Текущий номер
№ 2 . 2023
Молекулярная иммунология

Синтетический пептид, имитирующий антигенный сайт белка F, подавляет инфекцию респираторно-синцитиального вируса в экспериментах in vitro

Резюме

Введение. Респираторно-синцитиальный вирус (РСВ) - один из самых распространенных патогенов, вызывающих заболевания дыхательных путей. К настоящему времени не создано эффективной вакцины против РСВ-инфекции, а использование моноклональных антител для иммунопрофилактики ограничено их высокой стоимостью. Для фармакотерапии применяют рибавирин, однако он вызывает неблагоприятные побочные эффекты. Один из перспективных подходов - использование природных и синтетических пептидов в качестве антивирусных средств. Детальное раскрытие структуры вириона позволило установить ведущую роль поверхностного гликопротеина вируса (белка F) в инфекционном процессе. Молекулярное и иммунологическое картирование белка F позволило идентифицировать внутри него функциональные домены HR-1 и HR-2, подвижность которых обеспечивает слияние вириона с клеткой. При этом внутри домена HR-1 располагается так называемый нулевой антигенный сайт Ø, инактивация которого существенно тормозит инфекционный процесс.

Цель исследования - проектирование пептида, имитирующего антигенный сайт Ø белка F (пептид КК-44), и его разветвленного аналога (КК-45), а также изучение противовирусных свойств этих пептидов в отношении РСВ.

Материал и методы. Пептиды были синтезированы твердофазным методом, для очистки применяли метод высокоэффективной жидкостной хроматографии. Подлинность подтверждали методом масс-спектрометрии. Цитотоксичность изучали в МТТ-тесте. Антивирусную активность изучали в экспериментах in vitro на культуре клеток МА-104, чувствительных к РСВ. Методом иммуноферментного анализа (ИФА) изучали способность пептидов взаимодействовать с РСВ и с клеточным рецептором.

Результаты. Продемонстрировано, что линейный пептид КК-44 связывался с вирусом, но не оказывал существенного влияния на инфекционный процесс. В то же время разветвленный аналог (пептид КК-45) значительно ингибировал РСВ-инфекцию in vitro за счет следующих возможных механизмов: 1) взаимодействие с белком слияния F, что препятствует его функционированию; 2) конкурентное ингибирование рецептора - белка нуклеолина.

Заключение. Разветвленный пептид КК-45 обладает антивирусными свойствами по отношению к РСВ, что делает его перспективным для возможного терапевтического применения.

Клеточная иммунология

Получение и характеристика стабильных антиген-специфических Т-регуляторных клеток с помощью блокаторов циклин-зависимых киназ

Резюме

Введение. В иммунной системе регуляторные CD4+CD25highFoxP3+-T-клетки (Трег) являются важными участниками индукции толерантности. Трег подавляют воспалительные реакции различной этиологии, включая аутоиммунные и трансплантационные. Используя заложенный регуляторный потенциал Трег, индуцированных in vitro, можно добиться подавления воспалительных реакций на конкретный антиген, не затрагивая иммунный ответ в целом.

Цель исследования - получение антиген-специфичных FoxP3+-Трег, обладающих иммуносупрессивными свойствами, в смешанной культуре лимфоцитов.

Материал и методы. В исследовании использовали самцов мышей линий C57BL/6 и Balb/c. Полученные дендритные клетки от мышей линии C57BL/6 и CD4+-спленоциты от мышей линии Balb/c сокультивировали для получения антиген-специфических CD4+-Т-клеток. Далее CD4+-Т-клетки культивировали с добавлением AS2863619, ТФРβ и ИЛ-2 для трансдифференцировки антиген-специфических эффекторных Т-лимфоцитов в антиген-специфические CD4+CD25highFoxP3+-Трег. Фенотип полученных Трег оценивали с помощью проточной цитофлуориметрии. Оценку толерогенного потенциала Трег проводили с помощью смешанной культуры лимфоцитов.

