Текущий номер
№ 4 . 2021
Достижения, награды и премии

Медаль "За вклад в науку" присуждена сотрудникам ФГБУ "ГНЦ Институт иммунологии" ФМБА России М.Р. Хаитову, А.И. Мартынову, И.П. Шиловскому

Резюме
Актуальные направления современной иммунологии

Тучные клетки тимуса: на перекрестке трех дорог

Резюме

В обзоре рассматривается роль тучных клеток тимуса во взаимодействии трех интегративных систем: нервной, эндокринной и иммунной. Анализируется их структура, механизм связей с нервными терминалями, спектр медиаторов и гормонов, обеспечивающих межклеточную коммуникацию. Показано, что тучные клетки являются как рецепторными, так и эффекторными, усиливающими механизмы нервной регуляции. Также в обзоре приводятся аргументы в пользу связи тучных клеток с эндокринной функцией тимуса. Роль тучных клеток тимуса в кооперации трех интегративных систем рассматривается в контексте регуляции созревания и дифференцировки Т-лимфоцитов.

Клеточная иммунология

Изучение иммунного ответа и состояния метаболизма на экспериментальных моделях развития гиперлипидемии и метаболического синдрома

Резюме

Введение. Иммунная система выполняет важную роль в патогенезе гиперлипидемии (ГЛ) и метаболического синдрома (МС). Метаболические дисфункции сопровождаются нарушениями кооперации, межклеточного взаимодействия различных звеньев иммунной системы. К ключевым патогенетическим факторам ГЛ и МС относятся изменение секреции медиаторов адипоцитов (адипонектина, лептина), провоспалительных и противовоспалительных цитокинов (ЦТ). Данные экспериментальных и клинических исследований свидетельствуют о взаимосвязи и взаимообусловленности клеточных иммунных реакций, медиаторов межклеточных взаимодействий и метаболических нарушений макроорганизма.

Цель исследования - изучение популяционного состава лимфоидных клеток селезенки, продукции цитокинов и функциональной активности лимфоцитов при экспериментальном моделировании МС и ГЛ.

Материал и методы. Эксперименты выполнены на мышах C57B1/6. Исследования проведены на 2 экспериментальных моделях МС и ГЛ, основанных на длительном выпаивании животных 20 % водным раствором фруктозы с добавлением в корм холестерина и внутрибрюшинном введении мышам Полоксамера 407 соответственно.

Оценка субпопуляционного состава клеток селезенки мышей проведена методом проточной цитометрии. Определение лептина, адипонектина, инсулина, цитокинов интерлейкина(ИЛ)-15, ИЛ-22 в сыворотке крови мышей проводили методом ELISA с использованием коммерческих наборов. Пролиферацию лимфоцитов оценивали в реакции бласттрансформации (РБТЛ).

Результаты экспериментов при моделировании МС и ГЛ свидетельствуют об изменении популяционного состава селезенки (снижение содержания CD4+- и CD8+-Т-клеток, активация CD4+CD25+Foxp3+-Тreg-клеток), сопровождающимся снижением функциональной активности иммунокомпетентных Т-клеток и увеличением пролиферативной активности В-лимфоцитов, нарушением продукции ИЛ-15, -22, участвующих в липидном обмене, и о дисфункциональных изменениях медиаторов липидного и углеводного обмена (адипонектин, лептин, инсулин), что в совокупности является предпосылками для развития хронического воспаления - важнейшего патогенетического признака МС.

Заключение. Полученные данные по изменению иммунного ответа и состояния метаболизма подтверждают целесообразность поиска и скрининга иммунокорригирующих лекарственных средств, предназначенных для профилактики и лечения гиперлипидемии и симптомокомплекса МС, исходя из целенаправленного воздействия на ведущие звенья патогенеза метаболической болезни.

Динамика восстановления субпопуляций Т-лимфоцитов после действия различных повреждающих агентов

Резюме

Введение. Различные повреждающие агенты отличаются по характеру иммуносупрессивного действия на иммунную систему и вызывают в ней патогенетически различные репаративные изменения. Исследование механизмов восстановления Т-клеточного звена иммунитета при неблагоприятных воздействиях имеет важное значение как для понимания патогенеза этих процессов, так и для поиска адекватных методов их коррекции.

