ассоциированы с прогрессией опухоли, в том числе за счет выделения ферментов (миелопероксидаза, эластаза, ММР-9) и цитокинов (TGF-β, ИЛ- 8, VEGF, СХС-хемокины). Это связано с Th17-зависимым действием опухоль-ассоциированных субпопуляций нейтрофилов. В целом иммуносупрессорное действие нейтрофилов при раке связано как с популяцией зрелых нейтрофилов нормальной плотности, так преимущественно с имммуносупрессорными ННП/G-MDSCs [48]. Повышенное образование ВНЛ при раке связывают преимущественно с С3а-активированными нейтрофилами. Считается, что образование ВНЛ приводит к формированию гематогенных метастазов рака, а также микроциркуляторных тромбов, приводящих к тромбоэмболическим осложнениям [9, 59]. Кроме того, ВНЛ активируют эндотелиальные клетки сосудов, которые выделяют проангиогенные цитокины, способствующие опухолевому неоангиогенезу [28]. Существует положительная корреляция уровня образования ВНЛ с количеством циркулирующих опухолевых клеток и их жизнеспособностью. При этом ВНЛ рассматривают как элемент воспаления, способствующий опухолевому метастазированию, и являющемуся неблагоприятным прогностическим признаком для онкологического пациента [44].

Нейтрофилы и процессы заживления органов и тканей

Как установлено, нейтрофилы участвуют в процессах заживления очагов поражения (воспаления), репарации органов и тканей. Эту функцию связывают с переключением на поздних этапах воспаления синтеза лейкотриена В4 на синтез липоксина А4, что приводит к прекращению рекрутирования нейтрофилов из кровеносного русла и апоптозу нейтрофилов в местах воспаления [4]. Нейтрофилы, сопровождающие этапы заживления раневых поверхностей, не образуют ВНЛ, в очаге апоптотические клетки доминируют над некротическими. Нейтрофилы, активированные DAMPs, очищают очаг поражения от клеточного дебриса и либо погибают локально в результате апоптоза, либо мигрируют из очага воспаления в кровеносное русло с последующей миграцией в селезенку, печень, костный мозг, где происходит их эффероцитоз [1, 31]. В участках стерильного воспаления печени в результате гипертермического повреждения нейтрофилы участвуют в неоангиогенезе, вызывая образование каналов в местах разрывов кровеносных сосудов. Проангиогенные нейтрофилы характеризуются экспрессией CXCR4, VEGFR1, CD49d, металлопротеазы MMP9 и составляют около 3% циркулирующих в периферической крови нейтрофилов. Проангиогенные нейтрофилы участвуют в ремоделировании внеклеточного матрикса. При инфаркте миокарда в экспериментальных условиях удаление (истощение) нейтрофилов приводит к ухудшению функции миокарда, усиленному образование фиброзных рубцов [68]. При репарации миокарда после перенесенного инфаркта миокарда и инсульта идентифицирована N2-популяция нейтрофилов, несущая маннозный рецептор (маркер М2-макрофагов), способствующая удалению некротических клеток и тканей. Показано, что только при нормальном (но не повышенном) уровне нейтрофилов в крови наблюдается успешное завершение острой фазы инфаркта миокарда и близкое к полноценному восстановление миокарда в области поражения [8, 68]. Одним из новых механизмов подавления воспаления и усиления репаративных процессов рассматривают образование нейтрофилами микровезикул размером 50-1000 нм [10]. Это связывают с наличием на их поверхности фосфатидилсерина, с которым связывается аннексин А1, инициирующий продукцию ТФРβ, проявляющего противовоспалительное и регенеративное действие.