Результаты. Показано, что совместное использование анти-CD3 и AS2863619 приводит к 10-кратному увеличению относительного количества CD25highFoxP3+-Трег в культуре CD4+-Т-лимфоцитов по сравнению с нестимулированными лимфоцитами. Анализ с помощью проточной цитометрии показал, что в культуре антиген-специфичных Трег (Аг-Трег) преобладает популяция эффекторных Т-клеток памяти. При этом в культуре не Аг-Трег резидентные Т-клетки памяти составляли лишь около половины субпопуляции. В смешанной культуре лимфоцитов было выявлено, что в присутствии не Аг-Трег в 2,5 раза увеличивается пролиферация CD4+-Т-лимфоцитов Balb/c в ответ на добавление антигена C57Bl/6. Однако в присутствии Аг-Трег даже при добавлении антигенов C57Bl/6 уровень пролиферации CD4+-Т-лимфоцитов Balb/c не отличается от контрольной группы.

Заключение. Применение AS2863619 при культивировании антиген-специфичных CD4+-лимфоцитов усиливает генерацию Аг-Трег. При этом получаемые Аг-Трег обладают фенотипическими свойствами эффекторных регуляторных Т-клеток памяти и функционально подавляют пролиферацию CD4+-лимфоцитов на антигены, что делает целесообразным изучение их способности к индукции иммунологической толерантности и подавлению иммунного ответа.

Вакцины и вакцинация

Динамическая оценка напряженности иммунного ответа на SARS-CoV-2-инфекцию и иммунизацию против COVID-19 вакциной "Спутник V"

Резюме

Введение. Поиски оптимального решения по предотвращению развития осложнений COVID-19 и снижению смертности от этого высококонтагиозного заболевания существенно осложняются высокой вирулентностью и постоянными мутациями вируса. Важную роль в совершенствовании алгоритмов диагностики и лечения новой коронавирусной инфекции играет мониторинг показателей иммунного ответа населения на инфекцию SARS-CoV-2. Настоящая работа продолжает серию исследований особенностей специфического иммунитета к SARS-CoV-2 у реконвалесцентов и реципиентов вакцины "Спутник V".

Цель работы - сравнительная оценка напряженности иммунного ответа на инфекцию SARS-CoV-2 и иммунизацию против COVID-19 вакциной "Спутник V" спустя 4 и 13 мес после вакцинации в динамике.

Материал и методы. Исследовано содержание IgG-антител к S- и N-антигенам SARS-CoV-2 в 74 образцах сывороток крови индивидуумов в возрасте от 18 до 70 лет, переболевших COVID-19, а затем прошедших полный курс иммунизации вакциной "Спутник V" через 4 и 13 мес после вакцинации. Также исследовано 12 образцов сыворотки крови индивидуумов, прошедших полный курс иммунизации вакциной "Спутник V", но не переболевших COVID-19. Ранжирование по возрасту и полу признаку в исследовании не требовалось.

Результаты. Высокий уровень IgG-антител к S-белку SARS-CoV-2 наблюдается у 85 % переболевших индивидуумов через 4 мес после вакцинации и у 67 % через 13 мес после вакцинации. Показано значительное увеличение доли высокого уровня IgG-антител к белку нуклеокапсида при почти двукратном снижении долей "серой зоны" и отрицательных результатов предположительно после возможного контакта со штаммом "омикрон" SARS-CoV-2 или COVID-19, перенесенного в бессимптомной форме.

Заключение. Проведенное исследование показало наличие напряженного поствакцинального и постинфекционного гуморального иммунитета у индивидуумов, ранее переболевших COVID-19, спустя 4 и 13 мес после вакцинации.

Онкоиммунология

Влияние капсульного полисахарида и детоксифицированного липополисахарида Shigella sonnei на рост опухолевого узла и синтез цитокинов у мышей линии С57Bl/6 после инокуляции меланомы В16

Резюме

Введение. Злокачественная меланома представляет собой иммуногенную опухоль, клетки которой распознаются иммунной системой. При определенных условиях иммунная система может подавить развитие злокачественного новообразования. Об этом свидетельствуют клинические наблюдения спонтанной регрессии и полной элиминации опухоли у отдельных больных.

Одним из возможных подходов к индукции регрессии злокачественных опухолей является стимуляция клеток иммунной системы продуктами бактериального происхождения. При этом ключевую роль играют Толл-подобные рецепторы, распознающие консервативные структуры микроорганизмов и активирующие врожденный и адаптивный иммунный ответ.

Цель работы - изучение способности двух соединений бактериальной природы: детоксифицированного липополисахарида (Ас3-S-ЛПС) и капсульного полисахарида (КПС), полученных из микроорганизмов Shigella sonnei фаза 1, стимулировать противоопухолевый иммунный ответ у экспериментальных животных с привитой злокачественной меланомой.