Цель работы - изучить вклад тимуса и периферических лимфоидных органов (на примере селезенки) в восстановление субпопуляций Т-лимфоцитов при равной степени исходного повреждения цитостатиком циклофосфаном и сублетальным облучением.

Материал и методы. Мыши линии C57BL/6 были разделены на 3 группы. 1-й группе (20 мышей) однократно вводили циклофосфан, 2-ю группу (20 мышей) однократно облучали рентгеновскими лучами в сублетальной дозе, 3-ю группу (8 мышей) составили интактные мыши (контроль). Забой мышей проводили на 10, 20, 30 и 60-е сутки. В тимусе и селезенке определяли клеточность и субпопуляционный состав Т-клеток методом проточной цитофлуориметрии.

Результаты. Выявлено, что облучение более глубоко повреждает активно делящиеся тимо-циты, чем циклофосфан. В тимусе формируется своеобразный блок на стадии DN4-тимоцитов. Полного восстановления тимуса не происходит даже через 2 мес после сублетального облучения. В наибольшей степени поражение радиацией затрагивает субпопуляцию цитотоксических Т-лимфоцитов, которая к 60-м суткам не восстанавливается полностью ни в тимусе, ни на периферии. Активно делящиеся тимоциты более подвержены действию повреждающих факторов, чем зрелые спленоциты. Существенный вклад в регенеративные процессы вносит гомеостатическая пролиферация, которая сопровождается конверсией фенотипа наивных Т-клеток и, как следствие, увеличением числа центральных Т-клеток памяти.

Заключение. Т-клеточное звено иммунной системы более чувствительно к ионизирующему облучению, чем к действию цитостатиков. При этом облучение в значительной степени повреждает не только лимфоидные элементы, но и строму тимуса. Оба вида воздействия приводят к снижению численности наивных Т-клеток и накоплению суррогатных Т-клеток памяти, следствием чего должно стать сужение репертуара Т-клеточных рецепторов, развитие иммунодефицита и различных иммунопатологических состояний, связанных с Т-клеточным ответом. Это следует учитывать при назначении оптимальных схем корригирующего лечения после облучения и химиотерапии.

Цитокины

Локальный цитокиновый статус у пациентов с сиаладенозом околоушной слюнной железы на фоне гипотиреоза

Резюме

Введение. Дистрофические и воспалительные заболевания больших слюнных желез (БСЖ) занимают весомую долю по распространенности среди стоматологической патологии. Известно, что патогенез сиаладенозов связан с дисфункцией щитовидной железы. На сегодняшний день местного симптоматического лечения сиаладеноза и проводимой коррекции общего соматического заболевания недостаточно, так как у данных пациентов не удается добиться стойкой ремиссии. Экспериментально доказано, что уже при субклиническом гипотиреозе наблюдаются морфологические изменения в тканях околоушных слюнных желез (ОУСЖ) в виде лимфоидной инфильтрации. Изучение уровня локальных цитокинов во многом может определять характер течения и исход заболевания.

Цель исследования - исследовать уровни про- и противовоспалительных цитокинов в паротидном секрете у пациентов с сиаладенозом ОУСЖ при гипотиреозе.

Материал и методы. 52 пациента с сиаладенозом ОУСЖ в сочетании с гипотиреозом были разделены на 2 группы: 1-я - 30 пациентов в стадии ремиссии, 2-я - 22 пациента в стадии обострения. В группу сравнения вошли 20 условно здоровых добровольцев. Содержание интерлейкина(ИЛ)-1β, ИЛ-6, ФНОα и ИЛ-10 определяли в паротидном секрете с помощью иммуноферментного анализа реактивами фирмы "Вектор-Бест" (Россия) с использованием прибора "BMG Labtech" (ClarioStar, Германия).

