Текущий номер
№ 4 . 2021
Достижения, награды и премии

Медаль "За вклад в науку" присуждена сотрудникам ФГБУ "ГНЦ Институт иммунологии" ФМБА России М.Р. Хаитову, А.И. Мартынову, И.П. Шиловскому

Резюме
Актуальные направления современной иммунологии

Тучные клетки тимуса: на перекрестке трех дорог

Резюме

В обзоре рассматривается роль тучных клеток тимуса во взаимодействии трех интегративных систем: нервной, эндокринной и иммунной. Анализируется их структура, механизм связей с нервными терминалями, спектр медиаторов и гормонов, обеспечивающих межклеточную коммуникацию. Показано, что тучные клетки являются как рецепторными, так и эффекторными, усиливающими механизмы нервной регуляции. Также в обзоре приводятся аргументы в пользу связи тучных клеток с эндокринной функцией тимуса. Роль тучных клеток тимуса в кооперации трех интегративных систем рассматривается в контексте регуляции созревания и дифференцировки Т-лимфоцитов.

Клеточная иммунология

Изучение иммунного ответа и состояния метаболизма на экспериментальных моделях развития гиперлипидемии и метаболического синдрома

Резюме

Введение. Иммунная система выполняет важную роль в патогенезе гиперлипидемии (ГЛ) и метаболического синдрома (МС). Метаболические дисфункции сопровождаются нарушениями кооперации, межклеточного взаимодействия различных звеньев иммунной системы. К ключевым патогенетическим факторам ГЛ и МС относятся изменение секреции медиаторов адипоцитов (адипонектина, лептина), провоспалительных и противовоспалительных цитокинов (ЦТ). Данные экспериментальных и клинических исследований свидетельствуют о взаимосвязи и взаимообусловленности клеточных иммунных реакций, медиаторов межклеточных взаимодействий и метаболических нарушений макроорганизма.

Цель исследования - изучение популяционного состава лимфоидных клеток селезенки, продукции цитокинов и функциональной активности лимфоцитов при экспериментальном моделировании МС и ГЛ.

Материал и методы. Эксперименты выполнены на мышах C57B1/6. Исследования проведены на 2 экспериментальных моделях МС и ГЛ, основанных на длительном выпаивании животных 20 % водным раствором фруктозы с добавлением в корм холестерина и внутрибрюшинном введении мышам Полоксамера 407 соответственно.

Оценка субпопуляционного состава клеток селезенки мышей проведена методом проточной цитометрии. Определение лептина, адипонектина, инсулина, цитокинов интерлейкина(ИЛ)-15, ИЛ-22 в сыворотке крови мышей проводили методом ELISA с использованием коммерческих наборов. Пролиферацию лимфоцитов оценивали в реакции бласттрансформации (РБТЛ).

Результаты экспериментов при моделировании МС и ГЛ свидетельствуют об изменении популяционного состава селезенки (снижение содержания CD4+- и CD8+-Т-клеток, активация CD4+CD25+Foxp3+-Тreg-клеток), сопровождающимся снижением функциональной активности иммунокомпетентных Т-клеток и увеличением пролиферативной активности В-лимфоцитов, нарушением продукции ИЛ-15, -22, участвующих в липидном обмене, и о дисфункциональных изменениях медиаторов липидного и углеводного обмена (адипонектин, лептин, инсулин), что в совокупности является предпосылками для развития хронического воспаления - важнейшего патогенетического признака МС.

Заключение. Полученные данные по изменению иммунного ответа и состояния метаболизма подтверждают целесообразность поиска и скрининга иммунокорригирующих лекарственных средств, предназначенных для профилактики и лечения гиперлипидемии и симптомокомплекса МС, исходя из целенаправленного воздействия на ведущие звенья патогенеза метаболической болезни.

Динамика восстановления субпопуляций Т-лимфоцитов после действия различных повреждающих агентов

Резюме

Введение. Различные повреждающие агенты отличаются по характеру иммуносупрессивного действия на иммунную систему и вызывают в ней патогенетически различные репаративные изменения. Исследование механизмов восстановления Т-клеточного звена иммунитета при неблагоприятных воздействиях имеет важное значение как для понимания патогенеза этих процессов, так и для поиска адекватных методов их коррекции.