В заключение следует отметить, что нейтрофилы долго рассматривались только как клетки, фагоцитирующие микроорганизмы и обеспечивающие таким образом противоинфекционный иммунитет. В настоящее время функции и субпопуляционный состав нейтрофилов характеризуются большим разнообразием. Нейтрофилы периферической крови в норме являются преимущественно гомогенной популяцией клеток, и только старение выводит их из кровотока. При патологических состояниях нейтрофилы не только мигрируют в очаг поражения/воспаления и погибают там, но частично уходят из него в другие органы и ткани, включая костный мозг. Под действием молекул патогенов (PAMPs) и молекул поврежденных тканей (DAMPs) в процессе активации реализуется фагоцитарная, микробицидная, цитотоксическая, цитокин-секретирующая, антиген-представляющая, иммуномодулирующая, регенеративная функции нейтрофилов [1, 4, 8, 22]. Экстерриториально вне очага поражения формируются G-MDSCs, N1/N2-нейтрофилы, ВНЛ, микровезикулы, которые в норме практически не встречаются [10]. Описанная гетерогенность популяций нейтрофилов в меньшей степени связана с иммунофенотипически различаемыми субпопуляциями нейтрофилов и в большей степени зависит от стадии и активности патологического (заболевание) или физиологического (беременность) состояния организма человека, индуцирующих агентов/стимулов и локализации нейтрофилов (тканевое расположение или периферическая кровь) [32, 51].

Литература

1. Kobayashi S.D., Malachowa N., DeLeo F.R. Influence of microbes on neutrophil life and death. Front. Cell. Infect. Microbiol. 2017; 7: 159. doi: 10.3389/fcimb.2017.00159.

2. Печковский Д.В., Потапнев М.П. Механизмы фагоцитоза и бактерицидности нейтрофилов человека. Здравоохр. Беларуси. 1994; 6: 39-44.

3. Nauseef W.M. How human neutrophils kill and degradate microbes: an integrated view. Immunol. Rev. 2007; 219: 88-102. doi: 10.1111/j.1600-065X.2007.00550.x

4. Mantovani A., Cassatella M.A., Costantini C., Jaillon S. Neutrophils in the activation and regulation of innate and adaptive immunity. Nat. Rev. Immunol. 2011; 11: 519-31. doi: 10.1038/nri3024

5. Матосова Е.В., Андрюков Б.Г. Морфофункциональная характеристика защитных механизмов нейтрофилов при бактериальных инфекциях и их вклад в патогенез провоспалительных реакций. Гематология и трансфузиология. 2017; 62 (4): 223-9. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/morfofunktsionalnaya-harakteristika-zaschitnyh-mehanizmov-neytrofilov-pri-bakterialnyh-infektsiyah-i-ih-vklad-v-patogenez.

6. Elghetany M.T., Ge Y., Patel J. et al. Flow cytometric study of neutrophilic granulopoiesis in normal bone marrow using an expanded panel of antibodies: correlation with morphological assessments. J. Clin. Lab. Anal. 2004; 18 (1): 36-41.

7. Lahoz-Beneytez J., Elemans M., Zhang Y., Ahmed R. et al. Human neutrophil kinetics: modeling of stable isotope labeling data supports short blood neutrophil half-lives. Blood. 2016; 127 (26): 3431-8. doi: 10.1182/blood-2016-03-700336.

8. Deniset J.F., Kubes P. Neutrophil heterogeneity: bona fide subsets or polarization states? J. Leuk. Biol. 2018; 103 (5): 829-38. URL: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/29462505

9. Yang P., Li Y., Xie Y., Liu Y. Different faces for different places: heterogeneity of neutrophil phenotype and function. J. Immunol. Res. 2019; 2019: 8016254. URL: https://doi.org/10.1155/2019/8016254 .

10. Chatfield S.M., Thieblemont N., Witko-Sarsat V. Expanding neutrophil horizonts: new concepts in inflammation. J. Innate Immun. 2018; 10: 422-31. doi: 10.1159/000493101.

11. Liu G., Wang J., Park Y.-J., Tsuruta Y. et al. High mobility group protein-1 inhibits phagocytosis of apoptotic neutrophils through binding to phosphatidylserine. J. Immunol. 2008; 181: 4240-6.

12. Черных Е.Р., Сахно Л.В., Шевела Е.Я., Тихонова М.А. и др. Влияние апоптотических нейтрофилов на продукцию цитокинов и простагландина Е2 М1 макрофагами человека. Иммунология. 2017; 38 (4): 193-8.

13. Плескова С.Н., Крюков Р.Н. Провоспалительные механизмы гибели нейтрофильных гранулоцитов. Цитология. 2019; 61 (5): 357-69.