Результаты. Получена достоверная разница уровней ИЛ-1Р, ИЛ-6, ФНОα между группами больных сиаладенозом и группой сравнения с максимальным содержанием исследуемых цитокинов при сиалоденозе в стадии обострения. Уровень ИЛ-10 был достоверно ниже при сиалоденозе в стадии обострения, чем в других группах. ФНОα был детектирован в паротидном секрете только у 25 % исследуемых в группе сравнения.

Заключение. Исследование провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в секрете слюнных желез наряду с клинической картиной может служить дополнительным диагностическим средством для оценки тяжести воспалительного процесса у этих пациентов, что позволяет рассмотреть применение данного метода в практической стоматологии для динамического наблюдения за пациентами и дальнейшего повышения эффективности лечения.

Онкоиммунология

Анализ субпопуляций лимфоцитов костного мозга больных острым миелоидным лейкозом: иммунологические эффекты химиотерапии

Резюме

Введение. Острый миелоидный лейкоз (ОМЛ) - один из самых распространенных видов опухолей кроветворной системы с низким показателем 5-летней выживаемости. "Золотым стандартом" лечения этого заболевания, особенно для молодых пациентов, является химиотерапевтический курс "7+3" - комбинация цитарабина и антрациклинового антибиотика, обычно даунорубицина. Лимфоциты играют ключевую роль в иммунологическом надзоре над опухолями различной локализации. В этом исследовании мы провели детальный анализ эффектов воздействия химиотерапевтической схемы "7+3" на лимфоциты костного мозга, а также изучили некоторые параметры лимфоцитов, характерные для пациентов с ОМЛ.

Цель исследования - изучение клеточного состава и фенотипических особенностей лимфоцитов костного мозга больных ОМЛ на разных стадиях терапии по схеме "7+3".

Материал и методы. Были получены образцы аспирата костного мозга от 61 пациента с ОМЛ. Среди них было отобрано 16 пациентов, которые проходили лечение по классической схеме "7+3". У них были получены образцы костного мозга до и после терапии в одинаковые временные промежутки в течение первых 3 нед посттерапевтического периода. Для получения лейкоцитов из аспиратов костного мозга в образцы добавляли буфер для лизирования эритроцитов, затем лейкоциты окрашивали набором антител, который включал анти-СDЗ-, CD4-, CD8-, CD16-, CD19-, CD45-, CD56- и СБ57-антитела. Анализ клеточного состава и экспрессии указанных молекул проводили на проточном цитометре "BD Aria II" с использованием программного пакета FlowJo.

Результаты. В группе обследованных пациентов с ОМЛ (n = 16) выявлены изменения в соотношении популяций лимфоцитов в ходе проведения терапии. B-клетки оказались крайне чувствительными к терапии по схеме "7+3" - они практически полностью элиминировались в раннем посттерапевтическом периоде. Количество НК-клеток восстанавливалось спустя 2-3 нед после окончания курса химиотерапии. Среди общей популяции больных ОМЛ (n = 61) отношение CD4+-/CD8+-T-лимфоцитов было несколько повышено, однако лежало в пределах нормальных значений. Выявлены 3 пациента, НК-клетки которых не экспрессировали CD16, тем не менее эта фенотипическая особенность не влияла на эффективность химиотерапии.

Заключение. Настоящее исследование выявило закономерности изменения соотношения популяций лимфоцитов и их поверхностного фенотипа под воздействием химиотерапевтической схемы "7+3". Кроме того, впервые было описано отсутствие экспрессии функционально важной поверхностной молекулы CD16 на НК-клетках некоторых пациентов, что может иметь большое значение, особенно при потенциальном внедрении терапии ОМЛ моноклональными антителами.

Клиническая иммунология

Клинико-иммунологические параллели при COVID-19: опыт применения иммуномодулирующей терапии

Резюме

Введение. Попытки повлиять на взаимодействие SARS-CoV-2 с системой иммунной защиты создают дополнительные возможности для предотвращения развития COVID-19 и прогрессирования осложнений заболевания.

Цель работы - оценить целесообразность иммуномодулирующей терапии в комплексном лечении госпитализированных пациентов с COVID-19.