Материал и методы. В качестве модели для проведения исследования использовали перевиваемую клеточную линию меланомы В16 (предоставлена лабораторией клеточного иммунитета НИИ ЭДиТО ФГБУ "НМИЦ онкологии им. Н.Н. Блохина" Минздрава России). О противоопухолевой активности препаратов судили по влиянию препаратов на рост первичных опухолевых узлов (ПОУ) у мышей С57Bl/6J после введения опухолевых клеток. При изучении механизмов противоопухолевой активности оценивали влияние препаратов на образование оксида азота (NO) и синтез цитокинов (ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-10, ФНО и ГМ-КСФ).

Результаты. Показано, что введение мышам Ас3-S-ЛПС и КПС приводит к замедлению роста ПОУ, которое не связано с непосредственным цитотоксическим действием соединений на опухолевые клетки. Ас3-S-ЛПС и КПС, как и нативный ЛПС Shigella sonnei, не способны индуцировать синтез NO клетками меланомы В16. При этом Ас3-S-ЛПС и нативный ЛПС индуцируют его в культуре клеток ПОУ. Показано, что клетки меланомы В16 при культивировании in vitro спонтанно продуцируют 3 из 5 исследованных цитокинов (ИЛ-1β, ИЛ-6 и ИЛ-10) и не синтезируют ФНО и ГМ-КСФ. Добавление к клеткам ЛПС Shigella sonnei или Ас3-S-ЛПС стимулировало синтез ИЛ-1β, ИЛ-6, ИЛ-10 и не влияло на синтез двух других цитокинов.

В супернатантах культур ПОУ были обнаружены цитокины ФНО, ГМ-КСФ и ИЛ-4, концентрация которых увеличивалась при добавлении в культуры Ас3-S-ЛПС. Введение Ас3-S-ЛПС непосредственно в ПОУ приводило к стимуляции синтеза ИЛ-10 и не влияло на синтез других цитокинов.

Заключение. На модели перевиваемой меланомы исследована противоопухолевая активность двух соединений бактериальной природы: Ас3-S-ЛПС и КПС микроорганизмов Shigella sonnei фаза 1, ранее не изучавшихся в этом аспекте. Полученные результаты позволяют отнести их к агонистам TLRs, подавляющим рост злокачественной меланомы В16 после инокуляции экспериментальным животным в результате стимуляции реакций врожденного иммунитета. Исследование влияния цитокинов, индуцированных взаимодействием лигандов бактериального происхождения с TLRs на клетках иммунной системы и опухоли, ведет к более глубокому пониманию патофизиологии канцерогенеза и может способствовать разработке приемов таргетной терапии для ингибирования опухолевого роста.

Клиническая иммунология

Прогностическое значение фенотипических изменений лимфоцитов при геморрагической лихорадке с почечным синдромом

Резюме

Введение. Хантавирусы широко распространены в природе, поражая животных и формируя природные резервуары. У людей, проживающих в зоне природных очагов, эти вирусы чаще всего вызывают геморрагическую лихорадку с почечным синдромом (ГЛПС) - тяжелое заболевание с поражением сосудов и почек при большой вероятности летального исхода, имеющее огромное медико-социальное значение.

Цели - иммунопатогенетическое обоснование роли отдельных субпопуляций лимфоцитов в развитии ГЛПС тяжелого течения и разработка на этой основе критериев прогнозирования тяжести течения в начальный период заболевания.

Материал и методы. Были обследованы 37 человек, у 24 из них была диагностирована ГЛПС (у 16 пациентов - среднетяжелого течения, у 8 пациентов - тяжелого). Остальные 15 человек были клинически здоровы и составили группу сравнения. Всем обследованным лицам в первые дни заболевания выполнялась проточная цитофлуориметрия клеток крови с определением фенотипа лимфоцитов врожденного и адаптивного иммунитета.

Результаты. В процессе исследования было установлено, что у пациентов наблюдались два типа иммунологических сдвигов в зависимости от степени тяжести, которую принимала впоследствии ГЛПС. При тяжелом течении заболевания отмечено снижение соотношения содержания Т-хелперов и цитотоксических Т-лимфоцитов (ЦТЛ) (CD3+CD4+/CD3+CD8+) среди лимфоцитов крови, а также рост соотношения содержания NKG2D+-ЦТЛ и CD8+-Трег (CD3+CD8+CD314+/CD3+CD8+FoxP3+). Последнее соотношение оказалось более диагностически значимым и получило название цитотоксическо-регуляторного индекса (ЦРИ). При ЦРИ > 2,4 рекомендуется относить пациента с ГЛПС к группе риска развития тяжелого течения заболевания.