Цель работы - изучить вклад тимуса и периферических лимфоидных органов (на примере селезенки) в восстановление субпопуляций Т-лимфоцитов при равной степени исходного повреждения цитостатиком циклофосфаном и сублетальным облучением.

Материал и методы. Мыши линии C57BL/6 были разделены на 3 группы. 1-й группе (20 мышей) однократно вводили циклофосфан, 2-ю группу (20 мышей) однократно облучали рентгеновскими лучами в сублетальной дозе, 3-ю группу (8 мышей) составили интактные мыши (контроль). Забой мышей проводили на 10, 20, 30 и 60-е сутки. В тимусе и селезенке определяли клеточность и субпопуляционный состав Т-клеток методом проточной цитофлуориметрии.

Результаты. Выявлено, что облучение более глубоко повреждает активно делящиеся тимо-циты, чем циклофосфан. В тимусе формируется своеобразный блок на стадии DN4-тимоцитов. Полного восстановления тимуса не происходит даже через 2 мес после сублетального облучения. В наибольшей степени поражение радиацией затрагивает субпопуляцию цитотоксических Т-лимфоцитов, которая к 60-м суткам не восстанавливается полностью ни в тимусе, ни на периферии. Активно делящиеся тимоциты более подвержены действию повреждающих факторов, чем зрелые спленоциты. Существенный вклад в регенеративные процессы вносит гомеостатическая пролиферация, которая сопровождается конверсией фенотипа наивных Т-клеток и, как следствие, увеличением числа центральных Т-клеток памяти.

Заключение. Т-клеточное звено иммунной системы более чувствительно к ионизирующему облучению, чем к действию цитостатиков. При этом облучение в значительной степени повреждает не только лимфоидные элементы, но и строму тимуса. Оба вида воздействия приводят к снижению численности наивных Т-клеток и накоплению суррогатных Т-клеток памяти, следствием чего должно стать сужение репертуара Т-клеточных рецепторов, развитие иммунодефицита и различных иммунопатологических состояний, связанных с Т-клеточным ответом. Это следует учитывать при назначении оптимальных схем корригирующего лечения после облучения и химиотерапии.

Цитокины

Локальный цитокиновый статус у пациентов с сиаладенозом околоушной слюнной железы на фоне гипотиреоза

Резюме

Введение. Дистрофические и воспалительные заболевания больших слюнных желез (БСЖ) занимают весомую долю по распространенности среди стоматологической патологии. Известно, что патогенез сиаладенозов связан с дисфункцией щитовидной железы. На сегодняшний день местного симптоматического лечения сиаладеноза и проводимой коррекции общего соматического заболевания недостаточно, так как у данных пациентов не удается добиться стойкой ремиссии. Экспериментально доказано, что уже при субклиническом гипотиреозе наблюдаются морфологические изменения в тканях околоушных слюнных желез (ОУСЖ) в виде лимфоидной инфильтрации. Изучение уровня локальных цитокинов во многом может определять характер течения и исход заболевания.

Цель исследования - исследовать уровни про- и противовоспалительных цитокинов в паротидном секрете у пациентов с сиаладенозом ОУСЖ при гипотиреозе.

Материал и методы. 52 пациента с сиаладенозом ОУСЖ в сочетании с гипотиреозом были разделены на 2 группы: 1-я - 30 пациентов в стадии ремиссии, 2-я - 22 пациента в стадии обострения. В группу сравнения вошли 20 условно здоровых добровольцев. Содержание интерлейкина(ИЛ)-1β, ИЛ-6, ФНОα и ИЛ-10 определяли в паротидном секрете с помощью иммуноферментного анализа реактивами фирмы "Вектор-Бест" (Россия) с использованием прибора "BMG Labtech" (ClarioStar, Германия).

Результаты. Получена достоверная разница уровней ИЛ-1Р, ИЛ-6, ФНОα между группами больных сиаладенозом и группой сравнения с максимальным содержанием исследуемых цитокинов при сиалоденозе в стадии обострения. Уровень ИЛ-10 был достоверно ниже при сиалоденозе в стадии обострения, чем в других группах. ФНОα был детектирован в паротидном секрете только у 25 % исследуемых в группе сравнения.