Материал и методы. В исследование было включено 43 пациента с COVID-19. Они составили группу сравнения (n = 21) и основную группу (n = 22), в которой на 7-14-е сутки госпитализации после проведения стандартной комплексной терапии дополнительно применяли ингибитор протеаз, обладающий вирулицидными свойствами, апротинин, аминодигидрофталазиндион натрия (Галавит®), иммуноглобулин человека нормальный (IgG, IgA, IgM), интерферон альфа-2b.

На 1-3-и, 5-7-е и 9-15-е сутки с момента начала иммуномодулирующей терапии исследовали следующие показатели: уровень интерлейкина(ИЛ)-6, содержание Т-лимфоцитов (Т-хелперы и цитотоксические Т-лимфоциты), иммунорегуляторный индекс (отношение CD4+/CD8+). Оценку проводили иммуноферментным, цитофлуориметрическим и иммунохемилюминесцентным методами.

Результаты. Уровень провоспалительного цитокина ИЛ-6 в основной группе достоверно снижался на фоне применения иммуномодулирующей терапии; динамика уровня ИЛ-6 прямо пропорционально коррелировала с применением иммуномодуляторов. В основной группе уровень субпопуляций Т-лимфоцитов начинал восстанавливаться с 3-х суток наблюдения, достигая нижней границы физиологической нормы к 14-м суткам от начала иммуномодулирующей терапии.

На 7-е сутки наблюдения в основной группе иммунорегуляторный индекс CD4+/CD8+ у 18 (81,8 %) пациентов с COVID-19 составил ≥ 1,4. В группе сравнения у 15 (71,4 %) пациентов с COVID-19 средней степени тяжести индекс CD4+/CD8+ составил ≤ 1,4, у 2 (9,5 %) пациентов с COVID-19 легкой степени тяжести индекс CD4+/CD8+ был ≥ 1,4. В то же время в основной группе достоверно быстрее снижалась вирусная нагрузка ≤ 0,005). По данным ПЦР-тестов в основной группе элиминация SARS-CoV-2 происходила к 11-м суткам у всех пациентов, а в группе сравнения на 21-е сутки заболевания ПЦР-тест был отрицательным только у 4 из 20 пациентов (25 %). В основной группе у всех пациентов отмечена положительная динамика клинической картины. В группе сравнения, несмотря на проведенное стандартное лечение, значимой положительной динамики не достигнуто; отмечали присоединение вторичной бактериальной инфекции на 21-й день заболевания.

Заключение. Таким образом, иммуномодулирующая терапия способна увеличить эффективность лечения пациентов с COVID-19.

Динамика иммунологических и микробиологических показателей ротовой жидкости при терапии кариеса

Резюме

Введение. Слизистая оболочка ротовой полости входит в единую систему мукозального иммунитета и реализует функции на уровне местного и системного иммунитета. Микрофлора совместно с рецепторами врожденного иммунитета (TLR, NLR и др.) регулирует колонизационную резистентность слизистых, определяет выраженность инфекционного процесса и поддерживает нормоценоз ротовой полости. Нарушения динамического баланса колонизационной резистентности могут приводить не только к кариесу зубов, но и другим патологиям как ротовой полости, так и всего организма.

Цель исследования - изучение уровней α-дефензинов и секреторного иммуноглобулина А (sIgA), а также представителей микробного сообщества ротовой полости молодых людей в возрасте 19-22 года с кариесом окклюзионных и контактных поверхностей боковых зубов на фоне профилактического применения препарата Ликопид® 1 мг (глюкозаминилмурамилдипептид, ГМДП).