Заключение. Полученные результаты создают научную и клинически значимую основу для прогнозирования ГЛПС тяжелого течения, используя соотношение содержания NKG2D+-ЦТЛ и CD8+-Трег среди лимфоцитов крови, что должно быть уточнено в дальнейшем при обследовании большей выборки пациентов.

Динамика клинико-иммунологических показателей у пациентов, перенесших COVID-19 среднетяжелого течения и получавших терапию с включением ингибитора янус-киназ

Резюме

Введение. Исследование патогенеза коронавирусной инфекции COVID-19 остается одной из главных задач современной науки. Изучив механизмы развития заболевания, можно гораздо эффективнее снижать риски развития тяжелого течения заболевания. Дыхательная недостаточность, "цитокиновый шторм", тромботические осложнения - все это ассоциируется с неблагоприятным прогнозом новой коронавирусной инфекции. Используемая таргетная терапия в борьбе с развитием этих осложнений имеет успех в лечении пациентов с COVID-19. Одним из упреждающих механизмов в патогенезе "цитокинового шторма" является блокирование сигнального пути JAK-STAT с помощью ингибиторов янус-киназ.

Очень важно представлять эффективность используемых препаратов, а также их безопасность не только в острый период заболевания, но и в постковидный период. Сферой интереса являются изменения клинико-лабораторных показателей и показателей врожденного и адаптивного иммунитета после перенесенного заболевания у пациентов, получавших терапию с включением ингибитора янус-киназ.

Цель - изучение клинико-иммунологических показателей пациентов, перенесших COVID-19 среднетяжелого течения и получавших терапию с включением ингибитора янус-киназ, в остром периоде заболевания и через 6 мес после выписки/выздоровления.

Материал и методы. Обследованы 30 пациентов, госпитализированных с диагнозом "коронавирусная инфекция, вирус идентифицирован, COVID-19, среднетяжелая форма; осложнение: интерстициальная пневмония". В комплексное лечение пациентов данной группы был включен ингибитор янус-киназ (барицитиниб). Группу сравнения составили 20 пациентов, госпитализированных в стационар с идентичным диагнозом, в лечении которых ингибитор янус-киназ не использовали. Оценивали динамику лабораторных показателей (общеклинические, биохимические и иммунологические) на фоне проводимой терапии ингибиторами янус-киназ при поступлении в стационар, при выписке пациента, а также 6 мес спустя.

Результаты. Эффективность применения ингибитора янус-киназ барицитиниба проявляется в снижении уровня маркеров прогноза тяжелого течения инфекции, а также в сокращении сроков госпитализации больных. К моменту выписки/выздоровления отмечается снижение уровней С-реактивного белка, лактата, фибриногена. Уровень лактатдегидрогеназы к моменту выписки/выздоровления снижается до референсных значений в группе с применением барицитиниба. Спустя полгода после выписки из стационара отмечается нормализация уровня С-реактивного белка до референсных значений. К моменту выписки зафиксировано снижение уровней ИЛ-10, ИЛ-6 и ИФН-γ. Независимо от применения ингибитора янус-киназ сохраняются изменения показателей врожденного и адаптивного иммунитета в виде повышенного содержания ЦИК и НК-клеток (СD16+). В случае применения в упреждающей терапии дексаметазона без использования барицитиниба у пациентов спустя полгода после выписки из стационара уровень CD3+CD4+-лимфоцитов был достоверно выше, а сывороточных IgG - ниже.

Заключение. Применение барицитиниба в комплексном лечении, включающем ГКС-терапию, противовирусную терапию, антикоагулянты, приводит к достоверному снижению показателей, свидетельствующих о развитии "цитокинового шторма", а также к уменьшению цитопатического действия вируса. Дисрегуляторные процессы в иммунной системе, возникающие во время заболевания, сохраняются даже спустя 6 мес после выздоровления пациентов, перенесших COVID-19 среднетяжелого течения.