Заключение. Исследование провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в секрете слюнных желез наряду с клинической картиной может служить дополнительным диагностическим средством для оценки тяжести воспалительного процесса у этих пациентов, что позволяет рассмотреть применение данного метода в практической стоматологии для динамического наблюдения за пациентами и дальнейшего повышения эффективности лечения.

Онкоиммунология

Анализ субпопуляций лимфоцитов костного мозга больных острым миелоидным лейкозом: иммунологические эффекты химиотерапии

Резюме

Введение. Острый миелоидный лейкоз (ОМЛ) - один из самых распространенных видов опухолей кроветворной системы с низким показателем 5-летней выживаемости. "Золотым стандартом" лечения этого заболевания, особенно для молодых пациентов, является химиотерапевтический курс "7+3" - комбинация цитарабина и антрациклинового антибиотика, обычно даунорубицина. Лимфоциты играют ключевую роль в иммунологическом надзоре над опухолями различной локализации. В этом исследовании мы провели детальный анализ эффектов воздействия химиотерапевтической схемы "7+3" на лимфоциты костного мозга, а также изучили некоторые параметры лимфоцитов, характерные для пациентов с ОМЛ.

Цель исследования - изучение клеточного состава и фенотипических особенностей лимфоцитов костного мозга больных ОМЛ на разных стадиях терапии по схеме "7+3".

Материал и методы. Были получены образцы аспирата костного мозга от 61 пациента с ОМЛ. Среди них было отобрано 16 пациентов, которые проходили лечение по классической схеме "7+3". У них были получены образцы костного мозга до и после терапии в одинаковые временные промежутки в течение первых 3 нед посттерапевтического периода. Для получения лейкоцитов из аспиратов костного мозга в образцы добавляли буфер для лизирования эритроцитов, затем лейкоциты окрашивали набором антител, который включал анти-СDЗ-, CD4-, CD8-, CD16-, CD19-, CD45-, CD56- и СБ57-антитела. Анализ клеточного состава и экспрессии указанных молекул проводили на проточном цитометре "BD Aria II" с использованием программного пакета FlowJo.

Результаты. В группе обследованных пациентов с ОМЛ (n = 16) выявлены изменения в соотношении популяций лимфоцитов в ходе проведения терапии. B-клетки оказались крайне чувствительными к терапии по схеме "7+3" - они практически полностью элиминировались в раннем посттерапевтическом периоде. Количество НК-клеток восстанавливалось спустя 2-3 нед после окончания курса химиотерапии. Среди общей популяции больных ОМЛ (n = 61) отношение CD4+-/CD8+-T-лимфоцитов было несколько повышено, однако лежало в пределах нормальных значений. Выявлены 3 пациента, НК-клетки которых не экспрессировали CD16, тем не менее эта фенотипическая особенность не влияла на эффективность химиотерапии.

Заключение. Настоящее исследование выявило закономерности изменения соотношения популяций лимфоцитов и их поверхностного фенотипа под воздействием химиотерапевтической схемы "7+3". Кроме того, впервые было описано отсутствие экспрессии функционально важной поверхностной молекулы CD16 на НК-клетках некоторых пациентов, что может иметь большое значение, особенно при потенциальном внедрении терапии ОМЛ моноклональными антителами.

Клиническая иммунология

Клинико-иммунологические параллели при COVID-19: опыт применения иммуномодулирующей терапии

Резюме

Введение. Попытки повлиять на взаимодействие SARS-CoV-2 с системой иммунной защиты создают дополнительные возможности для предотвращения развития COVID-19 и прогрессирования осложнений заболевания.

Цель работы - оценить целесообразность иммуномодулирующей терапии в комплексном лечении госпитализированных пациентов с COVID-19.

Материал и методы. В исследование было включено 43 пациента с COVID-19. Они составили группу сравнения (n = 21) и основную группу (n = 22), в которой на 7-14-е сутки госпитализации после проведения стандартной комплексной терапии дополнительно применяли ингибитор протеаз, обладающий вирулицидными свойствами, апротинин, аминодигидрофталазиндион натрия (Галавит®), иммуноглобулин человека нормальный (IgG, IgA, IgM), интерферон альфа-2b.