Материал и методы. У 43 клинически здоровых пациентов 19-22 лет с кариесом окклюзионных и контактных поверхностей боковых зубов проводили забор ротовой жидкости до приема препарата и через 14 дней после. Участники основной группы (21 пациент) с 1-го по 10-й день наблюдения принимали сублингвально препарат Ликопид® 1 мг (ГМДП, АО "Пептек", Москва, Россия) по 1 таблетке 1 раз в день. Участники группы сравнения (22 пациента) не принимали Ликопид® 1 мг. Оценку микробиоты ротовой жидкости проводили методом ПЦР в реальном времени (ПЦР-РВ) с использованием реагентов Дентофлор ("ДНК-технология", Москва). Для NGS-секвенирования ДНК на приборе MiSeq (Illumina, США) использовали праймеры V6 16S рДНК. Идентификацию микроорганизмов производили с помощью программы Blast. Анализ α-дефензинов HNP1-3 и содержание sIgA в сублингвальной слюне исследовали методом иммуноферментного анализа с помощью реактивов Hycult Biotech (США) и "Вектор-Бест" (Новосибирск, Россия). При статистической обработке данных использовали критерий Манна-Уитни, программу Biostat.

Результаты. Применение лекарственного средства Ликопид® способствует восстановлению уровней α-дефензинов HNP1-3 и sIgA до уровня таковых у лиц с интактными зубами, приводит к достоверному уменьшению представленности Porphyromonas gin-givalis и Clostridium difficile и увеличивает разнообразие микрофлоры ротовой полости.

Заключение. Использование лекарственного средства Ликопид® после терапии кариеса сопровождается коррекцией иммунологических показателей в ротовой жидкости.

Методы

Использование технологической платформы ELISPOT в диагностике туберкулезной инфекции у пациентов с ВИЧ-инфекцией

Резюме

Введение. Проблема неуклонного роста ВИЧ-ассоциированного туберкулеза (ТБ) в последние годы становится в России все более актуальной. Диагностика ТБ особенно затруднена на стадии выраженного иммунодефицита.

Цель исследования - оценить возможность применения метода T-SPOT.TB в диагностике ТБ-инфекции у пациентов с ВИЧ-инфекцией.

Материал и методы. За 2019-2020 гг. выполнен анализ результатов T-SPOT.TB у 396 пациентов. В исследование были включены пациенты, удовлетворяющие следующим критериям: возраст 18 лет и старше, диагноз "ВИЧ-инфекция", диспансерное наблюдение в Центре по профилактике и борьбе со СПИДом и инфекционными заболеваниями, проведение компьютерной томографии (КТ) легких, наличие анализа крови методом Т-SPOT.TB. На основании результатов теста Т-SPOT.TB были сформированы 2 группы пациентов: 1-я группа - с положительным результатом - Т-SPOT.TB+ (n = 143) и 2-я группа - с отрицательным результатом Т-SPOT.TB- (n = 253).

Результаты. ТБ верифицирован обнаружением Mycobacterium tuberculosis у 117 пациентов с ВИЧ-инфекцией, при КТ у всех наблюдались изменения, характерные для ТБ, положительный результат Т-SPOT.TB был отмечен в 88 % (n = 103) случаев. Средний уровень СD4+-Т-клеток в этой группе составил 230,05 ± 15,3 кл/мкл при 95 % доверительном интервале [190,91-256,2]. Диагноз "латентная туберкулезная инфекция" поставлен 40 пациентам с ВИЧ-инфекцией с положительным результатом T-SPOT.TB при отсутствии изменений при КТ.

Заключение. T-SPOT.TB может использоваться в диагностическом комплексе наблюдения пациентов с ВИЧ-инфекций как скрининг-метод, позволяющий в последующем не только верифицировать диагноз, но и выявить латентный ТБ.

Обзоры

Анализ механизмов развития иммунного ответа при инфицировании вирусом гепатита В и способы повышения эффективности вакцинации