Иммунология репродукции

Особенности продукции цитокинов, регулирующих активность натуральных киллеров, у женщин с лейомиомой матки

Резюме

Введение. Естественные киллеры (НК) играют важную роль в регуляции роста опухолей. Контроль активности НК во многом осуществляется микроокружением, в котором главную роль играют цитокины.

Цель исследования - оценить влияние ИЛ-18, ИЛ-27 и ИЛ-35, регулирующих функцию НК, у пациенток с лейомиомой матки (ЛММ).

Материал и методы. В исследовании принимали участие 51 пациентка репродуктивного возраста с симптомной интрамуральной ЛММ и 12 практически здоровых женщин без данной патологии. Методом иммуноферментного анализа оценивали уровни ИЛ-18, ИЛ-27 и ИЛ-35 в сыворотке периферической крови, лизатах тканей эндометрия и миоматозных узлов.

Результаты. У женщин с ЛММ содержание ИЛ-18 в сыворотке крови было ниже в сравнении с женщинами без ЛММ. ИЛ-27 в сыворотке детектировался только у 20/51 (39,2%) пациенток с ЛММ. У женщин репродуктивного возраста с ЛММ было характерно более высокое содержание ИЛ-27 в тканях эндометрия, чем у женщин без ЛММ. В тканях миоматозных узлов выявлялись более низкие уровни всех изучавшихся цитокинов, регулирующих активность НК, в сравнении с таковым в эндометрии.

Заключение. Наличие миоматозных узлов влияет на продукцию цитокинов, регулирующих активацию НК в тканях эндометрия, однако в тканях самих миоматозных узлов продукция цитокинов, как с активирующей, так и с ингибирующей активностью, участвующих в регуляции функции НК, остается сравнительно низкой.

Цитокины

Эффективность включения интерферона гамма в химиотерапию туберкулеза: экспериментальное исследование

Резюме

Введение. В настоящее время во фтизиатрии сохраняется потребность в новых препаратах и лекарственных средствах с новыми механизмами действия, которые могли бы быть эффективными в отношении чувствительных и устойчивых форм туберкулеза, а также предотвратить развитие резистентности микобактерий к противотуберкулезным препаратам, сократить продолжительность лечения и финансовое бремя данной нозологии.

Цель работы - оценка терапевтического эффекта включения интерферона гамма в терапию Изониазидом туберкулеза у морских свинок, вызванного чувствительным ко всем противотуберкулезным препаратам штаммом M. tuberculosis H37Rv.

Материал и методы. Эффективность лечения животных оценивали по таким показателям, как продолжительность жизни, прибавка массы тела, наличие и интенсивность бактериовыделения методами микроскопии и посева, а также по характеру и степени выраженности гистологических изменений внутренних органов.

Результаты. В результате изучения терапевтического действия препарата Ингарон (интерферон гамма человеческий рекомбинантный) при инфекции, вызванной M. tuberculosis H37Rv, у морских свинок отмечено потенцирование противотуберкулезного эффекта известного препарата Изониазида. M. tuberculosis не обнаружены методом посева из легочной ткани и селезенки животных, получавших комбинированную терапию. Кроме того, в легочной ткани животных, получавших Изониазид в комбинации с интерфероном гамма, отмечены минимально выраженные гистологические изменения, а в ткани селезенки у животных этой группы они полностью отсутствовали.

Обсуждение. В процессе тысячелетней коэволюции возбудителя ТБ с организмом хозяина обе стороны выработали различные варианты взаимного сдерживания, что позволяет этой паразитарной системе длительное время существовать в состоянии динамического равновесия. Недавние исследования подтвердили результаты, представленные в настоящей статье, показав, что интерферон гамма может повышать антибактериальную активность Изониазида и приводить к полной стерилизации культуры, включая фенотипически устойчивых к Изониазиду микобактерий. Таким образом баланс может быть сдвинут в сторону полного прекращения бактериовыделения и успешного клинического исхода инфекционного заболевания.