14. Headland S.E., Jones H.R., Norling I.V. et al. Neutrophil-derived microvesicles enter cartilage and protect the joint in inflammatory arthritis. Sci. Transl. Med. 2015; 7 (315): 315ra190.

15. Qui X., Li J, Yang X. et al. Is neutrophil CD11b a specific marker forth early diagnosis of sepsis in neonates? A systemic review and meta-analysis. BMJ Open. 2019; 9: e025222.

16. Grieshaber-Bouyer R., Nigrovic P.A. Neutrophil heterogeneity as therapeutic opportunity in immune-mediated disease. Front. Immunol. 2019; 10: 346. doi: 10.3389/fimmu.2019.00346.

17. Lakschevitz F.S., Hassanpour S., Rubin A., Fine N. et al. Identification of neutrophil surface marker changes in health and inflammation using high-throughput screening flow cytometry. Exp. Cell Res. 2016; 342 (2): 200-9.

18. Casanova-Acebes M., Pitaval C., Weiss L.A. et al. Rhythmic modulation of the hematopoietic niche through neutrophil clearance. Cell. 2013; 153 (3): 1025-35.

19. Zhang D., Chen G., Manwani D. et al. Neutrophil ageing is regulated by the microbiome. Nature. 2015; 525: 528-32.

20. Кашутин С.Л., Данилов С.И., Верещагина Е.Н., Ключарева С.В. Уровень экспрессии молекул адгезии на нейтрофилах в зависимости от сегментации их ядер. Клин. лаб. диагностика. 2013; 11: 45-7.

21. Reeves E.R., Lu H., Jacobs R.T. et al. Killing activity of neutrophils is mediated through activation of proteases by K+ flux. Nature. 2002; 416 (6878): 291-7.

22. Андрюков Б.Г., Сомова Л.М., Дробот Е.И., Матосова Е.В. Антимикробные стратегии нейтрофилов при инфекционной патологии. Клин. лаб. диагностика. 2016; 61 (12): 825-33.

23. Borregaard N., Cowland J.B. Granules of the human neutrophilic polymorphonuclear leukocyte. Blood. 1997; 89 (10): 3503-21.

24. Minns D., Smith K.J., Findlay E.G. Orchestration of adaptive T cell responses by neutrophil granule contents. Mediators Inflamm. 2019; 2019: 8968943.

25. Hacbarth E., Kajdacsy-Balla A. Low density neutrophils in patients with systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, and acute rheumatic fever. Arthritis Rheum. 1986; 29 (11): 1334-42.

26. Denny M.F., Yalavarthi S., Zhao W. et al. A distinct subset of proinflammatory neutrophils isolated from patients with systemic lupus erythematosus induces vascular damage and synthesizes type I IFNs. J. Immunol. 2010; 184: 3284-97.

27. Carmona-Rivera C., Kaplan M.J. Low density granulocytes: a distinct class of neutrophils in systemic autoimmunity. Semin. Im-munopathol. 2013; 35 (4): 455-63. doi: 10.1007/s00281-013-0375-7.

28. Grecian R., Whyte M.K.B., Walmsley S.R. The role of neutrophils in cancer. Br. Med. Bull. 2018; 128: 5-14. doi: 10.1093/bmb/ldy029.

29. Ssemaganda A., Kindinger L., Bergin P. et al. Characterization of neutrophil subsets in healthy human pregnancies. PLoS One. 2014; 9 (2): e85696. URL: https://doi.org/10.1371/journal.pone.0085696.

30. Voisin M.-B., Nourshargh S. Neutrophil trafficking to lymphoid tissues: physiological and pathological implications. J. Pathol. 2019; 247: 662-71. doi: 10.1002/path.5227.

31. Castanheira F.V.S., Kubes P. Neutrophils and NETS in modulating acute and chronic inflammation. Blood 2019; 133: 217885. doi: 10.1182/blood-2018-11-844530.

32. Miralda I., Uriarte S.M., McLeish K.R. Multiple phenotypic changes define neutrophil priming. Front. Cell. Infect. Microbiol. 2017; 7: 217. doi: 10.3389/fcimb.2017.00217.