Резюме

В настоящее время в медицинской практике применяется ряд рекомбинантных вакцин против гепатита В с доказанным профилем иммуногенности и безопасности. Проведение вакцинации против указанной инфекции в рамках национальных программ иммунизации в разных странах мира, в том числе в России, способствовало снижению заболеваемости гепатитом В. Однако, несмотря на наличие эффективных препаратов, существуют группы лиц, слабо отвечающих на проводимую вакцинацию. Поскольку выраженность иммунного ответа на вирус гепатита В определяется многими факторами, продолжается активный поиск подходов к повышению эффективности иммунопрофилактики при данной инфекции. В статье рассмотрены основные пути развития иммунных реакций при инфицировании вирусом гепатита В, приведены сведения о способах повышения эффективности вакцинации против указанного возбудителя инфекции, одним из которых является применение адъювантов. Представлена краткая характеристика зарегистрированных вакцин против гепатита В, содержащих разные адъюванты; рассмотрены основные механизмы их действия; обобщены результаты ряда доклинических и клинических исследований современных вакцин против гепатита В с использованием новых адъювантов, которые могут быть перспективными с точки зрения повышения иммуногенности вакцин. Понимание особенностей формирования иммунитета против вируса гепатита В в сочетании с изучением механизмов действия новых адъювантов будет способствовать созданию современных препаратов, обеспечивающих сбалансированное стимулирование гуморального и клеточного иммунного ответа против вируса гепатита В.

Развитие и функция регуляторных В-клеток и их роль в поддержании беременности

Резюме

Традиционно функцию В-клеток преимущественно ассоциируют с гуморальным иммунитетом и положительной регуляцией иммунного ответа через продукцию специфических антител и оптимальную активацию CD4+-Т-клеток. Однако недавно был выявлен уникальный подкласс В-клеток, позже описанный как регуляторные В-клетки (Bрег). Эти клетки способны подавлять функции других иммунных клеток, включая дендритные клетки (ДК) и Т-лимфоциты, через продукцию противовоспалительных цитокинов, преимущественно интерлейкина(ИЛ)-10, который эффективно ингибирует пролиферацию и выработку провоспалительных цитокинов Т-клетками и индуцирует дифференцировку регуляторных Т-клеток (Tрег). Иммуносупрессорные Bрег, продуцирующие ИЛ-10, участвуют в поддержании гомеостаза в иммунной системе и толерантности к собственным антигенам. Получены данные, демонстрирующие протективную роль Bрег в завершении воспаления, а также их патогенную роль через выработку аутоантител. В популяцию Bрег входит уникальный функционально определенный подкласс, который в настоящее время может быть детектирован только по способности продуцировать и секретировать ИЛ-10 после соответствующей стимуляции ex vivo. В настоящее время накоплены доказательства, подтверждающие важную роль Bрег в аутоиммунных и инфекционных заболеваниях, а также в формировании трансплантационной толерантности и в развитии опухолей. Bрег также вовлечены в процесс становления селективной иммунной толерантности в течение беременности, необходимой для обеспечения иммунопривилегированного микроокружения полуаллогенного плода. Показано, что нарушение численности и функциональной активности Bрег может приводить к развитию различных иммуноопосредуемых патологий беременности, таких как повторные неудачи имплантации, привычное невынашивание беременности и преждевременные роды. В обзоре представлены результаты исследований, посвященных изучению биологии и функциональной роли Bрег в регуляции процессов репродукции.

Антимикробные белки и пептиды нейтрофильных гранулоцитов как модуляторы системы комплемента

Резюме

Нейтрофильные гранулоциты (нейтрофилы) и система комплемента - важные факторы врожденного иммунитета позвоночных. Вследствие длительной коэволюции между ними сформировались разнообразные отношения. Накоплены данные о действии антимикробных белков и пептидов нейтрофилов на комплемент. В данной работе кратко рассматривается биология нейтрофилов и комплемента, систематизируются работы, посвященные действию миелопероксидазы, активных форм кислорода, лизоцима, антимикробных пептидов, лактоферрина, нейтрофильных внеклеточных ловушек, фрагментов нейтрофилов и тотального вещества гранул на комплемент человека. Акцент делается на физиологической и патофизиологической роли такой модуляции.

Хроника

17-й Международный междисциплинарный конгресс по аллергологии и иммунологии (23-25 июня 2021 г., Москва)

Резюме
Юбилей

Профессор Фируз Юсупович Гариб

Резюме
Памятные даты

Александр Александрович Ярилин К 80-летию со дня рождения

Резюме

Материалы данного сайта распространяются на условиях лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License («Атрибуция - Всемирная»)


Журналы «ГЭОТАР-Медиа»