На 1-3-и, 5-7-е и 9-15-е сутки с момента начала иммуномодулирующей терапии исследовали следующие показатели: уровень интерлейкина(ИЛ)-6, содержание Т-лимфоцитов (Т-хелперы и цитотоксические Т-лимфоциты), иммунорегуляторный индекс (отношение CD4+/CD8+). Оценку проводили иммуноферментным, цитофлуориметрическим и иммунохемилюминесцентным методами.

Результаты. Уровень провоспалительного цитокина ИЛ-6 в основной группе достоверно снижался на фоне применения иммуномодулирующей терапии; динамика уровня ИЛ-6 прямо пропорционально коррелировала с применением иммуномодуляторов. В основной группе уровень субпопуляций Т-лимфоцитов начинал восстанавливаться с 3-х суток наблюдения, достигая нижней границы физиологической нормы к 14-м суткам от начала иммуномодулирующей терапии.

На 7-е сутки наблюдения в основной группе иммунорегуляторный индекс CD4+/CD8+ у 18 (81,8 %) пациентов с COVID-19 составил ≥ 1,4. В группе сравнения у 15 (71,4 %) пациентов с COVID-19 средней степени тяжести индекс CD4+/CD8+ составил ≤ 1,4, у 2 (9,5 %) пациентов с COVID-19 легкой степени тяжести индекс CD4+/CD8+ был ≥ 1,4. В то же время в основной группе достоверно быстрее снижалась вирусная нагрузка ≤ 0,005). По данным ПЦР-тестов в основной группе элиминация SARS-CoV-2 происходила к 11-м суткам у всех пациентов, а в группе сравнения на 21-е сутки заболевания ПЦР-тест был отрицательным только у 4 из 20 пациентов (25 %). В основной группе у всех пациентов отмечена положительная динамика клинической картины. В группе сравнения, несмотря на проведенное стандартное лечение, значимой положительной динамики не достигнуто; отмечали присоединение вторичной бактериальной инфекции на 21-й день заболевания.

Заключение. Таким образом, иммуномодулирующая терапия способна увеличить эффективность лечения пациентов с COVID-19.

Динамика иммунологических и микробиологических показателей ротовой жидкости при терапии кариеса

Резюме

Введение. Слизистая оболочка ротовой полости входит в единую систему мукозального иммунитета и реализует функции на уровне местного и системного иммунитета. Микрофлора совместно с рецепторами врожденного иммунитета (TLR, NLR и др.) регулирует колонизационную резистентность слизистых, определяет выраженность инфекционного процесса и поддерживает нормоценоз ротовой полости. Нарушения динамического баланса колонизационной резистентности могут приводить не только к кариесу зубов, но и другим патологиям как ротовой полости, так и всего организма.

Цель исследования - изучение уровней α-дефензинов и секреторного иммуноглобулина А (sIgA), а также представителей микробного сообщества ротовой полости молодых людей в возрасте 19-22 года с кариесом окклюзионных и контактных поверхностей боковых зубов на фоне профилактического применения препарата Ликопид® 1 мг (глюкозаминилмурамилдипептид, ГМДП).

Материал и методы. У 43 клинически здоровых пациентов 19-22 лет с кариесом окклюзионных и контактных поверхностей боковых зубов проводили забор ротовой жидкости до приема препарата и через 14 дней после. Участники основной группы (21 пациент) с 1-го по 10-й день наблюдения принимали сублингвально препарат Ликопид® 1 мг (ГМДП, АО "Пептек", Москва, Россия) по 1 таблетке 1 раз в день. Участники группы сравнения (22 пациента) не принимали Ликопид® 1 мг. Оценку микробиоты ротовой жидкости проводили методом ПЦР в реальном времени (ПЦР-РВ) с использованием реагентов Дентофлор ("ДНК-технология", Москва). Для NGS-секвенирования ДНК на приборе MiSeq (Illumina, США) использовали праймеры V6 16S рДНК. Идентификацию микроорганизмов производили с помощью программы Blast. Анализ α-дефензинов HNP1-3 и содержание sIgA в сублингвальной слюне исследовали методом иммуноферментного анализа с помощью реактивов Hycult Biotech (США) и "Вектор-Бест" (Новосибирск, Россия). При статистической обработке данных использовали критерий Манна-Уитни, программу Biostat.

Результаты. Применение лекарственного средства Ликопид® способствует восстановлению уровней α-дефензинов HNP1-3 и sIgA до уровня таковых у лиц с интактными зубами, приводит к достоверному уменьшению представленности Porphyromonas gin-givalis и Clostridium difficile и увеличивает разнообразие микрофлоры ротовой полости.