33. Shopova I.A., Belyaev I., Dasari P. et al. Human neutrophils produce antifungal extracellular vesicles against Aspergillus fumigatus. BioRxiv. 2019. URL: https://doi.org/10.1101/620294.

34. Потапнев М.П. Цитокиновая сеть нейтрофилов при воспалении. Иммунология. 1995; 4: 34-40.

35. Hensley-McBain T., Klatt N.R. The dual role of neutrophils in HIV infection. Curr. HIV/AIDS Rep. 2018; 15: 1-10. URL: https://link.springer.com/article/10.1007%2Fs11904-018-0370-7

36. Papayannopoulos V. Neutrophil extracellular traps in immunity and disease. Nat. Rev. Immunol. 2018; 18 (2): 134-47.

37. Потапнев М.П. Молекулярные аспекты распознавания в иммунном и воспалительном ответе. Здравоохранение (Минск). 2014; 5: 18-27.

38. Ginsburg I., Korem M., Koren E., Varani J. Pro-inflammatory agents released by pathogens, dying host cells, and neutrophils act syn-ergistically to destroy host tissues: a working hypothesis. J. Inflamm. Res. 2019; 12: 35-47.

39. Watts E.R., Walmsley S.R. Getting DAMP(s) wets the whistle for neutrophil recruitment. Immunity. 2018; 48 (5): 846-8.

40. Zhao Y., Marion T.N., Wang Q. Multifaceted roles of neutrophils in autoimmune diseases. J. Immunol. Res. 2019; 2019: 7896738. URL: https://doi.org/10.1155/2019/7896738.

41. Галкин А.А., Демидова В.С. Нейтрофилы и синдром системного воспалительного ответа. Раны и раневые инфекции. 2015; 2 (2): 25-31. doi: 10.17650/2408-9613-2015-2-2-25-31.

42. Потапнев МП. Иммунные механизмы стерильного воспаления. Иммунология. 2015; 36 (5): 312-8.

43. Potey P., Rossi A.G., Lucas C.D. Dorward D.A. Neutrophils in the initiation and resolution of acute pulmonary inflammation: understanding biological function and therapeutic potential. J. Pathol. 2019; 247: 672-85.

44. Wen L., Guo L., Zhang W., Li Y. et al. Cooperation between the inflammation and coagulation systems promotes the survival of circulating tumor cells in renal cell carcinoma patients. Front. Oncol. 2019; 9: 504. doi: 10.3389/fonc.2019.00504.

45. Tamassia N., Bianchetto-Aguilera F., Arruda-Sylva F. et al. Cytokine production by human neutrophils: revision the "dark side of the moon". Eur. J. Clin. Invest. 2018; 48 (suppl. 2): e12952. doi: 10.1111/eci.12952.

46. Tecchio C., Casatella M.A. Neutrophil-derived chemokines on the road to immunity. Semin. Immunol. 2016; 28: 119-28. doi: 10.1016/j.smim.2016.04.003.

47. Codolo G., Bossi F., Durigutto P. et al. Orchestration ofinflammation and adaptive immunity in Borrelia burgdorferi - induced arthritis by neutrophil-activating protein A. Arthritis Rheum. 2013; 65: 1232-42.

48. Costa S., Bevilacqua D., Cassatella M.A., Scapini P. Recent advances on the crosstalk between neutrophils and B or T lymphocytes. Immunology. 2018; 156: 23-32. doi: 10.1111/imm.13005.

49. Puga I., Cols M., Barra C.M. et al. B-cell helper neutrophils stimulate the diversification and production of immunoglobulin in the marginal zone of the spleen. Nat. Immunol. 2012; 13: 170-80.

50. Luyckx A., Schouppe E., Rutgeerts O. et al. G-CSF stem cell mobilization in human donors induces polymorphonuclear and mononuclear myeloid-derived suppressor cells. Clin. Immunol. 2010; 143 (1): 83-7. URL: https://doi.org/10.1016/j.clim.2012.01.011.

51. Scapini P., Marini O., Tecchio C., Cassatella M.A. Human neutrophils in the saga of cellular heterogeneity: insights and open questions. Immunol. Rev. 2016; 273: 48-60.