Заключение. Включение иммуномодулирующего препарата Ингарон в терапию лекарственно-чувствительного туберкулеза Изониазидом позволило быстрее достичь прекращения бактериовыделения. Кроме того, у животных, получавших комбинированную терапию, в меньшей степени были выражены гистологические изменения внутренних органов по сравнению с животными, получавшими монотерапию Изониазидом.
Методы

Сравнение инструментов биоинформатики для HLA-типирования на основе данных WGS

Резюме

Введение. Широкое распространение секвенаторов в научно-исследовательских и медицинских учреждениях, удешевление процесса секвенирования и внедрение его в клиническую практику делают целесообразным оценку дополнительных параметров на основе данных секвенирования генома и экзома пациентов. Так, данные полноэкзомного и полногеномного секвенирования позволяют получить не только информацию об однонуклеотидных полиморфизмах, малых делециях и инсерциях, о некоторых типах структурных вариантов, но и об HLA-генотипе. На основе данных высокоэффективного секвенирования (new generation sequencing, NGS) можно проводить массовое типирование аллелей HLA с использованием передовых инструментов биоинформатики. При использовании наиболее подходящих инструментов результаты HLA-типирования на основе данных NGS могут способствовать более точному описанию частот встречаемости аллелей HLA в популяциях, пополнению базы данных Allele Frequency Net Database, изучению особенностей распространения аллелей HLA внутри различных этносов, поиску ассоциаций с аутоиммунными заболеваниями.

Цель исследования - подбор оптимального инструмента для HLA-типирования с помощью полногеномного секвенирования (whole genome sequencing, WGS) для его включения в биоинформатический сценарий обработки данных.

Материал и методы. Для 150 образцов замороженной крови проведено полногеномное секвенирование с последующей биоинформатической обработкой. HLA-типирование по данным WGS осуществлялось с помощью инструментов: xHLA, POLYSOLVER, HLA-LA, HLAscan, OptiType, Kourami. Библиотеки для таргетного секвенирования региона HLA для этих же 150 образцов готовились с использованием пула праймеров NGSgo-MX6-1 (GenDX, Нидерланды) и набора NGSgo-LibrX (GenDX, Нидерланды). Типирование аллелей HLA на основе данных таргетного секвенирования проводилось с помощью программы NGSengine.

Результаты. В рамках исследования изучена точность типирования с применением биоинформатических инструментов xHLA, OptiType, HLAscan, POLYSOLVER, HLA-LA, Kourami при анализе данных полногеномного секвенирования образцов крови человека с покрытием ≥ 30x. В качестве эталонных данных приняты результаты типирования, полученные с помощью набора NGSgo-MX6-1 (GenDX, Нидерланды). Наибольшую точность типирования HLA класса I показал инструмент POLYSOLVER, для HLA класса II - xHLA с версией базы IMGT/HLA 3.22.0. Инструменты POLYSOLVER и OptiType требуют значительного времени и вычислительных ресурсов, в связи c этим для массового HLA-типирования больше подходят биоинформатические инструменты Kourami и HLAscan.

Все рассмотренные биоинформатические инструменты допускают больше ошибок при типировании локусов HLA класса II, чем при типировании локусов HLA класса I, несмотря на то что разнообразие аллелей HLA класса II существенно меньше, чем класса I. Наибольшее количество некорректно определенных аллелей наблюдалось для локуса DQB1.

Заключение. Результаты и выводы, полученные в рамках исследования, представляют собой основу методического подхода к выбору оптимального инструмента HLA-типирования для использования в биоинформатических сценариях обработки данных полногеномного и/или полноэкзомного секвенирования.

Обзоры

Иммунопатогенез и таргетная терапия болезни Альцгеймера

Резюме

Болезнь Альцгеймера (БАл) - одно из самых распространенных нейродегенеративных заболеваний у пожилых людей во всем мире. Однако неоднозначность развития и причинно-следственных факторов БАл приводит к расхождению в понимании патогенеза заболевания и может быть одной из причин сложности разработки лекарств от БАл. В обзоре представлены новые данные о проведении клинических испытаний методов лечения, влияющих на патофизиологические процессы при БАл. Рассмотрены таргетные препараты, которые направлены на нейровоспаление, индуцированное инфламмасомой NLRP3, а также моноклональные антитела и препараты для активной иммунизации против β-амилоида, τ-белка.

Хроника

Школа по аллергологии и иммунологии имени академика РАН Р.М. Хаитова

Резюме
Юбилеи

Заира Григорьевна Кадагидзе

Резюме

Игорь Владимирович Борисевич

Резюме

Материалы данного сайта распространяются на условиях лицензии Creative Commons Attribution 4.0 International License («Атрибуция - Всемирная»)


Журналы «ГЭОТАР-Медиа»