Заключение. Использование лекарственного средства Ликопид® после терапии кариеса сопровождается коррекцией иммунологических показателей в ротовой жидкости.

Методы

Использование технологической платформы ELISPOT в диагностике туберкулезной инфекции у пациентов с ВИЧ-инфекцией

Резюме

Введение. Проблема неуклонного роста ВИЧ-ассоциированного туберкулеза (ТБ) в последние годы становится в России все более актуальной. Диагностика ТБ особенно затруднена на стадии выраженного иммунодефицита.

Цель исследования - оценить возможность применения метода T-SPOT.TB в диагностике ТБ-инфекции у пациентов с ВИЧ-инфекцией.

Материал и методы. За 2019-2020 гг. выполнен анализ результатов T-SPOT.TB у 396 пациентов. В исследование были включены пациенты, удовлетворяющие следующим критериям: возраст 18 лет и старше, диагноз "ВИЧ-инфекция", диспансерное наблюдение в Центре по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями, проведение компьютерной томографии (КТ) легких, наличие анализа крови методом Т-SPOT.TB. На основании результатов теста Т-SPOT.TB были сформированы 2 группы пациентов: 1-я группа - с положительным результатом - Т-SPOT.TB+ (n = 143) и 2-я группа - с отрицательным результатом Т-SPOT.TB- (n = 253).

Результаты. ТБ верифицирован обнаружением Mycobacterium tuberculosis у 117 пациентов с ВИЧ-инфекцией, при КТ у всех наблюдались изменения, характерные для ТБ, положительный результат Т-SPOT.TB был отмечен в 88 % (n = 103) случаев. Средний уровень СD4+-Т-клеток в этой группе составил 230,05 ± 15,3 кл/мкл при 95 % доверительном интервале [190,91-256,2]. Диагноз "латентная туберкулезная инфекция" поставлен 40 пациентам с ВИЧ-инфекцией с положительным результатом T-SPOT.TB при отсутствии изменений при КТ.

Заключение. T-SPOT.TB может использоваться в диагностическом комплексе наблюдения пациентов с ВИЧ-инфекций как скрининг-метод, позволяющий в последующем не только верифицировать диагноз, но и выявить латентный ТБ.

Обзоры

Анализ механизмов развития иммунного ответа при инфицировании вирусом гепатита В и способы повышения эффективности вакцинации

Резюме

В настоящее время в медицинской практике применяется ряд рекомбинантных вакцин против гепатита В с доказанным профилем иммуногенности и безопасности. Проведение вакцинации против указанной инфекции в рамках национальных программ иммунизации в разных странах мира, в том числе в России, способствовало снижению заболеваемости гепатитом В. Однако, несмотря на наличие эффективных препаратов, существуют группы лиц, слабо отвечающих на проводимую вакцинацию. Поскольку выраженность иммунного ответа на вирус гепатита В определяется многими факторами, продолжается активный поиск подходов к повышению эффективности иммунопрофилактики при данной инфекции. В статье рассмотрены основные пути развития иммунных реакций при инфицировании вирусом гепатита В, приведены сведения о способах повышения эффективности вакцинации против указанного возбудителя инфекции, одним из которых является применение адъювантов. Представлена краткая характеристика зарегистрированных вакцин против гепатита В, содержащих разные адъюванты; рассмотрены основные механизмы их действия; обобщены результаты ряда доклинических и клинических исследований современных вакцин против гепатита В с использованием новых адъювантов, которые могут быть перспективными с точки зрения повышения иммуногенности вакцин. Понимание особенностей формирования иммунитета против вируса гепатита В в сочетании с изучением механизмов действия новых адъювантов будет способствовать созданию современных препаратов, обеспечивающих сбалансированное стимулирование гуморального и клеточного иммунного ответа против вируса гепатита В.