52. Schrijver I.T., Theroude C., Roger T. Myeloid-derived suppressor cells in sepsis. Front. Immunol. 2019; 10: 327.

53. Zhang J., Xu X., Shi M. et al. CD13^hi neutrophil-like myeloid-derived suppressor cells exert immune suppression through Arginase 1 expression in pancreatic ductal adenocarcinoma. Oncoimmunology. 2017; 6: e1258504.

54. Nan J., Xing Y.F., Tang J.X. et al. Endoplasmic reticulum stress induced LOX-1+CD15+ polymorphonuclear myeloid-derived suppressor cells in hepatocellular carcinoma . Immunology. 2018; 154: 144-55.

55. Pillay J., Kamp V.M., van Hoffen E. et al. A subset of neutrophils in human systemic inflammation inhibits T cell responses through Mac-1. J Clin. Invest. 2012; 122: 327-36.

56. Uhel F., Azzaoui I., Gregoire M. et al. Early expansion of circulating granulocytic myeloid-derived suppressor cells predict development of nosocomial infections in patients with sepsis. Am. J. Respir. Crit. Care Med. 2017; 196 (3): 448-53. doi: 10.1164/rccm.201606-1143OC.

57. Marini O., Costa S., Bevilacqua D. et al. Mature CD10+ and immature CD10- neutrophils present in G-CSF-treated donors display opposite effects on T cells. Blood. 2017; 129: 1343-56.

58. Lin A., Lore K. Granulocytes: new members of the antigen-presenting cell family. Front. Immunol. 2017; 8: 1781.

59. Долгушин И.И., Мезенцева Е.А., Савочкина А.Ю., Кузнецова Е.К. Нейтрофил как "многофункциональное устройство" иммунной системы. Инфекция и иммунитет. 2019; 9 (1): 9-38. doi: 10.15789/2220-7619-2019-1-9-38.

60. Gao Y., Min K., Zhang Y. et al. Female-specific downregula-tion of tissue polymorphonuclear neutrophils drives impaired regulatory T cell and amplified effector T cell responses in autoimmune dry eye disease. J. Immunol. 2015; 195: 3086-99.

61. Lowe D.M., Demaret J., Bangani N. et al. Different effect of viable versus necrotic neutrophils on Mycobacterium tuberculosis growth and cytokine induction in whole blood. Front. Immunol. 2018; 9: 903. doi: 10.3389/fimmu.2018.00903.

62. Patel J.M., Sapey E., Parekh D. et al. Sepsis induces a dysregulated neutrophil phenotype that is associated with increased mortality. Mediators Inflamm. 2018; 2018: 4065362. doi: 10.1155/2018/4065362

63. Cornish A.L., Campbell I.K., McKenzie B.S. et al. G-CSF and GM-CSF as therapeutic targets in rheumatoid arthritis. Nat. Rev. Rheumatol. 2009; 5 (10): 554-9.

64. Templeton A.J., McNamara M.G., Seruga B. et al. Prognostic role of neutrophil-to-lymphocyte ratio in solid tumors: a systemic review and meta-analysis. J. Natl Cancer Inst. 2014; 106 (6): dju124. doi: 10.1093/jnci/dju124.

65. SenGupta S., Subramanian B.C., Parents C.A. Getting TANned: how the tumor microenvironment drives neutrophil recruitment. J. Leukoc. Biol. 2019; 105 (3): 449-62. doi: 10.1002/JLB.3R10718-282R.

66. Rao H-L., Chen J-W., Li M. et al. Increased intratumoral neutrophil in colorectal carcinomas correlates closely with malignant phenotype and predict patient’s adverse prognosis. PLoS One. 2012; 7: e30806. doi: 10.1371/journal.pone.0030806.

67. Fridlender Z.G., Sun J., Kim S. et al. Polarization of tumor-associated neutrophil phenotype by TGF-beta: "N1" versus "N2" TAN. Cancer Cell. 2009; 16: 183-94. doi: 10.1016/j.ccr.2009.06.017.

68. Puhl S-L., Steffens S. Neutrophils in post-myocardial infarction inflammation: damage vs resolution? Front. Cardiovasc. Med. 2019; 6: 25. doi: 10.3389/fcvm.2019.00025.

Материалы данного сайта распространяются на условиях лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License («Атрибуция - Всемирная»)