Развитие и функция регуляторных В-клеток и их роль в поддержании беременности

Резюме

Традиционно функцию В-клеток преимущественно ассоциируют с гуморальным иммунитетом и положительной регуляцией иммунного ответа через продукцию специфических антител и оптимальную активацию CD4+-Т-клеток. Однако недавно был выявлен уникальный подкласс В-клеток, позже описанный как регуляторные В-клетки (Bрег). Эти клетки способны подавлять функции других иммунных клеток, включая дендритные клетки (ДК) и Т-лимфоциты, через продукцию противовоспалительных цитокинов, преимущественно интерлейкина(ИЛ)-10, который эффективно ингибирует пролиферацию и выработку провоспалительных цитокинов Т-клетками и индуцирует дифференцировку регуляторных Т-клеток (Tрег). Иммуносупрессорные Bрег, продуцирующие ИЛ-10, участвуют в поддержании гомеостаза в иммунной системе и толерантности к собственным антигенам. Получены данные, демонстрирующие протективную роль Bрег в завершении воспаления, а также их патогенную роль через выработку аутоантител. В популяцию Bрег входит уникальный функционально определенный подкласс, который в настоящее время может быть детектирован только по способности продуцировать и секретировать ИЛ-10 после соответствующей стимуляции ex vivo. В настоящее время накоплены доказательства, подтверждающие важную роль Bрег в аутоиммунных и инфекционных заболеваниях, а также в формировании трансплантационной толерантности и в развитии опухолей. Bрег также вовлечены в процесс становления селективной иммунной толерантности в течение беременности, необходимой для обеспечения иммунопривилегированного микроокружения полуаллогенного плода. Показано, что нарушение численности и функциональной активности Bрег может приводить к развитию различных иммуноопосредуемых патологий беременности, таких как повторные неудачи имплантации, привычное невынашивание беременности и преждевременные роды. В обзоре представлены результаты исследований, посвященных изучению биологии и функциональной роли Bрег в регуляции процессов репродукции.

Антимикробные белки и пептиды нейтрофильных гранулоцитов как модуляторы системы комплемента

Резюме

Нейтрофильные гранулоциты (нейтрофилы) и система комплемента - важные факторы врожденного иммунитета позвоночных. Вследствие длительной коэволюции между ними сформировались разнообразные отношения. Накоплены данные о действии антимикробных белков и пептидов нейтрофилов на комплемент. В данной работе кратко рассматривается биология нейтрофилов и комплемента, систематизируются работы, посвященные действию миелопероксидазы, активных форм кислорода, лизоцима, антимикробных пептидов, лактоферрина, нейтрофильных внеклеточных ловушек, фрагментов нейтрофилов и тотального вещества гранул на комплемент человека. Акцент делается на физиологической и патофизиологической роли такой модуляции.

Хроника

17-й Международный междисциплинарный конгресс по аллергологии и иммунологии (23-25 июня 2021 г., Москва)

Резюме
Юбилей

Профессор Фируз Юсупович Гариб

Резюме
Памятные даты

Александр Александрович Ярилин К 80-летию со дня рождения

Резюме
Главный редактор
ГЛАВНЫЙ РЕДАКТОР
Хаитов Рахим Мусаевич
Академик РАН, доктор медицинских наук, профессор, заслуженный деятель науки Российской Федерации, научный руководитель ФГБУ «ГНЦ Институт иммунологии» ФМБА России, главный аллерголог-иммунолог Минздрава России
РОСМЕДОБР 2021
Вскрытие
Медицина сегодня
"Интегративная дерматовенерология и косметология. Новые стандарты взаимодействия".

С 10 по 12 декабря на сайте intedeco.ru начнет работу онлайн-конференция InteDeCo 2021 "Интегративная дерматовенерология и косметология. Новые стандарты взаимодействия". Вас ждет много полезной и познавательной информации: показательные мастер-классы и специальные программы,...

Пост-релиз "Молекулярная диагностика"

Молекулярная диагностика на страже "биопорядка": как современные технологии позволяют выжить в век эпидемий Новые технологии молекулярной диагностики в эпоху COVID-19/пандемий Обеспечение массового экспресс-тестирования населения - приоритетная задача, которая поможет...

"Муковисцидоз: из детства во взрослую жизнь"

Всероссийская школа по Муковисцидозу с международным участием "Муковисцидоз: из детства во взрослую жизнь" С 24 по 25 ноября 2021 года профессионалы в области педиатрии, терапии, пульмонологии, гастроэнтерологии, эндокринологии, генетики, диетологии, микробиологии,...


Журналы «ГЭОТАР-Медиа»